目的:探究染色质结构域蛋白8(chromodomain protein 8,CBX8)对人神经胶质瘤细胞增殖与凋亡的作用。方法:Western blot和RT-qPCR检测组织及细胞系中CBX8的表达。构建过表达CBX8和沉默CBX8载体,转染神经胶质瘤细胞T98G和U87MG,分别用MTT法...目的:探究染色质结构域蛋白8(chromodomain protein 8,CBX8)对人神经胶质瘤细胞增殖与凋亡的作用。方法:Western blot和RT-qPCR检测组织及细胞系中CBX8的表达。构建过表达CBX8和沉默CBX8载体,转染神经胶质瘤细胞T98G和U87MG,分别用MTT法和BrdU实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:与正常脑组织和星形胶质细胞相比,神经胶质瘤组织及细胞中的CBX8蛋白和mRNA水平明显上升。在T98G和U87MG细胞中,过表达CBX8均促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,并上调Rb/E2F1的表达水平,而沉默CBX8则作用相反。sh-E2F1转染细胞之后,cyclin D1的表达以及Bcl-2/Bax的比值降低。结论:CBX8可能通过Rb/E2F1通路调节胶质瘤细胞的增殖和凋亡。展开更多
文摘目的探讨天然药物槲皮素对人胶质母细胞瘤的生物效应及机制。方法采用槲皮素治疗人胶质母细胞瘤细胞系T98G,MTT法检测治疗后T98G细胞的增殖抑制情况;流式细胞术检测槲皮素治疗后T98G细胞的凋亡情况,并用Western blot检测细胞活化caspase-3(cleaved caspase-3)的表达和热休克蛋白27(HSP27)的表达;将T98G细胞的HSP27基因用特异性HSP27 si RNA沉默后再用槲皮素治疗,检测槲皮素对T98G细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果对照组及5μM、25μM、50μM、100μM、200μM槲皮素组对T98G细胞的48h增殖抑制率分别为0、(0.05±0.02)%、(21.8±3.4)%、(42.2±5.7)%、(67.6±6.8)%、(76.9±7.0)%,各浓度槲皮素组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组及25μM、50μM、100μM槲皮素组对T98G细胞的凋亡诱导率分别为(0.8±0.3)%、(4.9±0.6)%、(8.1±0.9)%、(21.5±1.7)%,各浓度槲皮素组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组及25μM、50μM、100μM槲皮素组T98G细胞caspase-3活性分别为(0.01±0.01)、(0.05±0.03)、(0.12±0.03)、(0.22±0.05),50μM、100μM槲皮素组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);HSP27活性分别为(0.84±0.12)、(0.75±0.11)、(0.52±0.08)、(0.37±0.06),50μM、100μM槲皮素组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论槲皮素有良好的抗神经胶质母细胞瘤的生物活性,其抗肿瘤机制可能和下调HSP27蛋白有关。
文摘目的:探究染色质结构域蛋白8(chromodomain protein 8,CBX8)对人神经胶质瘤细胞增殖与凋亡的作用。方法:Western blot和RT-qPCR检测组织及细胞系中CBX8的表达。构建过表达CBX8和沉默CBX8载体,转染神经胶质瘤细胞T98G和U87MG,分别用MTT法和BrdU实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:与正常脑组织和星形胶质细胞相比,神经胶质瘤组织及细胞中的CBX8蛋白和mRNA水平明显上升。在T98G和U87MG细胞中,过表达CBX8均促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,并上调Rb/E2F1的表达水平,而沉默CBX8则作用相反。sh-E2F1转染细胞之后,cyclin D1的表达以及Bcl-2/Bax的比值降低。结论:CBX8可能通过Rb/E2F1通路调节胶质瘤细胞的增殖和凋亡。
