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PRV感染三叉神经节细胞对PI3K/Akt信号通路的影响及其调控凋亡 被引量：7
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作者 张森 汤德元 +7 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 杨志刚 晏仁潭 韩超逸 陈阊峥 罗柳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期208-217,共10页
以小鼠三叉神经节(TG)原代细胞为基础,应用实时荧光定量PCR(q-PCR)、Western blot等方法检测伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)(MOI=1)感染TG细胞后不同时间点PI3K、Akt基因的转录水平和蛋白表达情况。PRV感染TG细胞后,利用PI3K特... 以小鼠三叉神经节(TG)原代细胞为基础,应用实时荧光定量PCR(q-PCR)、Western blot等方法检测伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)(MOI=1)感染TG细胞后不同时间点PI3K、Akt基因的转录水平和蛋白表达情况。PRV感染TG细胞后,利用PI3K特异性抑制剂LY294002处理后的TG细胞,通过Annexin V-FITC原位荧光检测方法、流式细胞术和Western blot方法观察细胞凋亡以及检测Akt下游凋亡相关因子Bcl-2以及Bax的表达。结果显示,PRV感染TG细胞后早期会促进PI3K、Akt基因mRNA转录(P<0.01),但随着时间推移对PI3K、Akt基因的转录产生抑制作用(P<0.01);Western blot结果显示PRV感染TG细胞的早期会显著诱导Akt的磷酸化,而对PI3K及Akt的蛋白表达呈现出抑制作用或先促进后抑制的现象,与mRNA转录情况基本一致;同时,IFA观察到TG细胞内Akt发生明显的磷酸化。与对照组相比,PRV感染阻断PI3K的TG细胞出现了明显的细胞凋亡现象,且Bcl-2/Bax比值下降,说明PRV感染TG细胞后会调控PI3K/Akt信号通路并通过该通路抑制细胞凋亡。该研究结果为深入阐明PRV感染TG细胞的致病机制以及探究PRV在TG细胞中潜伏感染的过程奠定基础。 展开更多
关键词 PRV 三叉神经节细胞 PI3K/AKT 细胞凋亡
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