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苯接触工人外周血T细胞受体TCRV_β亚家族基因多态性分析 被引量:15
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作者 陈嘉榆 刘薇薇 +4 位作者 黄振倩 巫进明 陈少华 杨力建 李扬秋 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2003年第3期148-151,共4页
目的 了解苯接触工人外周血TCRVβ 亚家族T细胞的分布及其克隆性 ,寻找防治苯中毒的免疫指标。方法 采用RT PCR扩增 6例不同工龄低浓度苯接触工人外周血单核细胞的TCRVβ2 4个亚家族的互补决定区 3(CDR3) ,产物进一步经基因扫描分析确... 目的 了解苯接触工人外周血TCRVβ 亚家族T细胞的分布及其克隆性 ,寻找防治苯中毒的免疫指标。方法 采用RT PCR扩增 6例不同工龄低浓度苯接触工人外周血单核细胞的TCRVβ2 4个亚家族的互补决定区 3(CDR3) ,产物进一步经基因扫描分析确定T细胞的克隆性 ,并与 8名健康人作对照。结果  8名健康者表达全部Vβ 亚家族 ,PCR产物呈多峰图像 (多克隆 )。苯接触工人随工龄不同 ,外周血损伤的情况不同而出现Vβ 表达减少 ,PCR产物出现寡克隆或双克隆改变。结论 低浓度苯接触工人的外周血T细胞的TCRVβ 亚家族表达出现限制性 ,部分Vβ 亚家族呈克隆性增殖 ,可能由于苯损害T细胞而造成机体免疫的不同改变。 展开更多
关键词 苯中毒 tcr-vβ基因 基因多态性 T细胞 免疫功能
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McAb共激活T细胞介导肝癌细胞前后的膜分子与TCRVβ基因的表达 被引量:12
2
作者 黄树林 肖兰凤 +1 位作者 罗利琼 陈红清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期334-337,共4页
T淋巴细胞活化是一个涉及多种膜表面分子和受体以及一系列相关多肽的复杂过程,为了使T细胞发挥更好的识别和杀伤癌细胞的功能,采用抗CD3、CD28、CD80(B71)、CD2、CD58McAb分别刺激健康人PBLs后作... T淋巴细胞活化是一个涉及多种膜表面分子和受体以及一系列相关多肽的复杂过程,为了使T细胞发挥更好的识别和杀伤癌细胞的功能,采用抗CD3、CD28、CD80(B71)、CD2、CD58McAb分别刺激健康人PBLs后作用肝癌细胞,对作用前后PBLs用FACS进行表型分析,结果发现:作用后CD3和CD8分子表达比作用前明显增高,而CD4分子无显著变化,同时基因家族采用RTPCRSouthern印迹分析TCRVβ基因1~20亚家族表达水平与特征,健康人PBLs分别加入IL2、PHA、抗CD3和CD3+CD28、CD28+CD80、CD2+CD58作用肝癌细胞(BEL7402)前表达水平平均约为5%,作用BEL7402后表达水平约为13%~25%,其特征为Vβ7增高,这提示在癌抗原的参与下McAb共刺激的T细胞活化,TCR接受APC相应抗原的刺激,具有该TCR的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的T细胞克隆,发挥其识别和杀伤癌细胞的作用,这将为肿瘤生物治疗的研究提供分子免疫学依据。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝癌细胞 T细胞介导 膜分子 McAb
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NB4和HL-60细胞诱导的脐血T细胞TCR Vβ基因谱系分析 被引量:8
3
作者 汤冀 李扬秋 +1 位作者 杨力建 陈少华 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期740-745,共6页
目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前... 目的:了解经NB4细胞和HL-60细胞体外诱导后脐血T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况。方法:采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用经丝裂霉素灭活的NB4细胞和HL-60细胞体外诱导脐血T细胞增殖,利用RT-PCR分析经MLTC前后T细胞的24个TCR Vβ亚家族的利用情况,并用基因扫描分析其克隆性特点。结果:诱导前脐血T细胞表达20个TCR Vβ亚家族,诱导后的T细胞所表达的TCR Vβ亚家族随培养时间增加而逐渐减少,且诱导组呈现出克隆趋势或寡克隆增殖特点。两种细胞诱导后10 d均可见Vβ1的克隆增殖出现变化,此外,NB4诱导的T细胞出现Vβ15,而HL-60诱导的T细胞则出现Vβ23的克隆增殖情况。结论:NB4细胞和HL-60细胞可诱导脐血TCR VβT细胞克隆性增殖,此优势表达的克隆性T细胞可能与特异性抗原介导的细胞免疫反应有关。 展开更多
关键词 脐血 白血病细胞株 T细胞 tcr vβ基因 克隆性
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AML-M1相关TCR Vβ克隆性增殖T细胞的研究 被引量:7
4
作者 陈少华 李扬秋 +3 位作者 杨力建 郁志 罗更新 张玉平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期353-355,359,共4页
目的 了解急性髓细胞白血病M1亚型 (AML M1 )患者外周血TCRVβ亚家族T细胞的克隆性分布特点。 方法采用RT PCR扩增 9例M1患者外周血的单个核细胞的TCRVβ2 4个亚家族基因 ,分析其TCRVβ亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析 ... 目的 了解急性髓细胞白血病M1亚型 (AML M1 )患者外周血TCRVβ亚家族T细胞的克隆性分布特点。 方法采用RT PCR扩增 9例M1患者外周血的单个核细胞的TCRVβ2 4个亚家族基因 ,分析其TCRVβ亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析 ,了解其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果 不同标本中可检测到 2~ 5个Vβ亚家族T细胞 ,以Vβ2、Vβ3、Vβ1 7和Vβ1 9为常见 ,并在Vβ2、Vβ3、Vβ5、Vβ8、Vβ9和Vβ1 9中发现克隆性生长T细胞。结论 M1病人外周血TCRVβ亚家族T细胞表达呈现明显的选择性和克隆性增殖情况 ,这可能与M1细胞相关抗原有关 ,且克隆性增殖Vβ亚家族分布以个体特异性为主。 展开更多
关键词 tcr vβ基因 T细胞克隆性 急性髓细胞白血病 RT-PCR 基因扫描
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肺癌患者TCR Vβ亚家族表达及记忆性T细胞表达的研究 被引量:6
5
作者 郭宁宁 黄树林 +6 位作者 邵红伟 吴凤麟 王辉 刘魁凤 舒阳春 贾筠 肖兰凤 《广东药学院学报》 CAS 2011年第2期191-194,共4页
目的探讨肺癌患者外周血T细胞及胸水肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)的T细胞受体(TCR)Vβ亚家族及记忆性T细胞的表达情况。方法分离健康人和肺癌患者的T细胞,采用流式方法检测Vβ24个亚家族及CD45RO和CD28的表达情况,统计分析Vβ24个亚家族及... 目的探讨肺癌患者外周血T细胞及胸水肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)的T细胞受体(TCR)Vβ亚家族及记忆性T细胞的表达情况。方法分离健康人和肺癌患者的T细胞,采用流式方法检测Vβ24个亚家族及CD45RO和CD28的表达情况,统计分析Vβ24个亚家族及记忆性T细胞的特点。结果 43例肺癌患者外周血TCR Vβ亚家族主要高表达Vβ3(11/43)、Vβ9(12/43)、Vβ13.2(7/43);15例胸水TIL主要高表达Vβ3(5/15)、Vβ9(3/15)、Vβ21.3(3/15);肺癌组记忆性T细胞(29/35)多于健康对照组(4/35)(P<0.05)。结论肺癌患者TCR Vβ亚家族存在选择性表达的情况;肺癌患者以记忆性T细胞为主。推测这种高表达Vβ亚家族的T细胞可能部分是记忆性T细胞。 展开更多
关键词 肺癌 tcr vβ基因 记忆性T细胞
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CD28/CD80和CD2/CD58活化PBLs作用肝癌细胞的表型分析与TCR Vβ基因亚家族的优势取用 被引量:6
6
作者 肖兰凤 罗利琼 +1 位作者 邹奕 黄树林 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第12期1044-1046,共3页
目的 采用抗CD28 ,CD80 ,CD2 及CD58 分别刺激健康人PBLs 后作用肝癌细胞,对作用前后PBLs 的表型变化及TCRVβ基因亚家族的表达水平进行探讨.方法 用FACS 分析作用肝癌细胞前后PBLs 表型变化... 目的 采用抗CD28 ,CD80 ,CD2 及CD58 分别刺激健康人PBLs 后作用肝癌细胞,对作用前后PBLs 的表型变化及TCRVβ基因亚家族的表达水平进行探讨.方法 用FACS 分析作用肝癌细胞前后PBLs 表型变化,并用RTPCRSouthern 印迹分析其TCR Vβ1 ~20 的表达水平及特征.结果 健康人PBLs 作用肝癌细胞后CD3 和CD8 分子表达比作用前明显增高,而CD4 分子无显著变化. 健康人PBLs 分别加IL2 , PHA, 抗 CD3 和 CD3 + CD28 , CD28 + CD80 ,CD2 + CD58 作用肝癌细胞(BEL7402) 前表达水平平均约5 % ,作用BEL7402 后表达水平约13 % ~25 % ,其特征为Vβ7增高.结论 在癌抗原的参与下,McAb 共刺激的T 细胞活化,TCR接受APC 提呈的相应抗原的刺激,具有该TCR 的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的T 细胞克隆,发挥其识别和杀伤癌细胞的作用. 展开更多
关键词 McAb共激活 肝癌 膜分子 tcr vβ基因
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急性早幼粒细胞白血病患者中TCR Vβ T细胞体内外克隆性增殖的比较 被引量:6
7
作者 杨力建 李扬秋 +4 位作者 陈少华 韩素芳 陈盛亭 张学利 张涛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期499-502,共4页
急性早幼粒细胞白血病 ;T细胞受体Vβ基因 ;T细胞培养 ;克隆性增殖为了解急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 ,利用T淋巴细胞液体培养法 ,在rhIL 2和抗CD3单抗条件下诱导扩增... 急性早幼粒细胞白血病 ;T细胞受体Vβ基因 ;T细胞培养 ;克隆性增殖为了解急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 ,利用T淋巴细胞液体培养法 ,在rhIL 2和抗CD3单抗条件下诱导扩增APL患者单个核细胞 ,并应用RT PCR分别扩增培养前后患者T细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的互补决定区 3 (CDR3 )片段 ,了解各Vβ亚家族的表达情况 ;对阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果发现 ,APL患者T细胞仅表达部分Vβ亚家族 ,但经体外培养后可检测到部分新增TCRVβ亚家族T细胞。全部患者存在某些TCRVβ亚家族的克隆性增殖T细胞。 2例患者均出现相似的Vβ1,Vβ3 ,Vβ7,Vβ16和Vβ2 0T细胞的克隆性增殖情况。结论 :T细胞的体外培养可诱导某些Vβ亚家族的表达。在T细胞培养不同时间中 。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血病 T细胞受体vβ基因 T细胞培养 克隆性增殖
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一例慢性移植物抗宿主病患者TCRVβT细胞分布和克隆性的研究 被引量:4
8
作者 杜欣 李扬秋 +4 位作者 翁建宇 陆泽生 苏建华 林伟 黄梓伦 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期406-408,共3页
目的 了解非血缘关系骨髓移植后慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)患者的T细胞受体(TCR)VβT细胞的分布和克隆性。方法 应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增 1例非血缘关系骨髓移植后cGVHD患者的外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族的CD... 目的 了解非血缘关系骨髓移植后慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)患者的T细胞受体(TCR)VβT细胞的分布和克隆性。方法 应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增 1例非血缘关系骨髓移植后cGVHD患者的外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族的CDR3,了解患者TCRVβT细胞的分布情况 ,PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性。结果 患者存在 8个TCRVβ亚家族T细胞 ;其中Vβ2、Vβ3、Vβ8和Vβ13亚家族为克隆性增殖T细胞。 结论 患者外周血出现不均匀性 (即倾斜性 )分布和克隆性生长TCRVβ家族T细胞 ,它可能与cGVHD的发生有关。 展开更多
关键词 T细胞受体vβ 骨髓移植 移植物抗宿主病 克隆
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白血病异基因造血干细胞移植后TCR Vβ亚家族基因谱的研究 被引量:4
9
作者 杜 欣 李扬秋 李树浓 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期211-217,共7页
目的 了解白血病病人异基因外周血干细胞移植后1年以上患者TCR VβT细胞免疫功能重建的情况。方法 采用 RT-PCR扩增5例CML和1例AML-M3a移植后(12-56个月)患者外周血的单个核细胞的 TCR Vβ 24个亚家族基因,分析其TCR Vβ亚家族的表达... 目的 了解白血病病人异基因外周血干细胞移植后1年以上患者TCR VβT细胞免疫功能重建的情况。方法 采用 RT-PCR扩增5例CML和1例AML-M3a移植后(12-56个月)患者外周血的单个核细胞的 TCR Vβ 24个亚家族基因,分析其TCR Vβ亚家族的表达。结果 经24个 Vβ引物所分别进行的RT-PCR检测TCR Vβ各亚家族基因的表达情况,发现6例病人外周血与正常人表达24个Vβ亚家族有明显的不同,病人的部分Vβ亚家族T细胞仍未能重建,仅表达5-22个亚家族基因。结论 移植后1年以上患者尽管CD3+T细胞已恢复,但外周血TCR Vβ亚家族基因谱的表达仍不完全,T细胞免疫功能仍未完全重建。 展开更多
关键词 tcrvβ基因 免疫重建 白血病 外周血干细胞移植 RT-PCR
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HBsAg HBeAg作用PBLs对TCR Vβ基因表达的影响 被引量:5
10
作者 黄树林 陈红清 +2 位作者 李菁华 李依娜 罗利琼 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第1期25-27,共3页
目的探讨乙肝病毒(HBV)与肝癌的相关性.方法取用乙肝疫苗注射3次前后外周血淋巴细胞(PBL);HBVDNA转染的HepG22215株培养上清(HBsAg,HBeAg阳性)感染健康人PBL后进行TCRVβ基因1-20... 目的探讨乙肝病毒(HBV)与肝癌的相关性.方法取用乙肝疫苗注射3次前后外周血淋巴细胞(PBL);HBVDNA转染的HepG22215株培养上清(HBsAg,HBeAg阳性)感染健康人PBL后进行TCRVβ基因1-20亚家族表达水平的分析.结果乙肝疫苗注射后及HepG22215株培养上清感染健康人PBL后TCRVβ6,14;Vβ6,15特异性扩增而表达水平显著增高.结论Vβ6可能为识别HBV抗原或引发免疫应答的基因片段,但Vβ14,15各自在限制和杀伤功能方面起着重要的作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 肝肿瘤 HBSAG HBEAG 基因表达
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TCR Vβ2、Vβ5和Vβ17-Dβ1 sjTRECs在正常人胸腺、脐血和外周血中的检测情况 被引量:4
11
作者 尹青松 李扬秋 +1 位作者 陈少华 杨力建 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期188-190,共3页
目的建立检测TCR Vβ2、Vβ5和Vβ17-Dβ1 sjTRECs的方法,分析其在胸腺细胞、脐血和正常人外周血T细胞中的存在情况,从而了解近期胸腺输出相应的TCR Vβ亚家族naive T细胞的情况。方法利用半巢式PCR分别扩增3例正常胸腺细胞1、0例脐血... 目的建立检测TCR Vβ2、Vβ5和Vβ17-Dβ1 sjTRECs的方法,分析其在胸腺细胞、脐血和正常人外周血T细胞中的存在情况,从而了解近期胸腺输出相应的TCR Vβ亚家族naive T细胞的情况。方法利用半巢式PCR分别扩增3例正常胸腺细胞1、0例脐血和10例正常人外周血单个核细胞DNA中的Vβ2、Vβ5和Vβ17与Dβ1基因片段重排时产生的sjTRECs。结果在正常胸腺细胞、脐血和正常人外周血单个核细胞中均可检测到Vβ2、Vβ5和Vβ17与Dβ1片段形成的sjTRECs,其中胸腺细胞和脐血单个核细胞DNA中3种删除环的检出率均为100%,正常人外周血3种删除环的检出率分别为50%、70%和40%。结论成功地建立检测3种V-βDβ1 sjTRECs的方法,并提供了Vβ2、Vβ5和Vβ17亚家族sjTRECs在胸腺、脐血和外周血中的检测情况。 展开更多
关键词 tcr vβ基因 NAIvE T细胞 T细胞受体删除DNA环
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大鼠TCR Vβ8.2基因真核表达质粒的构建及表达 被引量:4
12
作者 李蕴 马丽平 +1 位作者 赵文明 刘振龙 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期560-563,共4页
目的:构建含大鼠TCRVβ8.2基因的重组真核表达质粒,并检测其在体内外的表达。方法:以RTPCR法分离Lewis大鼠脾淋巴细胞中的TCRVβ8.2基因片段,插入到真核表达载体pTARGET中,构建重组表达载体pTARGETTCRVβ8.2,并转化E.coliJM109,经蓝白... 目的:构建含大鼠TCRVβ8.2基因的重组真核表达质粒,并检测其在体内外的表达。方法:以RTPCR法分离Lewis大鼠脾淋巴细胞中的TCRVβ8.2基因片段,插入到真核表达载体pTARGET中,构建重组表达载体pTARGETTCRVβ8.2,并转化E.coliJM109,经蓝白斑筛选阳性菌落,进行菌落PCR和测序鉴定。将重组质粒以肌注法免疫BALB/c小鼠,采集注射部位股四头肌处的肌肉,用RTPCR及免疫组化染色法检测TCRVβ8.2基因在注射部位的转录和表达。通过脂质体介导,将重组质粒导入COS7细胞中进行瞬时表达,用免疫细胞化学染色法检测靶基因在真核细胞内的表达。结果:测序鉴定证实,TCRVβ8.2基因已被正确插入到pTARGET载体中,并检测到在肌肉组织和COS7细胞内重组蛋白的表达。结论:成功地构建重组真核表达质粒pTARGETTCRVβ8.2,并在体内体外均可检测到其转录和表达,为进一步进行TCRVβDNA疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胶原诱导性关节炎 自身反应性T细胞 tcr vβ基因 真核表达
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Hela细胞诱导下TCR Vβ基因的选择性表达与重排研究 被引量:3
13
作者 胡丽莉 余雪松 +3 位作者 王丁丁 张凤兰 张国锋 黄树林 《广东药学院学报》 CAS 2011年第4期417-422,共6页
目的研究Hela细胞诱导下T细胞受体(Tcell receptor,TCR)Vβ亚家族基因的优势表达规律,并探讨其是否与重排激活基因(RAGs)介导的TCR重排相关。方法将Hela细胞与健康人外周血单个核细胞(PBMC)混合培养,利用反转录聚合酶链式反应(reverse t... 目的研究Hela细胞诱导下T细胞受体(Tcell receptor,TCR)Vβ亚家族基因的优势表达规律,并探讨其是否与重排激活基因(RAGs)介导的TCR重排相关。方法将Hela细胞与健康人外周血单个核细胞(PBMC)混合培养,利用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测共培养前后TCRVβ各亚家族基因、重排激活酶RAGs、非同源末端连接(non-homogousend joining,NHEJ)途径中的核心蛋白Ku70/Ku80及末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)等的表达特点。结果随着混合培养时间的推移,TCRVβ各亚家族基因由最初的全部表达逐渐转变为选择性的部分表达,其中,TCRVβ7在各时间段都有明显的表达;Ku70随着培养时间的推移表达量逐渐减少直至没有表达;而RAGs、ku80和TdT基因在各个时间段均未检测到其表达。结论在Hela细胞诱导下,TCRVβ各亚家族基因的表达有一定的选择性但无明显的特异性,该选择性表达可能与RAGs介导的二次重排无关。 展开更多
关键词 Hela细胞 tcr vβ基因 重排
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CD28与B7.1共刺激PBLs受肝癌细胞诱导后的TCR Vβ基因表达 被引量:2
14
作者 杨红 李菁华 黄树林 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期42-44,共3页
目的研究T细胞受体(TCR)Vβ在外周血淋巴细胞(PBLs)中的表达。方法用单克隆抗体CD28+B7.1(CD80)共刺激正常人外周血淋巴细胞后作用于肝癌细胞(BEL-7402)。结果发现PBLsTCRVβ7基因在体外选择性扩增,表达水平为15%~25%,对照组为4%~8%... 目的研究T细胞受体(TCR)Vβ在外周血淋巴细胞(PBLs)中的表达。方法用单克隆抗体CD28+B7.1(CD80)共刺激正常人外周血淋巴细胞后作用于肝癌细胞(BEL-7402)。结果发现PBLsTCRVβ7基因在体外选择性扩增,表达水平为15%~25%,对照组为4%~8%。结论Vβ7基因对识别肿瘤抗原具有特异性,为肿瘤基因治疗和研究提供新的线索和实验依据。 展开更多
关键词 肝肿瘤 T细胞受体 vβ基因 PLBs
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HSV-2感染人外周血淋巴细胞后TCRVβ基因片段的选择性扩增 被引量:3
15
作者 黄树林 明文玉 +2 位作者 罗利琼 傅强 肖兰凤 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1997年第2期98-102,共5页
T细胞受体(TCR)Vβ基因 1—20亚家族在识别和杀伤病毒及肿瘤抗原方面各自有着重要的作用。本研究采用单纯性痢疾病毒(HSV-2)感染正常人的外用血淋巴细胞(PBLs)后发现TCR Vβ2,6,7,8基因在体外选择性扩增,而用 HSV-2攻击生殖器单... T细胞受体(TCR)Vβ基因 1—20亚家族在识别和杀伤病毒及肿瘤抗原方面各自有着重要的作用。本研究采用单纯性痢疾病毒(HSV-2)感染正常人的外用血淋巴细胞(PBLs)后发现TCR Vβ2,6,7,8基因在体外选择性扩增,而用 HSV-2攻击生殖器单纯疱疹性皮肤病患者不同病程时期的 PBLs时发现 TCRVβ基因的表达水平随病程不同而改变。结果提示Vβ7,8在识别HSV-2时呈选择性扩增而限制 HSV-2的增殖。 展开更多
关键词 tcrvβ基因 HSv-2 感染 选择性扩增 基因扩增
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脂肪源间充质干细胞治疗aGVHD分子机制的初步研究 被引量:2
16
作者 房佰俊 宋永平 +3 位作者 李宁 张伟 林全德 曹莹 《生物医学工程与临床》 CAS 2008年第4期290-294,共5页
目的初步探讨成人脂肪源间充质干细胞(adultadiposetissue-derivedmesenchymalstemcells,AMSC)治疗急性移植物抗宿主病(acutegraft-versus-hostdisease,aGVHD)的分子机制。方法3例行异基因造血干细胞移植术后发生aGVHD患者,以每公斤体质... 目的初步探讨成人脂肪源间充质干细胞(adultadiposetissue-derivedmesenchymalstemcells,AMSC)治疗急性移植物抗宿主病(acutegraft-versus-hostdisease,aGVHD)的分子机制。方法3例行异基因造血干细胞移植术后发生aGVHD患者,以每公斤体质量2×106个细胞剂量静脉输注AMSC;应用RT-PCR扩增患者AMSC使用前后外周血单个核细胞的TCRVβ24个亚家族的CDR3,了解患者TCRVβT细胞的分布情况;应用尼龙毛柱分离外周血T淋巴细胞再经CD8磁珠分选出CD8+T淋巴细胞,应用流式细胞术检测发生aGVHD患者使用AMSC前后外周血CD8+T细胞亚群的变化。结果患者发生aGVHD时,有TCRVβ3及其他亚家族基因表达,输注AMSC后,GVHD得以有效控制,Vβ不表达;当患者GVHD复发时,Vβ3基因又表达,治疗后不表达;与输注AMSC前相比,输注AMSC后,CD8+T细胞中的CD8+CD28-亚群显著上调(P<0.05),同时,患者的aGVHD得以有效控制。结论AMSC治疗aGVHD的分子机制可能与其抑制TCRVβ亚家族基因表达有关,TCRVβ3可能是AMSC作用的靶基因;同时,AMSC治疗aGVHD的作用机制可能与其上调CD8+CD28-T细胞亚群有关,CD8+T细胞可能是AMSC作用的靶细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 tcr vβ基因 CD8^+CD28^-T细胞 移植物抗宿主病 脂肪
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利用基因扫描技术分析类风湿关节炎T细胞受体的表达 被引量:1
17
作者 张卓莉 张国柱 董怡 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期76-79,共4页
目的 通过研究T细胞Vβ的表达探讨类风湿关节炎的发病机制 ,为新的治疗手段提供一定的理论基础。方法 应用半定量的逆转录多聚酶链反应及基因扫描技术分析类风湿关节炎、骨关节炎、截肢病人滑膜及外周血中T细胞受体Vβ基因的表达情况... 目的 通过研究T细胞Vβ的表达探讨类风湿关节炎的发病机制 ,为新的治疗手段提供一定的理论基础。方法 应用半定量的逆转录多聚酶链反应及基因扫描技术分析类风湿关节炎、骨关节炎、截肢病人滑膜及外周血中T细胞受体Vβ基因的表达情况以及T细胞的克隆性 ,并选择呈现单克隆或寡克隆的部分Vβ基因进一步克隆与测序。结果 滑膜组织与外周血T细胞表达绝大多数Vβ基因。类风湿关节炎病人滑膜组织中Vβ基因的表达呈现更明显的不均衡状态 ,Vβ6、Vβ17与Vβ2 2 为优势亚群 ,其中以Vβ17的高水平表达最为突出。大多数阳性表达的Vβ基因均呈多克隆性。结论 类风湿关节炎病人滑膜组织中Vβ基因表达无限制性 ,但是存在明显的不均衡性 。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 tcr vβ基因 多聚酶链反应 基因扫描 T细胞克隆性
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慢性移植物抗宿主病患者T细胞受体Vβ亚家族T细胞的免疫重建
18
作者 杜欣 李扬秋 +3 位作者 林伟 苏建华 黄梓伦 李树浓 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期32-34,共3页
目的:了解慢性移植物抗宿主病(graft-versus-host disease, GVHD)患者T细胞受体(T cell recepter,TCR) Vβ T细胞免疫功能重建的情况,寻找可能与 GVHD相关的 TCR V... 目的:了解慢性移植物抗宿主病(graft-versus-host disease, GVHD)患者T细胞受体(T cell recepter,TCR) Vβ T细胞免疫功能重建的情况,寻找可能与 GVHD相关的 TCR Vβ亚家族基因。方法:采用 RT-PCR方法扩增5例患者外周血单个核细胞的 TCR Vβ 24个亚家族基因,分析其TCR Vβ亚家族的表达情况。结果:不同标本中仅检测到2~8个Vβ亚家族的T细胞,不同患者所缺乏的TCRVβ亚家族不尽相同,其中4例患者均表达Vβ基因。结论:慢性 GVHD患者外周血TCR Vβ亚家族T细胞部分受抑制,Vβ亚家族T细胞可能和慢性 GVHD有关。此方法不仅可以更详细地了解病人T细胞免疫功能重建的情况,更重要的是今后有可能在分子水平上寻找与GVHD相关的TCR Vβ亚家族基因,为临床开展特异性的GVHD细胞亚群清除性治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 tcr-vβ基因 免疫重建 慢性移植物抗宿主病 RT-PCR T细胞 异基因造血干细胞移植
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CML细胞诱导自体和脐血T细胞TCR Vβ谱系和杀伤性分析 被引量:2
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作者 杨力建 李扬秋 +4 位作者 陈少华 黄梅娟 韩素芳 张学利 张涛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期376-379,共4页
目的 了解慢性粒细胞白血病 (CML)细胞诱导T细胞的TCRVβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况 ,及其对CML细胞的杀伤活性。方法 采用混合淋巴细胞 肿瘤细胞培养 (MLTC)方法 ,利用CML细胞体外诱导脐血或患者的T细胞增殖 ,用RT PCR和基因... 目的 了解慢性粒细胞白血病 (CML)细胞诱导T细胞的TCRVβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况 ,及其对CML细胞的杀伤活性。方法 采用混合淋巴细胞 肿瘤细胞培养 (MLTC)方法 ,利用CML细胞体外诱导脐血或患者的T细胞增殖 ,用RT PCR和基因扫描分析MLTC前后T细胞的 2 4个TCRVβ亚家族基因的互补决定区 (CDR3) ,了解各Vβ亚家族的利用和T细胞克隆性特点。并利用LDH方法检测MLTC后T细胞的细胞毒性。结果 脐血T细胞表达 8~ 11个TCRVβ亚家族 ,经MLTC后 ,2~ 3个Vβ亚家族呈克隆性增殖 ,CML细胞诱导的自体T细胞的TCRVβ亚家族也类似。经MLTC后T细胞对原诱导细胞有较强的杀伤活性。结论 CML细胞可诱导脐血T细胞和自体T细胞TCRVβ优势利用和克隆性增殖 ,诱导后T细胞具有特异性杀伤CML细胞的作用。 展开更多
关键词 CML MLTC T细胞受体vβ基因 克隆性 细胞毒活性
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职业性三氯乙烯药疹样皮炎患者周围血T细胞抗原受体Vβ谱系多样性初探 被引量:2
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作者 左璨粲 梁赵佳 +7 位作者 孙润陆 李萡 刘薇薇 陈少华 杨力健 陈嘉榆 余卫 李扬秋 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2011年第1期24-27,共4页
目的了解职业性三氯乙烯(TCE)药疹样皮炎(OMLDT)患者周围血T细胞抗原受体(TCR)Vβ亚家族基因谱系及其克隆性增殖情况。方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测10名健康人和5例OMLDT患者周围血中24个TCR Vβ基因的互补决定... 目的了解职业性三氯乙烯(TCE)药疹样皮炎(OMLDT)患者周围血T细胞抗原受体(TCR)Vβ亚家族基因谱系及其克隆性增殖情况。方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测10名健康人和5例OMLDT患者周围血中24个TCR Vβ基因的互补决定区3(CDR3)。PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果 10名健康人可检出所有24个TCR Vβ亚家族,5例OMLDT患者周围血仅检出1~6个Vβ亚家族阳性产物,平均表达(2.8±1.9)个Vβ亚家族,β亚家族检出数显著少于健康人(P〈0.01)。OMLDT患者周围血中存在克隆性增殖T细胞,其中以Vβ16亚家族出现克隆性增殖的频率较高。结论 OMLDT患者周围血中TCR Vβ谱系发生改变,这可能是接触TCE后机体细胞免疫功能的异常变化。 展开更多
关键词 职业性三氯乙烯药疹样皮炎(OMLDT) tcrvβ基因 T细胞亚家族 克隆性T细胞
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