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牛结核病鉴别诊断的方法研究
被引量：
11
1
作者
余大海
韦一然
+1 位作者
蔡宏
朱玉贤
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期932-935,共4页
目的构建含结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)tb10.4基因片断的原核表达载体,在E.coli中诱导表达带组氨酸标记的该融合蛋白。分别以TB10.4蛋白,PPD蛋白以及TB10.4与MPT83混合蛋白为抗原,用间接ELISA法鉴别牛结核病。方法PCR法扩...
目的构建含结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)tb10.4基因片断的原核表达载体,在E.coli中诱导表达带组氨酸标记的该融合蛋白。分别以TB10.4蛋白,PPD蛋白以及TB10.4与MPT83混合蛋白为抗原,用间接ELISA法鉴别牛结核病。方法PCR法扩增tb10.4基因片段,连接到pET-22b(+)原核表达载体中,将重组子转化到大肠杆菌蛋白酶缺陷型菌株BL21(DE3)/PolysS,用IPTG诱导,进行蛋白表达、纯化。之后将TB10.4,PPD,TB10.4及MPT83混合蛋白作为抗原用间接ELISA法检测牛结核病。结果使用结核杆菌早期分泌蛋白TB10.4作为抗原用间接ELISA方法快速检测牛结核病,并区分BCG免疫的健康牛和感染牛的结果显示灵敏度为23%,没有假阳性反应。结论用PPD作为抗原进行检测灵敏度达到48%,但假阳性率达到21%;用TB10.4与MPT83混合抗原检测时灵敏度下降到6%,假阳性率1%。
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关键词
牛结核病
tb
10.4
蛋白
间接ELISA法
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职称材料
结核分枝杆菌TB10.4蛋白的生物信息学分析
2
作者
高灿
赵晓彤
程江
《医学信息》
2023年第18期1-7,共7页
目的预测分析结核分枝杆菌Rv0288基因的编码蛋白TB10.4的结构和功能。方法采用生物信息学软件ORF Finder、ExPASy、PSORT、SOSUI、TMHMM、SOPMA等预测分析结核分枝杆菌TB10.4蛋白的结构和功能。结果TB10.4蛋白由96个氨基酸组成,分子式为...
目的预测分析结核分枝杆菌Rv0288基因的编码蛋白TB10.4的结构和功能。方法采用生物信息学软件ORF Finder、ExPASy、PSORT、SOSUI、TMHMM、SOPMA等预测分析结核分枝杆菌TB10.4蛋白的结构和功能。结果TB10.4蛋白由96个氨基酸组成,分子式为C448H677N125O143S9,原子总数1402,编码基因全长291 bp,等电点4.58,不稳定性50.36,为不稳定性蛋白。ProtScale软件预测TB10.4蛋白的脂肪族氨基酸指数为59.38,平均疏水性-0.266。SOSUI和Signal IP软件预测该蛋白无信号肽无跨膜区。TMHMM、NerNGlyc、NetPhos软件预测TB10.4蛋白为可溶性蛋白,有8个磷酸化位点,无糖基化位点。TB10.4蛋白的二级结构以α-螺旋(86.46%)为主,亚细胞定位于细胞质。IEDB软件预测该蛋白有3个B细胞抗原表位;SYFPEITHI、RANKPEP、NetMHC软件预测该蛋白有多个CTL表位和Th表位。STRING预测TB10.4和esxS、esxB、esxH、esxG、PPE4、PPE 18、PE5等蛋白有相互作用,参与多种胞浆蛋白,其二级结构生物学过程。结论TB10.4蛋白为不稳定疏水性以α-螺旋结构为主,含有多个T、B细胞抗原位点,能够磷酸化并与多种蛋白相互作用,可作为抗结核疫苗的候选蛋白。
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关键词
结核分枝杆菌
ESAT-6
蛋白
tb
10.4
蛋白
生物信息学分析
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职称材料
牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达和分布的影响
被引量：
1
3
作者
刘淑清
李平俊
+3 位作者
鑫婷
侯绍华
朱鸿飞
贾红
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期83-90,共8页
为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系,表达纯化了rTB10.4,并采用IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后,采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7...
为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系,表达纯化了rTB10.4,并采用IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后,采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7细胞生长影响的最佳时间点和最佳剂量。在此基础上,采用量化流式细胞仪分析重组蛋白rTB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达的影响。结果表明,获得的rTB10.4具有较强的T细胞和B细胞活性,rTB10.4对RAW264.7细胞的作用呈剂量依赖性,作用起效时间为12~24h,诱导作用在16~18h达到最大效应值。量化流式分析仪分析结果表明,rTB10.4刺激可显著增强RAW264.7细胞的细胞膜上TLR2的表达。
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关键词
tb
10.4
重组
蛋白
牛分枝杆菌
RAW264.7细胞
动态实时细胞分析检测技术
TLR2
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职称材料
题名
牛结核病鉴别诊断的方法研究
被引量：
11
1
作者
余大海
韦一然
蔡宏
朱玉贤
机构
北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期932-935,共4页
文摘
目的构建含结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)tb10.4基因片断的原核表达载体,在E.coli中诱导表达带组氨酸标记的该融合蛋白。分别以TB10.4蛋白,PPD蛋白以及TB10.4与MPT83混合蛋白为抗原,用间接ELISA法鉴别牛结核病。方法PCR法扩增tb10.4基因片段,连接到pET-22b(+)原核表达载体中,将重组子转化到大肠杆菌蛋白酶缺陷型菌株BL21(DE3)/PolysS,用IPTG诱导,进行蛋白表达、纯化。之后将TB10.4,PPD,TB10.4及MPT83混合蛋白作为抗原用间接ELISA法检测牛结核病。结果使用结核杆菌早期分泌蛋白TB10.4作为抗原用间接ELISA方法快速检测牛结核病,并区分BCG免疫的健康牛和感染牛的结果显示灵敏度为23%,没有假阳性反应。结论用PPD作为抗原进行检测灵敏度达到48%,但假阳性率达到21%;用TB10.4与MPT83混合抗原检测时灵敏度下降到6%,假阳性率1%。
关键词
牛结核病
tb
10.4
蛋白
间接ELISA法
Keywords
Bovine Tuberculosis
tb
10.4
protein
indirect ELISA
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
结核分枝杆菌TB10.4蛋白的生物信息学分析
2
作者
高灿
赵晓彤
程江
机构
石河子大学医学院
石河子大学医学院第一附属医院检验科
出处
《医学信息》
2023年第18期1-7,共7页
基金
国家自然科学基金(编号:U1803127、U1903118)
2019年度石河子大学科研计划(编号:KX01860107)。
文摘
目的预测分析结核分枝杆菌Rv0288基因的编码蛋白TB10.4的结构和功能。方法采用生物信息学软件ORF Finder、ExPASy、PSORT、SOSUI、TMHMM、SOPMA等预测分析结核分枝杆菌TB10.4蛋白的结构和功能。结果TB10.4蛋白由96个氨基酸组成,分子式为C448H677N125O143S9,原子总数1402,编码基因全长291 bp,等电点4.58,不稳定性50.36,为不稳定性蛋白。ProtScale软件预测TB10.4蛋白的脂肪族氨基酸指数为59.38,平均疏水性-0.266。SOSUI和Signal IP软件预测该蛋白无信号肽无跨膜区。TMHMM、NerNGlyc、NetPhos软件预测TB10.4蛋白为可溶性蛋白,有8个磷酸化位点,无糖基化位点。TB10.4蛋白的二级结构以α-螺旋(86.46%)为主,亚细胞定位于细胞质。IEDB软件预测该蛋白有3个B细胞抗原表位;SYFPEITHI、RANKPEP、NetMHC软件预测该蛋白有多个CTL表位和Th表位。STRING预测TB10.4和esxS、esxB、esxH、esxG、PPE4、PPE 18、PE5等蛋白有相互作用,参与多种胞浆蛋白,其二级结构生物学过程。结论TB10.4蛋白为不稳定疏水性以α-螺旋结构为主,含有多个T、B细胞抗原位点,能够磷酸化并与多种蛋白相互作用,可作为抗结核疫苗的候选蛋白。
关键词
结核分枝杆菌
ESAT-6
蛋白
tb
10.4
蛋白
生物信息学分析
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
ESAT-6 protein
tb
10.4
protein
Bioinformatics analysis
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达和分布的影响
被引量：
1
3
作者
刘淑清
李平俊
鑫婷
侯绍华
朱鸿飞
贾红
机构
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期83-90,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31302130)
"中国农业科学院科技创新工程"兽医公共卫生安全与管理创新团队(ASTIP-IAS-11)
国家"863"高技术研究与发展专项(2012AA101302)
文摘
为探讨牛分枝杆菌TB10.4蛋白与RAW264.7细胞的相互作用关系,表达纯化了rTB10.4,并采用IFN-γ释放试验和Western blot检测其细胞活性。使用不同剂量rTB10.4与RAW264.7细胞共孵育后,采用实时无标记动态细胞分析技术检测rTB10.4对RAW264.7细胞生长影响的最佳时间点和最佳剂量。在此基础上,采用量化流式细胞仪分析重组蛋白rTB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达的影响。结果表明,获得的rTB10.4具有较强的T细胞和B细胞活性,rTB10.4对RAW264.7细胞的作用呈剂量依赖性,作用起效时间为12~24h,诱导作用在16~18h达到最大效应值。量化流式分析仪分析结果表明,rTB10.4刺激可显著增强RAW264.7细胞的细胞膜上TLR2的表达。
关键词
tb
10.4
重组
蛋白
牛分枝杆菌
RAW264.7细胞
动态实时细胞分析检测技术
TLR2
Keywords
r
tb
10.4
Mycobacterium bovis
RAW264.7
a real-time cell electronic sensing system
TLR2
分类号
S816.73 [农业科学—饲料科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛结核病鉴别诊断的方法研究
余大海
韦一然
蔡宏
朱玉贤
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
11
下载PDF
职称材料
2
结核分枝杆菌TB10.4蛋白的生物信息学分析
高灿
赵晓彤
程江
《医学信息》
2023
0
下载PDF
职称材料
3
牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞TLR2表达和分布的影响
刘淑清
李平俊
鑫婷
侯绍华
朱鸿飞
贾红
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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职称材料
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