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寻常性银屑病患者外周血T细胞受体β可变区优势表达分析 被引量:4
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作者 崔红宙 侯瑞霞 +4 位作者 李俊琴 尹国华 张静 李新华 张开明 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期581-584,共4页
目的分析寻常性银屑病患者外周血中T细胞受体②可变区(TRBV)的优势表达状况,探讨其在银屑病发病中的作用。方法以人功能性TRBV家族设计33个上游引物,共同的T细胞受体B恒定区(TRBC)基因设计下游引物,在T细胞受体Or,恒定区(TRAC... 目的分析寻常性银屑病患者外周血中T细胞受体②可变区(TRBV)的优势表达状况,探讨其在银屑病发病中的作用。方法以人功能性TRBV家族设计33个上游引物,共同的T细胞受体B恒定区(TRBC)基因设计下游引物,在T细胞受体Or,恒定区(TRAC)设计引物作为内参,分析寻常性银屑病患者、正常人对照外周血样本各10例,检测各PCR反应管荧光强度,以大于正常人外周血T细胞相应TRBV基因相对表达量虿+3s筛选TRBV优势表达基因家族。结果TRAC扩增产物阈值循环数(ct)值集中于21~24,银屑病组TRBV2扩增产物ct与TRAC产物ct差值平均数银屑病患者为2.98,TRBV5—7为3.24,TRBV6—6/6—9为2.52,TRBVl2为2.04,TRBV24为3.56,TRBV29为4.12,其表达与正常人比较均明显增高(P值均〈0.05),其中TRBV6—6/6—9、TRBVl2、TRBV29在银屑病患者呈优势表达。结论银屑病患者外周血TRBV基因家族存在优势表达,可能在银屑病T细胞异常免疫反应中起重要作用。 展开更多
关键词 银屑病 基因 t细胞受体β 互补决定区
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T细胞受体Vβ基因在自身免疫性甲状腺病病变组织中的表达及意义 被引量:4
2
作者 张进安 王一理 +3 位作者 雒文田 施秉银 朱本章 司履生 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期268-272,共5页
目的 研究国人Graves病、桥本甲状腺炎甲状腺内浸润T淋巴细胞的T细胞受体(TCR)Vβ基因家族的利用 ,发现优势利用基因 ,为阐明自身免疫性甲状腺病 (AITD)的T细胞克隆的分布模式及防治提供依据。方法 穿刺或手术取得 12例Graves病、15... 目的 研究国人Graves病、桥本甲状腺炎甲状腺内浸润T淋巴细胞的T细胞受体(TCR)Vβ基因家族的利用 ,发现优势利用基因 ,为阐明自身免疫性甲状腺病 (AITD)的T细胞克隆的分布模式及防治提供依据。方法 穿刺或手术取得 12例Graves病、15例桥本甲状腺炎病人的甲状腺组织 ,提取RNA。抽取 5例Graves病、5例桥本甲状腺炎和 7例正常人之外周静脉血 ,分离外周血淋巴细胞 (PBL) ,提取RNA。以 2 4个Vβ基因家族特异的寡核苷酸为上游引物 ,以一个Cβ特异的寡核苷酸为下游引物 ,进行逆转录 聚合酶链反应 ,比较各个Vβ基因家族的表达。 结果 Graves病及桥本甲状腺炎患者甲状腺内TCRVβ基因家族的平均表达阳性数分别为 ( 5 3± 1 2 )个 ,( 13 4± 3 0 )个 ;而且Vβ3、Vβ5和Vβ8的表达在Graves病更常见。以上两组病人及正常对照PBL之TCRVβ基因家族的平均表达分别为 ( 2 3 0± 1 0 )个 ,( 2 2 2± 1 3 )个和 ( 2 2 4± 1 7)个。结论 Graves病甲状腺内淋巴细胞的TCRVβ基因显示明显的限制性利用 ,某些Vβ家族的使用率更高 ,提示寡克隆扩增的甲状腺抗原特异性T细胞可能与Graves病的发病有关 ,这可能有重要的治疗意义。相反 ,桥本甲状腺炎病变内TCRVβ利用的限制性较差或无限制性 ,可能与随疾病进展 ,非特异性免? 展开更多
关键词 GRAVES病 甲状腺炎 自身免疫性 基因 t细胞受体β
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利用TCRVβ家族CDR3长度分析检测HCL和c-ALL的克隆性增殖T细胞 被引量:2
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作者 李扬秋 汪明春 《白血病》 CAS 1999年第1期19-21,共3页
目的推介检测分析T细胞克隆性增殖的新方法,探讨判别恶性肿瘤免疫状态的新途经。方法应用RT-PCR检测T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族的互补决定区3(CDR3)长度,并经基因扫描(genescan)分析检测3例多毛... 目的推介检测分析T细胞克隆性增殖的新方法,探讨判别恶性肿瘤免疫状态的新途经。方法应用RT-PCR检测T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族的互补决定区3(CDR3)长度,并经基因扫描(genescan)分析检测3例多毛细胞白血病(HCL)和1例普通型急性淋巴细胞白血病(c-ALL)病人外周血的T细胞克隆性。结果4例病人的部分Vβ家族的扩增产物出现单峰(单克隆)或—主峰(寡克隆)图像,而正常对照的全部PCR产物呈多峰(多克隆)图像。结论HCL和c-ALL病人外周血中存在克隆性生殖T细胞,可能是宿主对白血病抗原的一种直接反应。 展开更多
关键词 t细胞受体β CDR3 基因扫描 急性白血病
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慢性移植物抗宿主病时的T淋巴细胞受体Vβ基因表达 被引量:2
4
作者 杜欣 李扬秋 +5 位作者 李树浓 翁建宇 陆泽生 苏建华 林伟 黄梓伦 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期176-178,共3页
目的 探讨T淋巴细胞受体 (TCR)Vβ基因在慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)时的表达。方法 应用逆转录聚合酶链反应扩增 9例cGVHD患者的外周血单个核细胞的 2 4个TCRVβ亚家族的CDR3,了解患者TCRVβ的表达情况 ,并对 3例GVHD患者使用霉酚酸... 目的 探讨T淋巴细胞受体 (TCR)Vβ基因在慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)时的表达。方法 应用逆转录聚合酶链反应扩增 9例cGVHD患者的外周血单个核细胞的 2 4个TCRVβ亚家族的CDR3,了解患者TCRVβ的表达情况 ,并对 3例GVHD患者使用霉酚酸酯 (MMF)前后TCRVβ基因表达进行分析。 结果  9例患者中 ,7例表达TCRVβ3,6例表达Vβ2、Vβ8和Vβ2 3,其它分散在不同的Vβ亚家族中 ;3例使用MMF者 ,在GVHD发生前 ,有TCRVβ3及其它亚家族基因表达 ,MMF治疗后 ,GVHD得以缓解 ,Vβ3不表达 ,当GVHD再次发生时 ,基因复又表达。 结论 cGVHD的发生可能与TCRVβ3、Vβ2、Vβ8及Vβ2 3(尤其是Vβ3)基因的表达有关。 展开更多
关键词 慢性移植物抗宿主病 t细胞受体β 基因表达
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弥漫性大B细胞淋巴瘤患者外周血T细胞受体Vα与T细胞受体Vβ亚家族T淋巴细胞的分布与克隆性增殖特点 被引量:1
5
作者 叶静梅 谭获 李扬秋 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2015年第1期1-7,共7页
目的 探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血T淋巴细胞表达的T细胞受体(TCR)Vα与TCR Vβ亚家族基因谱系及克隆性增殖情况.方法 选取2006年4~5月及7月,于广州医科大学附属第一医院肿瘤血液科收治的3例DLBCL患者作为研究对象,... 目的 探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血T淋巴细胞表达的T细胞受体(TCR)Vα与TCR Vβ亚家族基因谱系及克隆性增殖情况.方法 选取2006年4~5月及7月,于广州医科大学附属第一医院肿瘤血液科收治的3例DLBCL患者作为研究对象,并纳入研究组;选取同期于本院体检的3例健康个体纳入对照组.本研究遵循的程序符合广州医科大学附属第一医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.两组受试对象性别与年龄等一般临床病历资料比较,差异无统计学意义(P>0.05).通过本院检验科采集研究组与对照组血液10 mL,采用实时聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增两组受试者外周血T淋巴细胞中29个TCRVα与24个TCR Vβ亚家族基因的互补决定区(CDR)3,采用基因扫描分析两组RT-PCR产物的CDR3序列及其长度.回顾性分析研究组和对照组的临床数据:对比分析TCR Vα与TCR Vβ亚家族基因在两组受试者T淋巴细胞中的表达情况,以及分析研究组T淋巴细胞克隆性增殖的特点.结果 ①与对照组外周血T淋巴细胞表达全部的29个TCR Vα与24个TCR Vβ亚家族基因不同,研究组3例DLBCL患者外周血T淋巴细胞表达TCR Vα亚家族基因成员的数量为20~22个,表达TCR Vβ亚家族基因成员的数量为9~17个.②3例DLBCL患者均存在寡克隆、双克隆或克隆性增殖趋势的T淋巴细胞,其中克隆性增殖T淋巴细胞表达TCR Vα亚家族基因成员主要为TCR Vα6、Vα8、Vα14、Vα15、Vα21、Vα22、Vα23及Vα25.克隆性T淋巴细胞表达TCR Vβ亚家族基因成员主要为TCR Vβ1、Vβ3、Vβ13、Vβ15及Vβ16.表达TCR Vα6、Vα8、Vα14、Vα15、Vα23及TCR Vβ13、Vβ15亚家族基因的T淋巴细胞均全部为克隆性增殖T淋巴细胞.TCR Vα6、Vα23亚家族T淋巴细胞与TCR Vβ3、Vβ13亚家族T淋巴细胞呈明显 展开更多
关键词 淋巴瘤 大B-细胞 弥漫性 基因 t细胞受体α 基因 t细胞受体β T淋巴细胞
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苯中毒工人外周血TCR Vβ克隆性T细胞利用特点 被引量:2
6
作者 李萡 李扬秋 +4 位作者 杨力建 陈少华 余卫 刘薇薇 陈嘉榆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1020-1021,共2页
目的:分析苯中毒工人外周血中克隆性增殖T细胞及其CDR3序列的特点。方法:利用RT-PCR方法扩增11例苯中毒工人外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的CDR3,阳性产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而了解其克隆性。结果:健康者外周... 目的:分析苯中毒工人外周血中克隆性增殖T细胞及其CDR3序列的特点。方法:利用RT-PCR方法扩增11例苯中毒工人外周血单个核细胞中24个TCRVβ基因的CDR3,阳性产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而了解其克隆性。结果:健康者外周血中可检测到24个Vβ亚家族,11例苯中毒工人仅检测到2~10个Vβ亚家族。11例苯中毒工人均存在1个或多个Vβ亚家族T细胞出现寡克隆及寡克隆趋势。Vβ2、4、5、6和Vβ21的寡克隆T细胞出现频率较高。结论:苯中毒工人外周血TCRVβ亚家族T细胞出现倾斜性分布和克隆性增殖,这可能是机体苯中毒后所引起的特异性免疫反应。 展开更多
关键词 t细胞受体β t细胞克隆性
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结直肠癌T细胞克隆TCRβ基因CDR3区氨基酸序列的初步分析
7
作者 李惠芳 万远廉 +2 位作者 刘玉村 杨永红 朱平 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第4期214-216,共3页
目的 通过建立结直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞 (tumorinfiltratinglymphocytes ,TIL)和术前外周血 (peripheralbloodlymphocytes ,PBL)中抗肿瘤T细胞克隆的TCRβ基因谱型 ,确定抗肿瘤T细胞克隆的分子特征。方法 采用RT PCR方法扩增结直肠... 目的 通过建立结直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞 (tumorinfiltratinglymphocytes ,TIL)和术前外周血 (peripheralbloodlymphocytes ,PBL)中抗肿瘤T细胞克隆的TCRβ基因谱型 ,确定抗肿瘤T细胞克隆的分子特征。方法 采用RT PCR方法扩增结直肠癌TIL和PBL的TCRβ基因的 2 4个不同V家族基因片段 ,经过测序凝胶分离和特殊银染色 ,结合测序结果确定TCRβ基因谱型。 结果 结直肠癌患者具有TIL和 /或PBL中T淋巴细胞的克隆性增殖。有些T细胞克隆表达相同的CDR3区氨基酸基序。CDR3区不同位点具有特征性的疏水性和极性氨基酸以及甘氨酸的分布。结论 通过分析结直肠癌抗肿瘤T细胞克隆特征性的CDR3区氨基酸序列 ,将有益于发现新的抗肿瘤免疫治疗方法。 展开更多
关键词 结直肠癌 t细胞 克隆 t细胞受体β 氨基酸 RT-PCR法 肿瘤相关抗原
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慢性乙型肝炎患者肝内TCR文库在核苷(酸)类似物治疗前后的变化及意义
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作者 吴宏楷 邓浩辉 +3 位作者 龚明星 高洪波 王战会 于乐成 《肝脏》 2021年第7期742-746,共5页
目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者经核苷(酸)类似物(NUCs)治疗前后肝内T细胞受体(TCR)文库变化特征。方法选取10例接受替比夫定(LdT)治疗的CHB患者,根据治疗104周后是否发生HBeAg血清学转换分为两组。通过高通量测序分析LdT治疗前后肝穿... 目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者经核苷(酸)类似物(NUCs)治疗前后肝内T细胞受体(TCR)文库变化特征。方法选取10例接受替比夫定(LdT)治疗的CHB患者,根据治疗104周后是否发生HBeAg血清学转换分为两组。通过高通量测序分析LdT治疗前后肝穿刺组织中TCRβCDR3区,并分析TCR文库特征及其与血清学参数相关性。结果经过104周NUCs治疗,发生HBeAg血清学转换的CHB患者肝内TCR文库不重复VJ组合(151.0比71.0,P=0.043)、CDR3克隆型(223.0比109.0,P=0.043),以及标准化香农熵(0.58比0.17,P=0.043)均表现为文库多样性显著下降,同时这些患者治疗前后HBsAg的变化程度与消失克隆型变化呈正相关(r=0.9,P=0.037)。结论CHB患者口服NUCs治疗可引起肝内TCR文库发生有利于特定T细胞克隆增生的变化,这对于促进HBeAg血清学转换有重要意义,提示在NUCs抗病毒治疗的基础上联合免疫治疗可能会更有助于HBV的控制。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 t细胞受体β 高通量测序
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原因不明复发性流产患者母-胎界面T淋巴细胞受体β链可变区基因的表达水平和频率
9
作者 汪希鹏 林其德 +2 位作者 马政文 洪艳 陆佩华 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期751-756,共6页
目的通过分析母一胎界面T淋巴细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因的表达水平和频率,探索T淋巴细胞参与原因不明复发性流产(RSA)发生的作用机制。方法采集18例原因不明RSA患者(研究组)和41例正常早孕人工流产妇女(对照组)的蜕... 目的通过分析母一胎界面T淋巴细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因的表达水平和频率,探索T淋巴细胞参与原因不明复发性流产(RSA)发生的作用机制。方法采集18例原因不明RSA患者(研究组)和41例正常早孕人工流产妇女(对照组)的蜕膜组织,基因组扫描方法检测两组患者蜕膜内TCRBV基因的表达,分析TCRBV基因表达水平和频率的分布与原因不明RSA的关系。结果(1)研究组患者蜕膜组织中TCRBV基因的表达水平,BV19为0.029±0.031,高于对照组(0.013±0.010),而BV5.2的表达水平(0.040±0.035)低于对照组(0.067±0.052),两组间分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。其余各家族的表达水平两组问比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。(2)研究组TCRBV家族中表达频率最高的前4位为BV2、BV6、BV7和BV3,其表达频率分别为66.7%、66.7%、66.7%和61.1%,均超过了50%。研究组中,BV15、BV19和BV20的表达频率分别为33.3%、38.9%和33.3%,均高于对照组(分别为7.3%、14.6%和7.3%);BV4和BV7的表达频率分别为33.3%和66.7%,均低于对照组(分别为65.9%和92.7%),两组间分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。其余各家族的表达频率两组间比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论原因不明RSA患者蜕膜组织内的TCRBV家族表达存在差异,表达频率变化显著的TCRBV家族可能导致免疫有关的流产发生的易感性。 展开更多
关键词 流产 自然 基因 t细胞受体β 互补决定区 疾病易感性
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DLI治疗CML病人的克隆性增殖TCR Vβ细胞分析 被引量:5
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作者 李扬秋 杨力建 +3 位作者 陈少华 张涛 许敏华 罗更新 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期157-160,共4页
目的 :了解供者淋巴细胞输注 (DLI)后 ,产生GVL效应的克隆性TCRVβ亚家族T细胞的情况。 方法 :利用RT PCR分别扩增 2例CML经allo BMT后复发病人DIL治疗前后不同时间外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,了解病人各Vβ亚家... 目的 :了解供者淋巴细胞输注 (DLI)后 ,产生GVL效应的克隆性TCRVβ亚家族T细胞的情况。 方法 :利用RT PCR分别扩增 2例CML经allo BMT后复发病人DIL治疗前后不同时间外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,了解病人各Vβ亚家族的利用情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果 :DLI治疗前病人外周血仅表达 4~ 11个Vβ亚家族 ,而DLI治疗后缓解期则可检测到 12~ 2 1个Vβ亚家族。基因扫描显示DLI后病人外周血出现某些新的Vβ亚家族克隆性增殖T细胞。结论 :病人的TCRVβ亚家族T细胞存在倾斜性分布现象 ,该倾斜现象在完全缓解时逐步恢复正常。DLI治疗病人时 。 展开更多
关键词 供者淋巴细胞输注 慢性粒细胞白血病 t细胞受体β基因 t细胞克隆 异基因骨髓移植
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TRBC1作为潜在靶点治疗T细胞来源肿瘤的研究进展
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作者 周萌 李慧 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第6期1163-1166,共4页
T细胞来源肿瘤具有侵袭性、易耐药且预后不良的特点,常规治疗后复发率高,目前对于其的治疗不存在特效药。若能改进早期诊断和治疗手段,将有效改善患者的预后。细胞免疫治疗对B细胞来源的血液系统肿瘤获得较高的治愈率。却因为缺乏合适... T细胞来源肿瘤具有侵袭性、易耐药且预后不良的特点,常规治疗后复发率高,目前对于其的治疗不存在特效药。若能改进早期诊断和治疗手段,将有效改善患者的预后。细胞免疫治疗对B细胞来源的血液系统肿瘤获得较高的治愈率。却因为缺乏合适的靶点对治疗T细胞来源血液系统肿瘤的免疫治疗效果不佳。最新发现的T细胞受体β链恒定结构域1(TRBC1)作为一个潜在的治疗靶点,给T细胞来源肿瘤的诊断和治疗带来希望。本文将对TRBC1在当前的疾病诊断和细胞免疫治疗中研究进展进行综述。 展开更多
关键词 t细胞抗原受体 t细胞受体β链恒定结构域1 血液肿瘤诊断 CAR-t细胞治疗 t细胞活化信号转导
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异基因造血干细胞移植后T细胞免疫重建的分子特征 被引量:5
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作者 符粤文 吴德沛 +4 位作者 孙爱宁 冯宇峰 常伟荣 朱子玲 朱平 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期312-317,共6页
目的研究异基因造血干细胞移植(allo—HSCT)后细胞免疫重建过程中T细胞克隆的T细胞受体B链可变区互补决定区3(TCRBVCDR3)分子特征。方法应用RT—PCR扩增24例不同类型白血病患者allo—HSCT后及5名正常供者外周血的TCRBV24个家族的基... 目的研究异基因造血干细胞移植(allo—HSCT)后细胞免疫重建过程中T细胞克隆的T细胞受体B链可变区互补决定区3(TCRBVCDR3)分子特征。方法应用RT—PCR扩增24例不同类型白血病患者allo—HSCT后及5名正常供者外周血的TCRBV24个家族的基因序列,通过基因扫描(Genescan)的方法判断TCRBV家族的克隆表达、CDR3克隆性质及计算B链可变区(BV)家族的利用率。对于寡克隆表达的T细胞克隆进一步电泳,得到单克隆条带并测序,获得一组与移植物抗宿主病(GVHD)或巨细胞病毒(CMV)直接相关的TCRBVCDR3的分子。结果在移植后2个月至19个月,单倍型骨髓移植的9例患者在6~14个BV家族中有表达,多克隆表达率为33%,其余为单克隆或寡克隆表达。无血缘关系外周血干细胞移植的5例患者在10~15个BV家族中有表达,多克隆表达率为45%。同胞全相合骨髓移植的10例患者在9~16个BV家族中有表达,多克隆表达率为48%。单克隆或寡克隆增生分布在24个不同的BV家族,未见共用的BV家族。单倍型骨髓移植后细胞免疫恢复迟于其他两组。其中2例患者在移植后2个月、移植后3个月检测TCRBV,发现移植后随时间增加BV家族的利用增加,CDR3的多克隆群体增多。得到的23条与GVHD及CMV直接相关的TCRBV CDR3分子,经过生物信息学比较发现,在相同的BV家族内,不同患者中可以出现结构相似的CDR3氨基酸分子,也可以完全不同;不同BV家族的CDR3分子相差较大,未发现共同使用的氨基酸基序。结论不同类型白血病患者allo-HSCT后19个月内,TCRBV家族的利用仍处于不均一状态。单倍型骨髓移植后细胞免疫恢复迟于其他两组。得到的一组与GVHD及CMV相关的单克隆或双克隆T细胞CDR3分子,在相同的BV家族内,不同患者出现结构相似的CDR3氨基酸分子;不同BV家族的CDR3分子之间未发现共同使用的氨基酸� 展开更多
关键词 造血干细胞移植 免疫重建 t细胞受体β链可变区 克隆
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小鼠胸腺输出功能及免疫重建的研究方法 被引量:1
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作者 陈广华 吴德沛 +3 位作者 王易 常惠荣 朱子玲 冯宇锋 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期112-115,共4页
目的建立实时定量PCR检测小鼠T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环(sjTREC)水平和T细胞受体β链可变区(TRBV)CDR3的方法,推测其中的初始T细胞的数目和克隆性,评价胸腺输出功能及免疫重建,从而为胸腺输出功能及移植后T细胞免疫提供可靠... 目的建立实时定量PCR检测小鼠T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环(sjTREC)水平和T细胞受体β链可变区(TRBV)CDR3的方法,推测其中的初始T细胞的数目和克隆性,评价胸腺输出功能及免疫重建,从而为胸腺输出功能及移植后T细胞免疫提供可靠的研究方法。方法分别提取小鼠脾脏细胞基因组DNA和总RNA。PCR方法扩增DNA标本目的片段。纯化鉴定并构建含sjTREC片段的质粒标准品。建立稳定的实时定量PCR反应检测小鼠脾脏淋巴细胞sjTREC含量的方法。采用半巢式PCR扩增TRBV基因产物,采用ABI3700分析TRBV谱型。结果构建了可靠的sjTREC和TCRα质粒标准品。在实时定量PCR中建立了可靠的标准曲线。建立的定量PCR方法分析可成功用于脾细胞的sjTREC含量的检测。8周龄BALB/c小鼠脾细胞sjTREC含量为(626±115)拷贝/105个脾细胞。结论建立了可靠的定量检测小鼠T淋巴细胞中sjTREC含量的方法,建立了分析T细胞谱型的方法,为研究生理和病理条件下胸腺输出功能及T细胞免疫重建改变提供了可靠的方法。 展开更多
关键词 实时定量PCR 信号结合t细胞受体删除环 t细胞受体β链可变区
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异基因造血干细胞移植受者T细胞受体β链CDR3谱型表达与巨细胞病毒激活 被引量:1
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作者 吴志华 荆敏 +5 位作者 梁韩英 杨镕 黄雅萍 陈晓明 胡建华 范骏 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期515-521,共7页
目的:探讨T细胞受体(TCR)β链可变区域(BV)的互补决定区(CDR3)谱型表达与异基因造血干细胞移植(HSCT)受者CMV激活的关系。方法:采用荧光定量PCR熔解曲线技术,扩增测序7例HSCT受者和3名健康对照者外周血单个核细胞的TCRBV家族... 目的:探讨T细胞受体(TCR)β链可变区域(BV)的互补决定区(CDR3)谱型表达与异基因造血干细胞移植(HSCT)受者CMV激活的关系。方法:采用荧光定量PCR熔解曲线技术,扩增测序7例HSCT受者和3名健康对照者外周血单个核细胞的TCRBV家族CDR3谱型;采用免疫组织化学法检测外周血白细胞中的CMV—pp65抗原;应用ELISA法检测HSCT受者血清中的CMV—IgM。分析TCRBV家族CDR3表达与CMV激活的相关性。结果:3名健康对照者24个TCRBV家族均表达。7例HSCT受者术后TCRBV家族CDR3测序结果显示为BV9、BV11、BV17、BV20等BV家族序列;TCRBV9含“QVRGGTDTQ”,TCRBV11含“VATDEQ”和“LGDEQ”,TCRBV17含“IGQGNTEA”,TCRBV20含“VGLAANEQ”等共有氨基酸序列。抗原检测结果显示:术后3个月7例受者中有5例受者抗原血症阳性,CMV—pp65阳性细胞数为(2—15)个/5×10^4白细胞。抗体检测结果显示:术后3个月7例受者中3例受者CMV-IgM阳性。TCRBV家族CDR3的表达在CMV抗原血症阳性受者与抗原血症阴性受者之间差异无统计学意义(均P〉0.05);但TCRBV11家族的表达在CMV-IgM阳性受者与CMV-IgM阴性受者之间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:HSCT受者在T细胞免疫应答中有特定的TCRBV家族CDR3谱型,其中TCRBV11的表达可能与CMV激活有关。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 基因 t细胞受体β/免疫学 互补决定区/免疫学 基因表达谱 细胞病毒 聚合酶链反应
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单倍型骨髓移植小鼠移植物抗宿主病模型的建立及移植物抗宿主病靶器官T细胞受体克隆检测 被引量:1
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作者 符粤文 吴德沛 +3 位作者 陈峰 冯宇锋 宋永平 朱平 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第6期1171-1175,共5页
目的:建立单倍型骨髓移植小鼠模型,观察单倍型骨髓移植小鼠移植物抗宿主病(GVHD)靶器官的组织病理表现及器官特异性T细胞受体克隆表达。方法:建立单倍型异基因移植小鼠GVHD模型,进行移植前后GVHD靶器官的病理分析,同时应用RT-PCR扩增小... 目的:建立单倍型骨髓移植小鼠模型,观察单倍型骨髓移植小鼠移植物抗宿主病(GVHD)靶器官的组织病理表现及器官特异性T细胞受体克隆表达。方法:建立单倍型异基因移植小鼠GVHD模型,进行移植前后GVHD靶器官的病理分析,同时应用RT-PCR扩增小鼠肝脏、皮肤、结肠、肾脏等组织移植前、后T细胞受体β链可变区(TCRBV)20个家族的基因序列,通过基因扫描判断TCRBV家族的克隆表达和CDR3克隆的性质。结果:单倍型骨髓移植小鼠在移植后14d临床开始出现典型的GVHD表现。移植后24d受鼠肝脏、皮肤、远端回肠等均出现典型的GVHD病理表现,在其T细胞受体谱型图上出现了分属TCRBV家族的单克隆或寡克隆增生的T细胞,而肾脏等非GVHD靶器官中浸润的淋巴细胞为多克隆的T细胞增生。结论:单倍型骨髓移植小鼠在移植后14d出现典型的GVHD表现,GVHD靶器官出现的T细胞单克隆及寡克隆增生可能与GVHD的发生相关。 展开更多
关键词 单倍型骨髓移植 移植物抗宿主病 t细胞受体β链可变区 CDR3 小鼠
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基因熔解曲线谱型图技术分析肺结核患者CD4^+T细胞受体β链可变区基因多态性
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作者 张冬梅 孙晓雷 +5 位作者 段义农 汤伟 周鸣鸣 李正欣 张菊 张洁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1317-1322,共6页
目的利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(periphera... 目的利用荧光定量PCR结合基因熔解曲线谱型图(gene melting curve spectratyping,GMCS)技术分析肺结核病患者外周血CD4+T细胞中T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)基因多态性。方法提取15例健康人和30例肺结核患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的总RNA,反转录成cDNA,以26个人TCRBV基因家族设计上游引物,共同的TCRβ链恒定区(BC)基因设计下游引物,荧光定量PCR扩增26个TCRBV基因家族谱系,样品谱系用荧光定量PCR中的DNA熔解曲线进行分析。结果在15例健康人外周血T细胞TCRβ链中,同一BV位点PCR产物的熔解曲线谱型相同。但是与健康人相比,30例肺结核患者的外周血TCRβ链26个BV位点熔解曲线谱型存在差异,差异比率为6.7%~33.3%,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。此外,26个位点中有13个位点熔解曲线谱型差异比率≥20%。结论荧光定量PCR结合GMCS技术分析TCRBV基因家族谱系情况,方法稳定、简便,能较好地监测肺结核患者外周血T细胞TCR的β链谱型。 展开更多
关键词 CD4阳性T淋巴细胞 t细胞受体β基因 遗传多态现象 肺结核
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Analysis of the Clonal Expansion of TCR VβT Cells in Patients
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作者 LIYangqiu YANGLijian 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2002年第3期145-148,共4页
Objective To investigate the clonal expansion of T cell receptor(TCR)Vβ subfamily T cells which were considered as GVL effective cells after donor lymphocytes infusion(DLI)in patients with relapse chronic myelogenous... Objective To investigate the clonal expansion of T cell receptor(TCR)Vβ subfamily T cells which were considered as GVL effective cells after donor lymphocytes infusion(DLI)in patients with relapse chronic myelogenous leukemia(CML)after allogeneic bone marrow transplantation(allo-BMT).Methods The CDR3 of TCR Vβ24 subfamily genes were amplified in samples of peripheral blood mononuclear cells at different time points before and after DLI,which were drawn from 2 cases of relapse CML treated by allo-BMT,to observe the usage of TCR Vβrepertoire.The PCR products were further labeled with fluorescent and analyzed by genescan technique for identification of the CDR3 size,to evaluate the clonality of the detectable TCR VβT cells.Results Only 4-11 VβT subfamily T cells could be identified in CML cases before DLI,and 12-21 Vβ subfamily T cells could be deected in samples from CML which display remission after DLI.Genescan analysis showed that new clonal expansion TCR Vβ subfamily T cells could be found in samples after DLI.Conclusion The skew distribution of TCR Vβ subfamily T cells could be found on patients with relapse CML after allo-BMT,and this skewing pattern may stage to stage to normal pattern during the complete remission.The GVL effect may exert through some clonal expansion TCR Vβ subfamily T cells during the treatment of DLI in relapse CML. 展开更多
关键词 慢性粒细胞性白血病 CML DLI治疗 供体淋巴细胞输注 t细胞受体β基因 克隆性增殖
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单倍体相合骨髓移植小鼠GVHD靶器官的器官特异性T细胞受体克隆谱型的分子特征
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作者 符粤文 吴德沛 +3 位作者 陈峰 冯宇锋 宋永平 朱平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期999-1004,共6页
本课题通过单倍体相合骨髓移植小鼠模型,研究GVHD靶器官的器官特异性T细胞受体谱型特点,以及GVHD靶器官克隆性T细胞的TCRBVCDR3分子特征。建立单倍体相合异基因移植小鼠GVHD模型,应用RT-PCR扩增小鼠肝脏、皮肤、回肠等组织移植前后TCRB... 本课题通过单倍体相合骨髓移植小鼠模型,研究GVHD靶器官的器官特异性T细胞受体谱型特点,以及GVHD靶器官克隆性T细胞的TCRBVCDR3分子特征。建立单倍体相合异基因移植小鼠GVHD模型,应用RT-PCR扩增小鼠肝脏、皮肤、回肠等组织移植前后TCRBV20个家族的基因序列,通过基因扫描判断TCRBV家族的克隆表达、CDR3克隆性质。对于寡克隆表达的TCRBV家族在长泳道测序胶上电泳,对部分单克隆条带测序,得到一组肝脏、皮肤、回肠在移植后不同时间与GVHD相关的TCRBV CDR3的分子。结果表明:单倍体相合骨髓移植小鼠在移植后14天临床开始出现典型的GVHD表现。移植后受鼠肝脏、皮肤、远端回肠等均出现典型的GVHD病理表现,在其T细胞受体谱型图上出现了分属TCRBV家族的单克隆或寡克隆增生的T细胞。肝脏、皮肤、回肠等GVHD的靶器官中部分克隆性增生的T细胞TCRBVCDR3分子存在一些C′末端保守的CDR3氨基酸基序(motif)。结论:单倍体相合异基因移植后发生GVHD的组织可出现T细胞单克隆及寡克隆增生,GVHD相关T细胞克隆共用一些保守的TCRBVCDR3基序,识别类似的抗原。 展开更多
关键词 单倍体相合骨髓移植 GVHD t细胞受体β链可变区 CDR3
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急性淋巴细胞白血病患儿化疗结束后T淋巴细胞克隆谱系分析
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作者 张蕊 李志刚 +2 位作者 吴敏媛 朱平 胡亚美 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2010年第3期122-126,共5页
目的了解急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿化疗结束后T淋巴细胞免疫重建情况。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)高压变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测8例正常对照及44例化疗结束后的ALL患儿外周血T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)第三互补决定区(C... 目的了解急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿化疗结束后T淋巴细胞免疫重建情况。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)高压变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测8例正常对照及44例化疗结束后的ALL患儿外周血T细胞受体(TCR)β链可变区(BV)第三互补决定区(CDR3)的克隆谱系。结果白血病化疗结束至48个月TCRBV家族仍可见表达增高或降低(P均<0.05)。化疗结束后TCRBVCDR3谱型多态性基本恢复,但寡克隆增生情况仍明显高于正常对照组(P均<0.05),小于6个月组差异最明显(P均<0.05)。16例普通B细胞急淋(c-ALL)BV8、BV5.1、BV5.2和BV12发生克隆性增生的频率较高,9例前B细胞急淋(pre-B)BV6家族发生克隆性增生较多。结论白血病患儿化疗结束至48个月T细胞免疫尚未完全恢复;T细胞克隆谱系异常以寡克隆增生为主。 展开更多
关键词 白血病 淋巴细胞 急性 t细胞受体β链V区 CDR3克隆谱系 免疫重建
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一例慢性移植物抗宿主病患者TCRVβT细胞分布和克隆性的研究 被引量:4
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作者 杜欣 李扬秋 +4 位作者 翁建宇 陆泽生 苏建华 林伟 黄梓伦 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期406-408,共3页
目的 了解非血缘关系骨髓移植后慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)患者的T细胞受体(TCR)VβT细胞的分布和克隆性。方法 应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增 1例非血缘关系骨髓移植后cGVHD患者的外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族的CD... 目的 了解非血缘关系骨髓移植后慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)患者的T细胞受体(TCR)VβT细胞的分布和克隆性。方法 应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增 1例非血缘关系骨髓移植后cGVHD患者的外周血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族的CDR3,了解患者TCRVβT细胞的分布情况 ,PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性。结果 患者存在 8个TCRVβ亚家族T细胞 ;其中Vβ2、Vβ3、Vβ8和Vβ13亚家族为克隆性增殖T细胞。 结论 患者外周血出现不均匀性 (即倾斜性 )分布和克隆性生长TCRVβ家族T细胞 ,它可能与cGVHD的发生有关。 展开更多
关键词 t细胞受体Vβ 骨髓移植 移植物抗宿主病 克隆
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