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TAK1基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活化研究
被引量：
3
1
作者
李锡
李苗
白希壮
《解剖科学进展》
CAS
2013年第1期20-22,26,共4页
目的研究转化生长因子β激活激酶(TAK1,MEKK7)基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活性变化,探讨其与类风湿性关节炎的关系。方法本实验采用病例对照研究分别利用RT-PCR和Western-blot方法检测类风湿性关节炎(RA)、骨性关节炎(OA)及...
目的研究转化生长因子β激活激酶(TAK1,MEKK7)基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活性变化,探讨其与类风湿性关节炎的关系。方法本实验采用病例对照研究分别利用RT-PCR和Western-blot方法检测类风湿性关节炎(RA)、骨性关节炎(OA)及非关节炎病人膝关节滑膜中TAK1基因mRNA和蛋白质的表达,并利用磷酸化抗体比较其活性差异,以验证TAK1与类风湿性关节炎发病的相关性。结果 TAK1 mRNA和蛋白在RA病人膝关节滑膜的表达水平明显高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人,其TAK1酶活性亦高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人。结论 TAK1基因与类风湿性关节炎发病发生、发展有一定的相关性。
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关键词
tak
1
基因
人类风湿性关节炎
膝关节滑膜
原文传递
牛源TAK1基因慢病毒载体构建及其在MDBK细胞中的表达
2
作者
张帆
姜坤生
+3 位作者
王禹淳
马金柱
于立权
宋佰芬
《动物医学进展》
北大核心
2023年第9期6-11,共6页
为了探究转化生长因子-β激活蛋白1(TAK1)在牛疱疹病毒1型(BHV-1)感染中的作用,构建牛源TAK1基因慢病毒载体,筛选TAK1基因稳转过表达细胞株。根据GenBank中牛源TAK1基因序列(登录号:NM-001081595.1)设计引物,PCR扩增目的片段后插入载体...
为了探究转化生长因子-β激活蛋白1(TAK1)在牛疱疹病毒1型(BHV-1)感染中的作用,构建牛源TAK1基因慢病毒载体,筛选TAK1基因稳转过表达细胞株。根据GenBank中牛源TAK1基因序列(登录号:NM-001081595.1)设计引物,PCR扩增目的片段后插入载体中,构建pCDH-CMV-TAK1-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro慢病毒质粒,将其导入293T细胞进行慢病毒包装及滴度测定。用包装好的慢病毒感染牛肾上皮细胞(MDBK),筛选过表达TAK1基因的稳转细胞株,通过荧光显微镜和免疫印迹试验(Western blot)进一步验证该基因的过表达。重组质粒双酶切与测序结果表明成功建立了pCDH-CMV-TAK1-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro慢病毒质粒。慢病毒滴度测定结果显示,过表达TAK1基因组病毒滴度为1.0×108 TU/mL,空载体对照组病毒滴度为5.0×108 TU/mL。重组慢病毒以MOI 180转染MDBK细胞,荧光显微镜观察到明显的红色荧光,表明慢病毒质粒转染成功。Western blot结果显示,在相应分子量处检测到目的条带,进一步表明TAK1基因被表达。成功构建了pCDH-CMV-TAK1-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro慢病毒质粒,并筛选出了过表达TAK1基因的MDBK稳转细胞株,为深入研究TAK1在BHV-1感染中机制的研究奠定基础。
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关键词
tak
1
基因
过表达
慢病毒载体
MDBK细胞
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职称材料
人TAK1基因启动子活性的研究
被引量：
1
3
作者
李锡
白希壮
《解剖科学进展》
2016年第6期576-578,共3页
目的鉴定人TAK1启动子片段结构,探索调控TAK1基因高水平转录的启动片段。方法利用生物信息学软件分析TAK1基因启动子结构,构建TAK1启动子序列系列截短的萤光素酶报告基因重组体,脂质体法转染滑膜成纤维样细胞(Fibroblast-like synoviocy...
目的鉴定人TAK1启动子片段结构,探索调控TAK1基因高水平转录的启动片段。方法利用生物信息学软件分析TAK1基因启动子结构,构建TAK1启动子序列系列截短的萤光素酶报告基因重组体,脂质体法转染滑膜成纤维样细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS),应用双荧光素酶活性检测系统检测启动子的活性。结果人TAK1基因-260^+25 bp片段具有高转录活性,明显高于其他片段,而-88^+25 bp启动子片段活性最低。结论人TAK1基因-260^-170 bp是主要的转录调控区,是进一步研究DNA结合蛋白的调控靶序列。
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关键词
tak
1
基因
转录
启动子
原文传递
题名
TAK1基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活化研究
被引量：
3
1
作者
李锡
李苗
白希壮
机构
中国医科大学附属第四临床学院骨科
中国医科大学基础医学院病原生物学教研室
中国医科大学附属第一临床学院骨科
出处
《解剖科学进展》
CAS
2013年第1期20-22,26,共4页
基金
辽宁省教育厅(No.2008225019)
国家自然科学基金青年基金(No.81201333)资助项目
文摘
目的研究转化生长因子β激活激酶(TAK1,MEKK7)基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活性变化,探讨其与类风湿性关节炎的关系。方法本实验采用病例对照研究分别利用RT-PCR和Western-blot方法检测类风湿性关节炎(RA)、骨性关节炎(OA)及非关节炎病人膝关节滑膜中TAK1基因mRNA和蛋白质的表达,并利用磷酸化抗体比较其活性差异,以验证TAK1与类风湿性关节炎发病的相关性。结果 TAK1 mRNA和蛋白在RA病人膝关节滑膜的表达水平明显高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人,其TAK1酶活性亦高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人。结论 TAK1基因与类风湿性关节炎发病发生、发展有一定的相关性。
关键词
tak
1
基因
人类风湿性关节炎
膝关节滑膜
Keywords
tak
1
human rheumatoid arthritis
joint synovitis
分类号
R686.7 [医药卫生—骨科学]
原文传递
题名
牛源TAK1基因慢病毒载体构建及其在MDBK细胞中的表达
2
作者
张帆
姜坤生
王禹淳
马金柱
于立权
宋佰芬
机构
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
中国农业大学动物医学院
出处
《动物医学进展》
北大核心
2023年第9期6-11,共6页
基金
国家自然科学基金项目(32272991)。
文摘
为了探究转化生长因子-β激活蛋白1(TAK1)在牛疱疹病毒1型(BHV-1)感染中的作用,构建牛源TAK1基因慢病毒载体,筛选TAK1基因稳转过表达细胞株。根据GenBank中牛源TAK1基因序列(登录号:NM-001081595.1)设计引物,PCR扩增目的片段后插入载体中,构建pCDH-CMV-TAK1-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro慢病毒质粒,将其导入293T细胞进行慢病毒包装及滴度测定。用包装好的慢病毒感染牛肾上皮细胞(MDBK),筛选过表达TAK1基因的稳转细胞株,通过荧光显微镜和免疫印迹试验(Western blot)进一步验证该基因的过表达。重组质粒双酶切与测序结果表明成功建立了pCDH-CMV-TAK1-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro慢病毒质粒。慢病毒滴度测定结果显示,过表达TAK1基因组病毒滴度为1.0×108 TU/mL,空载体对照组病毒滴度为5.0×108 TU/mL。重组慢病毒以MOI 180转染MDBK细胞,荧光显微镜观察到明显的红色荧光,表明慢病毒质粒转染成功。Western blot结果显示,在相应分子量处检测到目的条带,进一步表明TAK1基因被表达。成功构建了pCDH-CMV-TAK1-MCS-EF1-turboRFP-T2A-Puro慢病毒质粒,并筛选出了过表达TAK1基因的MDBK稳转细胞株,为深入研究TAK1在BHV-1感染中机制的研究奠定基础。
关键词
tak
1
基因
过表达
慢病毒载体
MDBK细胞
Keywords
tak
1
gene
overexpression
lentivirus vector
MDBK cells
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
人TAK1基因启动子活性的研究
被引量：
1
3
作者
李锡
白希壮
机构
辽宁省人民医院运动医学与关节外科
出处
《解剖科学进展》
2016年第6期576-578,共3页
基金
国家自然科学基金(81401334)
文摘
目的鉴定人TAK1启动子片段结构,探索调控TAK1基因高水平转录的启动片段。方法利用生物信息学软件分析TAK1基因启动子结构,构建TAK1启动子序列系列截短的萤光素酶报告基因重组体,脂质体法转染滑膜成纤维样细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS),应用双荧光素酶活性检测系统检测启动子的活性。结果人TAK1基因-260^+25 bp片段具有高转录活性,明显高于其他片段,而-88^+25 bp启动子片段活性最低。结论人TAK1基因-260^-170 bp是主要的转录调控区,是进一步研究DNA结合蛋白的调控靶序列。
关键词
tak
1
基因
转录
启动子
Keywords
tak
1
gene
transcription
promoter
分类号
Q756 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TAK1基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活化研究
李锡
李苗
白希壮
《解剖科学进展》
CAS
2013
3
原文传递
2
牛源TAK1基因慢病毒载体构建及其在MDBK细胞中的表达
张帆
姜坤生
王禹淳
马金柱
于立权
宋佰芬
《动物医学进展》
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
3
人TAK1基因启动子活性的研究
李锡
白希壮
《解剖科学进展》
2016
1
原文传递
已选择
0
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