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用酵母双杂交技术筛选DND1相互作用蛋白(英文) 被引量：1
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作者 张菁 李顺东 +2 位作者 张勇 杨智 彭小宁 《湖南师范大学学报（医学版）》 2011年第2期9-12,共4页
目的:小鼠睾丸生殖细胞瘤易感蛋白DND1是在进化中保守的RNA结合蛋白。为了进一步了解DND1的功能,我们筛选了与DND1相互作用的蛋白。方法:采用酵母双杂交系统,用Dnd1基因编码序列构建诱饵载体筛选小鼠10.5天的胚胎文库。结果:筛选小鼠胚... 目的:小鼠睾丸生殖细胞瘤易感蛋白DND1是在进化中保守的RNA结合蛋白。为了进一步了解DND1的功能,我们筛选了与DND1相互作用的蛋白。方法:采用酵母双杂交系统,用Dnd1基因编码序列构建诱饵载体筛选小鼠10.5天的胚胎文库。结果:筛选小鼠胚胎cDNA文库得到4个与DND1相互作用蛋白,分别为Jun蛋白、辅肌动蛋白α、核受体结合蛋白和氯离子通道2。结论:DND1可能参与调节细胞増殖、迁移及细胞转化等过程。 展开更多
关键词 酵母双杂交 DND1 相互作用蛋白 tgct
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虾青素通过激活MAPK信号通路诱导睾丸生殖细胞瘤细胞凋亡和自噬 被引量：3
2
作者 梁少奎 阳国梁 +4 位作者 胡慧 徐越 肖沛 罗梓玉 周畅 《生命科学研究》 CAS CSCD 2022年第1期39-46,53,共9页
为了研究虾青素对睾丸生殖细胞瘤细胞株NCCIT和NT2细胞凋亡、自噬的影响及可能的作用机制,用梯度浓度的虾青素对NCCIT和NT2细胞进行处理后,采用MTT实验、台盼蓝拒染法和细胞克隆实验检测各组细胞的增殖速率;采用Annexin V-FITC/PI双染... 为了研究虾青素对睾丸生殖细胞瘤细胞株NCCIT和NT2细胞凋亡、自噬的影响及可能的作用机制,用梯度浓度的虾青素对NCCIT和NT2细胞进行处理后,采用MTT实验、台盼蓝拒染法和细胞克隆实验检测各组细胞的增殖速率;采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Hoechst33258荧光染色法观察各组细胞的形态变化;采用Western-blot法检测细胞凋亡相关蛋白质(Bcl-2、Bax、caspase-3、PARP)、自噬蛋白(Beclin1、LC3)的表达水平,以及MAPK信号通路蛋白质细胞外信号调控的激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)、p38的表达及磷酸化水平。结果显示,与空白对照组比较,虾青素处理组中NCCIT和NT2细胞的增殖速率明显降低,细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞出现体积变小、细胞核荧光强度增高、核固缩等凋亡特征,同时,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax、自噬蛋白Beclin1和LC3Ⅱ表达上调。此外,虾青素可剂量依赖性地增加ERK、JNK、p38的磷酸化水平。以上结果表明,虾青素可抑制睾丸生殖细胞瘤细胞系(NCCIT/NT2)生长,诱导细胞凋亡和自噬,其机制可能与虾青素激活MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 虾青素 睾丸生殖细胞瘤(tgct) 细胞凋亡 细胞自噬 MAPK信号通路
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