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HSP90在胆管癌组织与细胞中的表达及17-AAG对胆管癌细胞株的影响 被引量:3
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作者 张晶锐 高峰 +2 位作者 李荣江 邱振雄 黄振华 《中国现代普通外科进展》 CAS 2017年第12期933-936,共4页
目的 :探讨HSP90在胆管癌组织与细胞中的表达情况及17-AAG对胆管癌TE-1细胞株的影响。方法:选择我院2015年7月—2016年7月收治的40例胆管癌患者作为研究对象,分别检测患者胆管癌组织、癌旁组织及正常组织的HSP90α表达情况,应用不同浓度... 目的 :探讨HSP90在胆管癌组织与细胞中的表达情况及17-AAG对胆管癌TE-1细胞株的影响。方法:选择我院2015年7月—2016年7月收治的40例胆管癌患者作为研究对象,分别检测患者胆管癌组织、癌旁组织及正常组织的HSP90α表达情况,应用不同浓度的17-AAG对胆管癌TE-1细胞株进行处理并检测HSP90及其效应蛋白HIF-1α的表达情况。结果:胆管癌组织的总阳性率为82.5%,高于癌旁组织的35.0%与正常组织的20.0%(均P<0.05)。胆管癌组织的强阳性表达率为37.5%,高于癌旁组织的10.0%与正常组织的5.0%(均P<0.05)。患者胆管癌组织的HSP90α表达与浸润深度、淋巴结转移无关(P>0.05),但与TNM分期及肿瘤直径有明显相关性(P<0.05)。随着17-AAG处理浓度的升高,HSP90α/β-actin、HIF-1α/β-actin降低,不同处理浓度下胆管癌TE-1细胞株HSP90α及其效应蛋白HIF-1α表达均有统计学意义(P<0.05)。结论:HSP90在胆管癌组织及细胞中高表达,且表达情况与临床分期及肿瘤直径有关。17-AAG可下调胆管癌TE-1细胞株中HSP90α及HIF-1α表达,对于临床治疗有一定指导作用。 展开更多
关键词 胆管癌 HSP90 17-AAG te-1细胞株
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RNAi抑制食管癌TE-1细胞株血管生长素表达的实验研究 被引量:1
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作者 王同建 徐志云 +4 位作者 黄盛东 乔彬 刘晓红 袁扬 龚德军 《实用医药杂志》 2006年第4期446-449,共4页
目的构建介导血管生长素(Angiogenin,ANG)短发夹RNA(ShorthairpinRNA,shRNA)表达的真核质粒载体,研究RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对食管癌细胞株TE-1中ANG表达的抑制作用。方法依据Tuschl等设计原则,以ANG为靶基因设计并合成有... 目的构建介导血管生长素(Angiogenin,ANG)短发夹RNA(ShorthairpinRNA,shRNA)表达的真核质粒载体,研究RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术对食管癌细胞株TE-1中ANG表达的抑制作用。方法依据Tuschl等设计原则,以ANG为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA片段序列,经退火成互补双链,再克隆到载体pRNA-H1.1/Neo中构建重组质粒pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA。脂质体法转染重组质粒至食管癌TE-1细胞,以空质粒(pRNA-H1.1/Neo)转染为对照;半定量RT-PCR法及蛋白质印迹法分别观察TE-1细胞中ANG在核酸和蛋白水平表达量改变。结果①成功构建带ANG靶向的shRNA真核表达载体(pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA);②pRNA-H1.1/Neo-ANGshRNA转染TE-1细胞后,ANG在核酸和蛋白水平表达均较空载体pRNA-H1.1/Neo转染的对照组显著下降。结论成功构建真核表达质粒介导的ANG靶向RNA干扰重组质粒,转染TE-1细胞后能有效抑制ANG表达,为下一步利用RNAi技术抑制肿瘤血管形成以及局部侵袭和远处转移提供研究基础。 展开更多
关键词 RNAI te-1细胞株 血管生长素
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人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中肿瘤干细胞的培养分化及增殖侵袭能力分析 被引量:3
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作者 王永连 王忠民 +2 位作者 王毅 陶义鹏 韩高扬 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第1期55-59,共5页
背景:研究发现,食管癌组织中存在一类细胞亚群,具有一定的侵袭和转移性能,与治疗效果之间存在十分密切的联系。目的:从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离富含肿瘤干细胞的细胞球,并对其增殖和侵袭能力进行分析。方法:运用无血清培养... 背景:研究发现,食管癌组织中存在一类细胞亚群,具有一定的侵袭和转移性能,与治疗效果之间存在十分密切的联系。目的:从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离富含肿瘤干细胞的细胞球,并对其增殖和侵袭能力进行分析。方法:运用无血清培养基培养KYSE-150、TE-1细胞,观察细胞球的生成情况,采用MTT法以及Transwell小室实验检测细胞的增殖情况和侵袭能力,流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达。结果与结论:①KYSE-150、TE-1细胞在无血清培养条件下可以获得稳定传代的细胞球。②细胞球的增殖能力和侵袭能力均显著高于亲本细胞(P<0.05)。③TE-1细胞球和KYSE-150细胞球的CD44^+、CD271^+、CD44^+CD271^+细胞比例均显著高于TE-1亲本细胞和KYSE-150亲本细胞(P<0.05)。④实验结果提示,从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离出具有肿瘤干细胞特性的细胞球,具有很强的增殖和侵袭转移能力,且CD44和CD271可以作为重要的食管癌干细胞表面标志物。 展开更多
关键词 食管肿瘤 肿瘤干细胞 细胞增殖 组织工程 细胞 食管癌 KYSE-150细胞株 te-1细胞株 诱导分化 细胞 增殖 侵袭
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微小RNA-25过表达对食管癌TE-1、KSYE-150细胞株增殖与侵袭的影响 被引量:1
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作者 唐怀好 李时捷 石学新 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1263-1266,共4页
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-25过表达对食管癌TE1、KSYE-150细胞增殖与侵袭的影响。方法实验样本均来自青岛市中医院2016年1月至2017年6月45例食管癌患者肿瘤组织、癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm,且病理检查无癌细胞浸润)。实验分... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-25过表达对食管癌TE1、KSYE-150细胞增殖与侵袭的影响。方法实验样本均来自青岛市中医院2016年1月至2017年6月45例食管癌患者肿瘤组织、癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm,且病理检查无癌细胞浸润)。实验分为空白对照组、阴性对照组、模拟物转染组、抑制物转染组,分别将miR-25模拟物、抑制物转入食管癌TE1、KSYE-150细胞株,检测miR-25表达水平、TE1、KSYE-150细胞增殖能力及细胞周期变化。多组间比较行单因素方差分析,两组比较行配对t检验。结果(1)食管癌组织miR-25表达(1.288±0.214)明显高于正常组织miR-25表达(t=33.058,P<0.01);(2)TE1细胞模拟物转染组miR-25表达(2.452±0.360)明显高于阴性对照组,抑制物转染组miR-25表达(0.576±0.110)明显低于阴性对照组(t=8.212、7.553,P<0.05,P<0.01);KSYE-150细胞模拟物转染组miR-25表达(3.124±0.450)明显高于阴性对照组,抑制物转染组miR-25表达(0.624±0.120)明显低于阴性对照组(t=10.297、6.452,P<0.05,P<0.01),差异有统计学意义;(3)转染24、48、72、96 h,模拟物转染组TE-1细胞活性(35.25±5.24、96.45±8.21、165.36±18.24、223.45±20.24)明显高于阴性对照组(t=11.137、9.216、7.575、10.547,P<0.05,P<0.01),抑制物转染组TE-1细胞活性(4.21±0.72、22.36±4.21、52.15±7.36、63.45±7.36)明显低于阴性对照组(t=4.874、8.940、6.830、7.368,P<0.05,P<0.01);模拟物转染组KSYE-150细胞活性(42.36±6.36、102.65±13.45、172.36±22.45、242.31±25.35)明显高于阴性对照组(t=12.449、7.381、7.110、10.464,P<0.05,P<0.01);抑制物转染组KSYE-150细胞活性明显低于阴性对照组(5.42±0.75、25.12±7.24、62.45±8.36、67.36±8.45)(t=5.827、6.699、4.872、6.689,P<0.05),差异均有统计学意义;(4)模拟物转染组TE-1细胞G0/G1期(46.52±6.20)明显低于阴性对照组,S期(46.96±7.12)明显高于阴性对照组(t=4.096,5.044,P<0.05),抑制物转染组TE-1细胞G0/G1期(84.52±7.54)明显高于阴性 展开更多
关键词 食管癌 微小RNA-25 te-1细胞株 KYES-150细胞株 增殖 侵袭
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食管癌TE-1细胞生物学性状的相关性研究 被引量:1
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作者 李步强 许健 +3 位作者 李奇志 李晓义 谷锋泽 慕晓玲 《中国现代医药杂志》 2011年第10期33-36,共4页
目的研究食管癌TE-1细胞生物学性状。方法①将购自上海生命科学院的食管癌TE-1细胞株进行HE染色;②用MTT法绘制细胞生长曲线;③免疫组织化学检测细胞特异性免疫标志;④流式细胞仪分析细胞周期。结果①用DMEM高糖培养基培养,生长良好。H... 目的研究食管癌TE-1细胞生物学性状。方法①将购自上海生命科学院的食管癌TE-1细胞株进行HE染色;②用MTT法绘制细胞生长曲线;③免疫组织化学检测细胞特异性免疫标志;④流式细胞仪分析细胞周期。结果①用DMEM高糖培养基培养,生长良好。HE染色下,细胞大致分为3种:一种细胞呈椭圆形,核大,胞浆少,一种细胞呈三角形或多角形,大小,形态不等,一种细胞有双核或者多核,核大深染,染色质丰富,核分裂相多见;②细胞接种培养后其生长曲线呈近似S形。免疫组织化学检测3种抗体均表达阳性,其中CK7阳性表达定位于胞浆,Ki-67和p53定位于胞核;③TE-1细胞周期:半数细胞处于增生期,半数处于静止期。结论食管癌TE-1细胞符合食管鳞癌的特征。 展开更多
关键词 食管癌 te-1细胞株 生物学特性
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miRNA-149-5p对食管鳞状细胞癌Aurora-B表达的调控作用 被引量:1
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作者 孟利峰 白晓鸣 +2 位作者 周文 马骏 冯伟荣 《肿瘤研究与临床》 CAS 2019年第4期223-227,共5页
目的探讨食管鳞状细胞癌中miRNA-149-5p(miR-149-5p)对Aurora-B表达的调控作用。方法收集山西省人民医院2010年1月至2017年12月收治的61例食管鳞状细胞癌患者的病理组织蜡块,免疫组织化学染色检测肿瘤组织以及对应癌旁组织Aurora-B表达... 目的探讨食管鳞状细胞癌中miRNA-149-5p(miR-149-5p)对Aurora-B表达的调控作用。方法收集山西省人民医院2010年1月至2017年12月收治的61例食管鳞状细胞癌患者的病理组织蜡块,免疫组织化学染色检测肿瘤组织以及对应癌旁组织Aurora-B表达,组织切片原位杂交检测miR-149-5p表达,分析二者与临床病理参数之间的关系。通过TargetScan和miR walk软件预测对应miR-149-5p结合位点。运用蛋白质印迹法验证食管鳞状细胞癌TE-1细胞中Aurora-B及miR-149-5p的关系。结果免疫组织化学染色结果显示,61例患者中,37例(61%)肿瘤组织Aurora-B表达高于癌旁组织,15例(26%)与癌旁组织一致,9例(13%)低于癌旁组织;Aurora-B表达与患者年龄(χ^2=0.008,P=0.929)、性别(χ^2=0.088,P=0.767)、分化程度(χ^2=2.632,P=0.268)无关,而与TNM分期(χ^2=15.153,P<0.01)和淋巴结转移(χ^2=5.979,P=0.014)有关。TargetScan和miRwalk软件预测发现,miR-149-5p与Aurora-B 3'非翻译区(UTR)结合。61例石蜡组织切片原位杂交结果显示,miR-149-5p在22例(36%)患者肿瘤组织中低表达,miR-149-5p表达与Aurora-B表达有关(χ^2=5.622,P=0.018),与患者年龄(χ^2=2.617,P=0.106)、性别(χ^2=1.529,P=0.216)、分化程度(χ^2=2.854,P=0.240)、TNM分期(χ^2=0.870,P=0.351)和淋巴结转移(χ^2=0.128,P=0.351)无关。蛋白质印迹法检测结果显示,TE-1细胞miR-149-5p和Aurora-B同时过表达组的Aurora-B表达高于miR-149-5p单独过表达组,低于Aurora-B单独过表达组。结论miR-149-5p可能通过调控Aurora-B表达参与食管鳞状细胞癌发展进程。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞 免疫组织化学 印迹法 蛋白质 miRNA-149-5p AURORA-B te-1细胞株
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