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大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究
1
作者
孙朝晖
赖燕来
+3 位作者
曾文文
郭雅南
左焕琮
谢佐平
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期969-973,共5页
为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包...
为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包涵体 .用His tag特异性结合树脂纯化可溶性融合蛋白 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一区带 ,凝胶自动扫描分析表明 ,Shh N的纯度达 85%以上 .纯化后的Shh N在成纤维生长因子 8(FGF8)的协同作用下 ,能诱导神经前体细胞 (NPC)向酪氨酸羟化酶阳性神经元 (TH+ )发育 .在此基础上可以诱导不同类型的人类干细胞定向分化为多巴胺 (DA)神经元 ,从而为临床治疗帕金森病 (PD)
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关键词
重组融合蛋白
蛋白质纯化
神经
前体细胞
th
免疫
阳性
神经元
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职称材料
题名
大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究
1
作者
孙朝晖
赖燕来
曾文文
郭雅南
左焕琮
谢佐平
机构
清华大学生物科学与技术系
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期969-973,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30 0 70 2 4 5)~~
文摘
为了获得重组SonichedgehogN端蛋白 (Shh N)并研究其功能 ,应用PCR技术扩增Shh NcDNA ,然后克隆至原核表达质粒中 ,转化E .coli后获得表达菌株 ,经 1mmol/LIPTG诱导高效表达出带有His tag的融合蛋白 ,其中大部分为可溶性蛋白 ,少量为包涵体 .用His tag特异性结合树脂纯化可溶性融合蛋白 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一区带 ,凝胶自动扫描分析表明 ,Shh N的纯度达 85%以上 .纯化后的Shh N在成纤维生长因子 8(FGF8)的协同作用下 ,能诱导神经前体细胞 (NPC)向酪氨酸羟化酶阳性神经元 (TH+ )发育 .在此基础上可以诱导不同类型的人类干细胞定向分化为多巴胺 (DA)神经元 ,从而为临床治疗帕金森病 (PD)
关键词
重组融合蛋白
蛋白质纯化
神经
前体细胞
th
免疫
阳性
神经元
Keywords
sonic hedgehog N-terminal protein
fusion protein
protein purification
neural progenitor cells
th
+ neurons
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
Q42
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究
孙朝晖
赖燕来
曾文文
郭雅南
左焕琮
谢佐平
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2003
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