文摘利用PCR技术将T 3223-6 cDNA扩增克隆到原核表达载体pET-28a,将重组质粒转入克隆菌N ova-b lue,提取质粒进行酶切和测序鉴定后转入表达菌BL 21star(DE3)。用1 mM IPTG诱导培养重组表达菌,对菌体裂解物进行SDS-PAGE分析,检测重组蛋白的表达情况。用旋毛虫感染猪血清和正常血清,通过w estern b lotting检测重组蛋白的反应原性。结果表明:经IPTG诱导后重组转化菌的裂解产物出现44 kD左右的表达带,大小与理论值相符;w estern b lotting检测结果显示重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有反应原性。
