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肿瘤过继性细胞免疫治疗中CAR-T及TCR-T疗法研究进展 被引量:3
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作者 张青青 许莲蓉 《新医学》 CAS 2021年第3期165-169,共5页
近年来,新的生物技术不断被应用于临床,其中的肿瘤免疫治疗就是一种新型的抗肿瘤疗法。免疫治疗指在肿瘤微环境中,通过刺激免疫功能,增强抗肿瘤免疫,进而直接识别和杀伤肿瘤细胞。目前被应用于临床的肿瘤免疫治疗方法有免疫检查点治疗... 近年来,新的生物技术不断被应用于临床,其中的肿瘤免疫治疗就是一种新型的抗肿瘤疗法。免疫治疗指在肿瘤微环境中,通过刺激免疫功能,增强抗肿瘤免疫,进而直接识别和杀伤肿瘤细胞。目前被应用于临床的肿瘤免疫治疗方法有免疫检查点治疗、细胞因子、肿瘤疫苗、过继性细胞免疫治疗(ACI)等。ACI是重要的肿瘤免疫治疗方法,由于ACI可以在不损害免疫系统及其功能的情况下杀死肿瘤细胞,而且能够避免肿瘤免疫逃逸,所以成为国内外研究的热点。经基因修饰改造T淋巴细胞是ACI临床应用研究最深入的领域。经基因修饰改造的T淋巴细胞可分为嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)及T细胞受体改造的T细胞(TCR-T),该文就CAR-T及TCR-T疗法的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤 过继性细胞 免疫治疗 嵌合抗原受体T细胞 T细胞受体改造的T细胞 临床应用
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科学表征细胞体内过程,推动细胞治疗产品高质量发展
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作者 魏春敏 潘鹏玉 +2 位作者 高丽丽 吴婷婷 王玉珠 《中国食品药品监管》 2024年第11期32-43,共12页
细胞治疗技术的突飞猛进引领了复杂难治性疾病治疗范式的重要转变,以CAR-T为代表的细胞治疗产品陆续获批上市,标志着药物治疗史上一个新时代的到来。与临床治疗新技术不同,用于上市申请的细胞治疗产品应遵循药品注册相关法规要求,开展... 细胞治疗技术的突飞猛进引领了复杂难治性疾病治疗范式的重要转变,以CAR-T为代表的细胞治疗产品陆续获批上市,标志着药物治疗史上一个新时代的到来。与临床治疗新技术不同,用于上市申请的细胞治疗产品应遵循药品注册相关法规要求,开展必要的临床药理学研究,科学表征其体内过程。为推动我国细胞治疗产品高质量发展,国家药品监督管理局药品审评中心组织起草了《细胞治疗产品临床药理学研究技术指导原则(试行)》,针对细胞治疗产品体内过程特点,重点阐述开展必要的细胞动力学、药效学及影响因素研究,探索细胞治疗产品安全有效性可控关键要素的相关考虑。 展开更多
关键词 细胞治疗产品 嵌合抗原受体修饰T细胞 肿瘤浸润淋巴细胞 T细胞受体工程化修饰T细胞
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复发/难治急性B淋巴细胞白血病行CAR-T细胞治疗后接受粒细胞集落刺激因子的疗效及安全性分析
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作者 曹芯萍 张萌 +1 位作者 张笑梅 赵明峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2604-2608,共5页
目的:回顾性分析接受CAR-T细胞治疗后发生中性粒细胞减少症(NE)的复发/难治急性B淋巴细胞白血病(R/R B-ALL)患者应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的疗效和安全性。方法:纳入2017年3月至2022年12月于天津市第一中心医院接受CAR-T细胞治疗的... 目的:回顾性分析接受CAR-T细胞治疗后发生中性粒细胞减少症(NE)的复发/难治急性B淋巴细胞白血病(R/R B-ALL)患者应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的疗效和安全性。方法:纳入2017年3月至2022年12月于天津市第一中心医院接受CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者99例,这些患者均发生NE并随后接受G-CSF治疗,按照G-CSF使用时间分为早期G-CSF组(7 d内使用,n=56)与对照组(7 d后使用,n=43),分析G-CSF应用后NE恢复情况及不良反应发生情况。结果:早期G-CSF组患者NE持续时间短于对照组[4(2,5.7)vs 11(9,14),P<0.05],但两组中性粒细胞计数(ANC)最低值、NE分级及感染发生率差异均无统计学意义(P=0.261,P=0.090,P=0.111)。两组患者细胞因子释放综合征(CRS)发生率及严重程度无明显差异,所有患者CRS均能有效控制。结论:R/R B-ALL患者进行CAR-T细胞治疗后早期运用G-CSF能缩短NE恢复时间,且对CAR-T细胞治疗后不良反应发生无明显影响。 展开更多
关键词 急性B淋巴细胞白血病 嵌合抗原受体修饰T细胞 粒细胞集落刺激因子
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基于BCMA突变体构建BCMA CAR-T细胞体外杀伤功能评价模型
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作者 张小雪 华静涵 +3 位作者 侯睿 刘丹 施明 曹江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期493-500,共8页
目的:为解决野生型B细胞成熟抗原(BCMA)被γ分泌酶切割导致表达不稳定的问题,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体并构建靶细胞,用于评价BCMA CAR-T细胞的杀伤功能。方法:将野生型BCMA的穿膜域替换为人CD8α穿膜域,构建抵抗γ分泌酶切割的... 目的:为解决野生型B细胞成熟抗原(BCMA)被γ分泌酶切割导致表达不稳定的问题,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体并构建靶细胞,用于评价BCMA CAR-T细胞的杀伤功能。方法:将野生型BCMA的穿膜域替换为人CD8α穿膜域,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体(BCMA-CD8αTM),构建过表达该突变体的U266(U266^(BCMA Mut))、K562(K562^(BCMA Mut))、SKOV3(SKOV3^(BCMA Mut))和CHO(CHO^(BCMA Mut))细胞;构建装载NFAT-EGFP报告基因的BCMA CAR Jurkat细胞(BCMA-CAR-Jurkat-Reporter)与U266^(BCMA Mut)细胞共培养,采用FCM检测该细胞中EGFP表达水平以指示NFAT激活水平,荧光素酶法检测BCMA CAR-T细胞对Luciferase标记的K562^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用,实时无标记动态细胞分析技术(RTCA)检测BCMA CAR-T细胞对SKOV3^(BCMA Mut)和CHO^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用。结果:应用γ分泌酶抑制剂LY411575抑制γ分泌酶活性,显著增强野生型U266细胞表面BCMA表达水平,平均荧光强度上调10倍以上;但撤除抑制剂后BCMA表达水平逐渐降低(P<0.01);BCMA-CD8αTM突变体可抵抗γ分泌酶的切割作用,在U266细胞表面稳定表达(P>0.05);U266细胞及过表达BCMA-CD8αTM的U266细胞与BCMA-CAR-Jurkat-Reporter细胞共培养后都可激活Reporter系统、增强EGFP表达,但该效应在BCMA-CD8αTM过表达的U266细胞中更显著(P<0.01);BCMA-CD8αTM在BCMA表达阴性的K562、SKOV3和CHO 3种靶细胞中成功过表达,且在LY411575处理下该突变体的表达水平仅有小幅度升高;荧光素酶法检测结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可特异、高效杀伤过表达BCMA-CD8αTM的K562细胞;RTCA结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可有效识别、杀伤过表达BCMACD8αTM的SKOV3和CHO细胞,但同等效靶比下的Mock-T细胞无此效应。结论:本实验构建的BCMA-CD8αTM突变体能够抵抗γ分泌酶的切割,在多种靶细胞表面稳定表达,为评价BCMA CAR-T细胞体外杀伤的有效性和特异性提供多种检测手� 展开更多
关键词 B细胞成熟抗原 Γ分泌酶 CD8α穿膜域 CAR-T细胞 杀伤功能评价
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针对CD4膜蛋白的CAR-T细胞抗T细胞淋巴瘤的活性研究 被引量:1
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作者 陈广华 黄海雯 +14 位作者 王易 刘慧文 徐良静 马骁 薛胜利 何雪峰 王荧 顾斌 李彩霞 仇惠英 唐晓文 金正明 苗瞄 孙爱宁 吴德沛 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期148-152,共5页
【摘要】目的探讨针对CD4膜蛋白的CAR—T细胞对CD4+T细胞淋巴瘤细胞的靶向特异性杀伤作用。方法采用重组DNA技术构建含4.1BB共刺激分子的第二代针对CD4的CAR慢病毒载体,应用293T细胞包装慢病毒,采用流式细胞术检测T细胞的转染效率及... 【摘要】目的探讨针对CD4膜蛋白的CAR—T细胞对CD4+T细胞淋巴瘤细胞的靶向特异性杀伤作用。方法采用重组DNA技术构建含4.1BB共刺激分子的第二代针对CD4的CAR慢病毒载体,应用293T细胞包装慢病毒,采用流式细胞术检测T细胞的转染效率及T细胞亚群动态变化,采用流式细胞术微球法检测培养上清中IFN-γ浓度。结果①构建的慢病毒载体转染激活的T细胞后CAR膜蛋白阳性率达到50.O%~70.0%。T细胞激活后部分CD8+T细胞弱表达(dim)CD4膜蛋白。T细胞转染针对CD4的CAR慢病毒后CD4+T细胞、CD8+CD4dimT细胞逐渐被清除。②CAR-T细胞、对照组T细胞(空载体转染的T细胞)以8:1效靶比分别与CD4+人T细胞淋巴瘤细胞株KARPAS299细胞共培养24h,杀伤效率分别为(96.9±2.1)%和(11.2±3.1)%,前者明显高于后者(t=7.137,P=0.028)。③CAR-T细胞单独培养,与转染慢病毒载体表达人CD4的K562细胞(K562-CD4细胞)、K562细胞共培养后上清中IFN—γ浓度分别为(1785±268)、(15648±2168)、(1978±354)pg/ml,CAR-T细胞与K562.CD4细胞共培养上清IFN-γ浓度明显高于其他两组,差异有统计学意义(P〈O.01)。结论CD4特异性CAR—T细胞效应细胞免疫表型为CD8+CD4+T细胞,在体外具有杀伤正常CD4+T细胞和CD4+T细胞淋巴瘤细胞的活性,对于CD4dimT细胞也有较好的清除活性。 展开更多
关键词 抗原 CD4+ 淋巴瘤 T细胞 嵌合抗原受体修饰的T细胞
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