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CRISPR/Cas9敲除内源TCR增强TCR-T细胞对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的杀伤 被引量:2
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作者 冯娟 李佳涛 庄娜 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期373-379,共7页
目的:基于CRISPR/Cas9基因编辑技术制备无内源TCR的TCR-T细胞并鉴定其在体外杀伤HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的功能。方法:培养健康志愿者外周血CD8^(+)T细胞和Jurkat细胞,CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CD8+T、Jurkat细胞的TCR基因,制备过... 目的:基于CRISPR/Cas9基因编辑技术制备无内源TCR的TCR-T细胞并鉴定其在体外杀伤HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的功能。方法:培养健康志愿者外周血CD8^(+)T细胞和Jurkat细胞,CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CD8+T、Jurkat细胞的TCR基因,制备过表达转基因TCR的重组慢病毒,在敲除内源性TCR的CD8^(+)T和Jurkat细胞中用慢病毒过表达转基因TCR制备TCR-T细胞,多色FCM检测TCR-T细胞中TCR和CD3的表达水平,荧光素酶活性实验检测TCR-T细胞对HPV16阳性SiHa细胞的杀伤效率。结果:CRIPSR/Cas9基因编辑技术高效地敲除了外周血CD8^(+)T细胞和Jurkat细胞中的TRAC和TRBC基因,敲除效率分别为(81.4±4.5)%、(98.5±0.07)%,制备的无内源TCR的TCR-T细胞高效表达转基因TCR,在外周血CD8^(+)T和Jurkat细胞中表达率为(66.0±17.8)%、(97.3±2.6)%,敲除内源TRAC和TRBC基因有效增强CD8^(+)T和Jurkat细胞膜表达转基因TCR(均P<0.01),敲除内源TCR增强TCR-T细胞特异性杀伤HPV16阳性的SiHa细胞[(71.4±1.0)%vs(35.1±2.0)%,P<0.01)]。结论:无内源TCR的TCR-T细胞显著增强转基因TCR的表达和对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的靶向杀伤能力,为提高TCR-T细胞的临床疗效提供了实验依据。 展开更多
关键词 宫颈癌 SIHA CRISPR/Cas9 tcr敲除 tcr-t细胞 HPV16
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免疫细胞疗法在实体瘤治疗中的挑战与对策 被引量:4
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作者 刘莎莎 田永贵 张毅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期781-790,共10页
近年来,以T淋巴细胞为主的免疫细胞疗法在血液系统肿瘤和部分实体瘤中取得了一定的进展。然而,其对大部分实体瘤治疗的有效性和安全性仍面临着诸多挑战,如肿瘤抗原异质性和免疫逃逸、免疫细胞浸润能力差、免疫抑制微环境、代谢微环境阻... 近年来,以T淋巴细胞为主的免疫细胞疗法在血液系统肿瘤和部分实体瘤中取得了一定的进展。然而,其对大部分实体瘤治疗的有效性和安全性仍面临着诸多挑战,如肿瘤抗原异质性和免疫逃逸、免疫细胞浸润能力差、免疫抑制微环境、代谢微环境阻碍和T细胞耗竭等,这些问题限制了免疫细胞对实体瘤治疗的疗效进一步的提升。通过寻找新抗原、设计多靶点CAR、过表达趋化因子受体及细胞因子、敲除抑制性信号分子、增强T细胞代谢能力、联合免疫检查点抑制剂,以及表观遗传修饰等手段能够有效改善免疫细胞在实体瘤治疗中的效果。本文系统性地对TIL、TCR-T细胞和CAR-T细胞为代表的免疫细胞对实体瘤治疗的研究现状、面临的挑战和解决策略进行评述。 展开更多
关键词 实体瘤 免疫细胞治疗 TIL tcr-t细胞 CAR-t细胞 肿瘤微环境
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乳腺癌过继性细胞免疫治疗的研究进展 被引量:5
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作者 姜楠(综述) 应志涛(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期571-579,共9页
目前国际上取得重大进展的四类过继性细胞免疫治疗(ACT)技术主要包括肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、CAR-T细胞、TCR-T细胞和CAR-NK细胞治疗。乳腺癌相关研究结果表明,TIL能预测乳腺癌的预后,间质TIL增加与良好的预后相关;CAR-T细胞免疫治疗在... 目前国际上取得重大进展的四类过继性细胞免疫治疗(ACT)技术主要包括肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、CAR-T细胞、TCR-T细胞和CAR-NK细胞治疗。乳腺癌相关研究结果表明,TIL能预测乳腺癌的预后,间质TIL增加与良好的预后相关;CAR-T细胞免疫治疗在血液系统肿瘤治疗中取得巨大突破后,现已用于靶向实体肿瘤治疗,并在乳腺癌的治疗中开展了多种靶点的临床试验;TCR-T细胞疗法依赖于MHC,可以识别MHC分子呈递的任何抗原,具有更广泛的靶抗原,在治疗实体瘤方面更有前景,多项乳腺癌TCR-T细胞治疗临床试验正在进行中;CAR-NK细胞治疗是通过借鉴CAR-T细胞的结构而设计的,具有出色的抗肿瘤能力,比CAR-T细胞疗法更安全,可能将为肿瘤免疫治疗带来新的更大发展。ACT在乳腺癌的研究和临床应用领域仍具挑战,其中TIL疗法难以产生足量的特异性T细胞,CAR-T和CAR-NK细胞疗法均不同程度存在细胞的持久性、快速归巢到肿瘤床、毒性和转导效率等问题。尽管存在不足,但随着基因工程、肿瘤免疫学和分子生物学等多学科的迅速发展,相信ACT技术有望为乳腺癌患者治疗带来新的希望。 展开更多
关键词 乳腺癌 过继性细胞免疫治疗 肿瘤浸润淋巴细胞 CAR-t细胞 tcr-t细胞 CAR-NK细胞
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过继细胞免疫疗法在多发性骨髓瘤中的进展 被引量:1
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作者 刘佳慧 安刚 《中国科技论文》 北大核心 2017年第24期2813-2816,共4页
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是1种恶性浆细胞肿瘤,目前仍是1种不可治愈的疾病。近几年,过继细胞疗法(adoptive cell therapy,ACT)在血液系统肿瘤中发展迅猛,本文主要综述了从骨髓浸润淋巴细胞到基因改造T细胞,再到NK细胞在MM中... 多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是1种恶性浆细胞肿瘤,目前仍是1种不可治愈的疾病。近几年,过继细胞疗法(adoptive cell therapy,ACT)在血液系统肿瘤中发展迅猛,本文主要综述了从骨髓浸润淋巴细胞到基因改造T细胞,再到NK细胞在MM中的应用进展。总的来说,多发性骨髓瘤的ACT疗法逐渐向高特异性、强杀伤力方向发展,但寻找特异性靶向抗原及预防治疗毒性作用仍是ACT的两大难题。 展开更多
关键词 血液学 多发性骨髓瘤 过继细胞疗法 骨髓浸润淋巴细胞 CAR-t细胞 tcr-t细胞 CAT-NK细胞
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规范管理促进免疫细胞治疗技术的健康发展 被引量:2
5
作者 王福生 施明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期306-307,共2页
肿瘤免疫治疗(包括免疫细胞治疗和免疫分子治疗)被认为是继手术、放疗和化疗后一种新的肿瘤治疗模式,是当前国际上治疗肿瘤等疾病基础和临床研究的热点。免疫治疗由于对一些肿瘤的疗效明显,于2013年被Science杂志评为年度十大科技突... 肿瘤免疫治疗(包括免疫细胞治疗和免疫分子治疗)被认为是继手术、放疗和化疗后一种新的肿瘤治疗模式,是当前国际上治疗肿瘤等疾病基础和临床研究的热点。免疫治疗由于对一些肿瘤的疗效明显,于2013年被Science杂志评为年度十大科技突破之首。如CD19特异性CAR-T细胞治疗急、慢性淋巴细胞白血病和晚期B细胞淋巴瘤疗效明显,部分患者病情得到长期缓解;在治疗实体瘤方面的研究也越来越多受到关注。 展开更多
关键词 肿瘤 免疫治疗 规范管理 树突状细胞 CIK细胞 tcr-t细胞
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基因工程T细胞的临床研究进展
6
作者 高俊芳 李峰 +1 位作者 王丽萍 张毅 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第6期685-690,共6页
尽管手术和放化疗等传统治疗手段在肿瘤治疗方面取得了很大进展,但在改善肿瘤患者预后和生存等方面仍不令人满意。近年来,肿瘤免疫治疗领域发展迅速,出现了多种效果良好的免疫治疗药物和技术[1-6]。免疫治疗已经成为肿瘤综合治疗的重要... 尽管手术和放化疗等传统治疗手段在肿瘤治疗方面取得了很大进展,但在改善肿瘤患者预后和生存等方面仍不令人满意。近年来,肿瘤免疫治疗领域发展迅速,出现了多种效果良好的免疫治疗药物和技术[1-6]。免疫治疗已经成为肿瘤综合治疗的重要手段,甚至在不久后有可能成为肿瘤治疗的主要手段。在这些免疫治疗新技术中,基因工程T细胞的发展尤为令人瞩目[7]。多项临床研究[8-11]显示,基因工程T细胞能够有效清除机体内恶性细胞,甚至能够长期缓解病情。该文将介绍基因工程T细胞的临床研究进展,并探讨该领域在中国的发展。 展开更多
关键词 免疫治疗 基因工程t细胞 tcr-t细胞 CAR-t细胞
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TCR-T细胞疗法的开发与产业化 被引量:4
7
作者 芮魏 刘光娜 +4 位作者 童丹 吉亮亮 陈晓媛 赵学强 林欣 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期2443-2449,共7页
近年来肿瘤免疫疗法在肿瘤治疗中获得重大突破,主要包括免疫检查点抑制剂、过继性细胞治疗以及肿瘤疫苗等。过继性细胞治疗中嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T、T细胞受体(T cell receptor,TCR)-T疗法均发展迅速,CAR-T在... 近年来肿瘤免疫疗法在肿瘤治疗中获得重大突破,主要包括免疫检查点抑制剂、过继性细胞治疗以及肿瘤疫苗等。过继性细胞治疗中嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T、T细胞受体(T cell receptor,TCR)-T疗法均发展迅速,CAR-T在血液疾病中的疗效显著,但在实体瘤中治疗中疗效不甚理想。TCR-T疗法被普遍认为在实体瘤治疗中更具有潜力,且已在一些临床试验中获得令人鼓舞的临床效果。本文将从TCR-T简介、与CAR-T的差异、开发流程、临床进展、企业研发及存在的挑战等方面对TCR-T疗法进行综述。 展开更多
关键词 tcr-t细胞疗法 肿瘤抗原 tcr发现 临床试验
原文传递
自身免疫病患者外周血γδT细胞系的功能研究 被引量:6
8
作者 李静 何维 胡愉 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期57-60,共4页
目的 研究自身免疫病人外周血TCRγδ细胞系在微生物及寄生虫抗原刺激下细胞因子的分泌情况。方法 以TCRγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得7例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)及3例类风湿性关节炎(RA)病人外周血TCRγδ细胞系,平均纯... 目的 研究自身免疫病人外周血TCRγδ细胞系在微生物及寄生虫抗原刺激下细胞因子的分泌情况。方法 以TCRγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得7例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)及3例类风湿性关节炎(RA)病人外周血TCRγδ细胞系,平均纯度可达(847±59)%。在体外培养条件下,以植物血凝素(PHA)、结核分枝杆菌(M.tb)、阴道毛滴虫(TV)、人类6型疱疹病毒(HHV6)刺激24h及48h后,测定细胞因子分泌情况。结果 HHV6刺激组IL2的分泌量显著高于其它各实验组;M.tb及HHV6的刺激可导致IFNγ的高产量。TNFα的产生未见有显著性差异。结论 γδT细胞可能通过细胞因子的产生来影响自身免疫病的发生与发展。 展开更多
关键词 自身免疫病 外周血 tcrγδt细胞
原文传递
实体肿瘤TCR-T治疗研究的现状与面临的挑战 被引量:5
9
作者 叶春梅 叶韵斌 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期959-967,共9页
T细胞表面含有特异性的T细胞受体(T cell receptors,TCR),能够识别不同的肿瘤抗原,从而实现对癌变细胞的杀伤和清除。TCR工程化T细胞(TCR-engineered T cells,TCR-T)治疗即是通过钓取针对肿瘤细胞的特异性TCR,并应用基因工程技术改造T细... T细胞表面含有特异性的T细胞受体(T cell receptors,TCR),能够识别不同的肿瘤抗原,从而实现对癌变细胞的杀伤和清除。TCR工程化T细胞(TCR-engineered T cells,TCR-T)治疗即是通过钓取针对肿瘤细胞的特异性TCR,并应用基因工程技术改造T细胞,输注体内后可达到治疗肿瘤的目的。尽管TCR-T治疗取得一定成果,但是还存在治疗毒性、T细胞浸润有限、抗原特异性不佳等问题,需要不断优化TCR-T治疗的安全性和有效性。因此,本文阐述了目前国内外关于实体肿瘤TCR-T治疗的研究现状以及存在的问题与对策。 展开更多
关键词 实体肿瘤 过继性细胞免疫治疗 tcr工程化t细胞 新抗原
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大鼠烫伤后小肠上皮内T细胞的变化
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作者 彭胜男 朱清仙 +1 位作者 曾慧红 绍立健 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期153-156,共4页
目的:探讨大鼠烫伤后小肠上皮内TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在各肠段问的变化。方法:将大鼠随机分成正常对照组,烫伤后1、3和7d组。除正常对照组,其余的制作全身体表面积(TBSA)30%Ⅲ°烫伤模型。采用免疫组化和体视学测量方法,分别... 目的:探讨大鼠烫伤后小肠上皮内TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在各肠段问的变化。方法:将大鼠随机分成正常对照组,烫伤后1、3和7d组。除正常对照组,其余的制作全身体表面积(TBSA)30%Ⅲ°烫伤模型。采用免疫组化和体视学测量方法,分别测出其T细胞数密度、平均体积和表面积体积比,并比较它们在肠段间的差异。结果:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞数密度均下降,第3天最低。无论正常或烫伤后,TcRγδT细胞平均体积均比TCRαβT细胞增大。结论:烫伤后(除回肠TCRγδT细胞)肠黏膜T细胞的数量均减少,第3天最少,但其平均体积和形状规则程度与烫伤前相比没有显著变化。 展开更多
关键词 tcrαβt细胞 tcrγδt细胞 大鼠 小肠 烫伤
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γδT细胞在类风湿关节炎发病机制中的研究进展
11
作者 曾克勤 胡永红 +3 位作者 张明敏 赖先阳 张玮琛 涂胜豪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期381-384,共4页
关键词 tcrγδt细胞 类风湿关节炎 发病机制 自身反应性t细胞 t细胞抗原受体 自身免疫病 ΑΒt细胞 主要临床表现 关节滑膜 临床常见
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γ1neo-hgp100基因的体外转染表达及体内免疫保护效应
12
作者 李昂 刘荣军 +2 位作者 林怡 熊思东 储以微 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2005年第1期33-36,共4页
目的:构建含有黑色素肿瘤相关抗原hgp100的CTL表位编码基因质粒γ1neo-hgp100,观察此质粒的体外表达和表达产物的提呈,以及体内基因免疫对黑色素肿瘤攻击的保护效应。方法:将编码hgp100的CTL表位的DNA序列插入抗体化抗原的表达质粒γ1ne... 目的:构建含有黑色素肿瘤相关抗原hgp100的CTL表位编码基因质粒γ1neo-hgp100,观察此质粒的体外表达和表达产物的提呈,以及体内基因免疫对黑色素肿瘤攻击的保护效应。方法:将编码hgp100的CTL表位的DNA序列插入抗体化抗原的表达质粒γ1neo中,构建γ1neo-hgp100,体外转染J558L,ELISA检测免疫球蛋白的表达;转染后的J558L与pmelTCR转基因T细胞共育,48h后ELISA检测培养上清中IFN-γ的含量。以γ1neo-hgp100脾内基因免疫C57BL/6小鼠,以B16F10黑色素瘤细胞攻击免疫后小鼠,定期观察肿瘤的生长情况及大小。结果:所构建的γ1neo-hgp100可以在体外表达,表达产物可以被充分的提呈,被提呈的hgp100CTL表位能有效的活化pmelTCRT细胞分泌IFN-γ。经γ1neo-hgp100免疫的小鼠能显著抵抗B16F10黑色素瘤细胞的攻击,生存时间得以明显延长。结论:γ1neo—hgp100基因可有效的在体外表达并被提呈至T细胞,产生体内免疫保护效应。 展开更多
关键词 hgp100 基因免疫 pmel tcr转基因t细胞
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TCRγδT细胞与自然流产
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作者 江静 王振海 《国外医学(计划生育分册)》 2001年第3期142-145,共4页
免疫机制在自然流产中的作用日益受到重视,蜕膜TCRγδT细胞可参与调节T_H1/T_H2细胞间的平衡,其中一些亚群能改变局部细胞因子分泌,增强NK细胞活性,导致流产。外周血TCRγδT细胞数目的变化还会使孕酮诱导的封闭因子减少,造成流产。
关键词 流产 tcrγδt细胞 TH1/TH2细胞 免疫机制 淋巴细胞疫苗
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