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题名三种快速制备含重复序列质粒PCR模板的方法
被引量：2
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作者
赵宏宇
蔡禄
赵秀娟
王晶妍
李晶
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机构
内蒙古科技大学数理与生物工程学院
内蒙古科技大学生物工程与技术研究所
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期119-122,共4页
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基金
国家自然科学基金(30460038)
内蒙古自然科学基金重点项目(200508010102)
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文摘
为了探索含重复序列质粒PCR模板的快速简易制备方法,分别利用高速离心法、TE煮沸法和TE/SDS煮沸法处理过夜培养的含重组质粒大肠杆菌菌体,制备模板后进行PCR扩增发现,均能得到比较清晰的目的条带,可以用于含重复序列质粒的初步鉴定。相比较而言,高速离心5 min、TE煮沸3 min、TE/SDS煮沸2.5 min制备的样品PCR扩增后效果较好。这3种方法快速、简便、费用低、无污染,简化了PCR模板制备的过程,为重组质粒大量筛选鉴定的研究奠定了基础。
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关键词
高速离心法
te煮沸法
te/SDS煮沸法
PCR模板
重复序列
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Keywords
High speed centrifugation te boiling method te/SDS boiling method PCR template Repeat sequence
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
S511.03
[农业科学—作物学]
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题名两种放线菌基因组DNA PCR模板制备方法的比较
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作者
牛世全
胡娇龙
达文燕
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机构
西北师范大学生命科学学院
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出处
《安徽农业科学》
CAS
2013年第23期9569-9570,9574,共3页
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基金
国家自然科学基金项目(31260134)
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文摘
[目的]比较制备放线菌基因组DNA PCR模板的两种方法液氮研磨法及TE煮沸法。[方法]以从河西走廊盐碱土壤中分离鉴定的8属16株菌为材料,包括糖丝菌属(Saccharothrix)Ⅳ23-3-4、类诺卡氏菌属(Nocardioides)Ⅴ22-5-1、原小单孢菌属(Promicromonospora)Ⅸ5-4-3、小单孢菌属(Micromonospora)Ⅱ23-4-1、放线多孢菌属(Actinopolyspora)Ⅳ8-2-5、拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)Ⅱ8-4-3、链单孢菌属(Streptomonospora)DA01305、链霉菌属金色类群DA03401、链霉菌属金色类群DA01408、链霉菌属蓝色类群DA09140、链霉菌属金色类群DA01308、链霉菌属灰红紫类群DA05213、链霉菌属蓝色类群DA11417、链霉菌属粉红孢类群DA04401、链霉菌属灰红紫类群DA04402、链霉菌属球孢类群DA04307。对两种方法制备的PCR模板进行16S rDNA的扩增,PCR产物进行电泳检测。[结果]两种方法均能得到比较清晰的目的条带,但TE煮沸法简化了放线菌基因组DNA PCR模板制备的过程,可用于高通量放线菌PCR模板的快速制备。[结论]该研究为大批量菌株的快速鉴别和系统分类提供了有效的方法。
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关键词
放线菌
液氮研磨法
te煮沸法
PCR模板
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Keywords
Actinobaceteria
Liquid nitrogen grinding method
te boiling method
PCR template
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分类号
S182
[农业科学—农业基础科学]
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