选择优良菌株用于仔猪水肿病疫苗的改进 被引量：18

1

作者 徐建生 成大荣 +3 位作者 黄维嘉 张迎春 李俊宝 董国雄 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期297-300,共4页

传统的仔猪水肿病疫苗 (目前市场上广泛使用 ) ,只是以致水肿病大肠杆菌菌株的O抗原为基础 ,而没有考虑水肿毒素SLT_lle抗原和菌毛F18抗原 ,其免疫效果难以提高。在仔猪水肿病疫苗的改进中 ,我们除了考虑O13 9、O18、O14 1菌体抗原之外 ... 传统的仔猪水肿病疫苗 (目前市场上广泛使用 ) ,只是以致水肿病大肠杆菌菌株的O抗原为基础 ,而没有考虑水肿毒素SLT_lle抗原和菌毛F18抗原 ,其免疫效果难以提高。在仔猪水肿病疫苗的改进中 ,我们除了考虑O13 9、O18、O14 1菌体抗原之外 ,还利用PCR技术、单克隆抗体技术、电镜技术筛选了含有水肿毒素SLT_lle抗原和菌毛F18抗原的菌株。本研究中获得用于新一代仔猪水肿病疫苗的三型大肠杆菌菌株 :O13 9:SLT_lle+ :F18ab+ 、O13 8:SLT_lle+ :F18ab+ 以及O14 1:SLT_lle+ :F18ac+ 。 展开更多

关键词 仔猪水肿病 疫苗 改进

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仔猪水肿病及其中西医结合诊疗措施 被引量：17

2

作者 王洪水 侯相山 唐少刚 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第18期8503-8504,8596,共3页

仔猪水肿病是断奶仔猪多发的一种急性肠毒血症,以突然发病、头部水肿、神经症状、胃壁和肠系膜水肿为主要特征。该病发病率不高,但是病死率高达90%以上,严重危害仔猪健康。该文阐述了仔猪水肿病的病因、流行特点、临床症状和病理变化,... 仔猪水肿病是断奶仔猪多发的一种急性肠毒血症,以突然发病、头部水肿、神经症状、胃壁和肠系膜水肿为主要特征。该病发病率不高,但是病死率高达90%以上,严重危害仔猪健康。该文阐述了仔猪水肿病的病因、流行特点、临床症状和病理变化,重点介绍了该病的诊断、预防和治疗,以期为该病的防治提供参考。 展开更多

关键词 仔猪水肿病 诊断 治疗

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猪水肿病发病原因及病症防治 被引量：9

3

作者 王卓 蔡晓红 《畜牧兽医科学（电子版）》 2020年第18期67-68,共2页

猪水肿病是目前影响制约我国养猪业发展的主要疾病之一,该病是由病原性大肠杆菌引起的一种急性传染病,在断奶后1~2周的仔猪中尤其容易发病。由于该病的病程短、致死率高,因此治疗起来也非常困难,所以养殖人员在日常养殖中应做好相关的... 猪水肿病是目前影响制约我国养猪业发展的主要疾病之一,该病是由病原性大肠杆菌引起的一种急性传染病,在断奶后1~2周的仔猪中尤其容易发病。由于该病的病程短、致死率高,因此治疗起来也非常困难,所以养殖人员在日常养殖中应做好相关的预防措施,从源头上减少该病的发生。该文具体阐述引发猪水肿病的发病原因,在深入分析水肿病发病症状的基础上提出切实可行的防治措施。 展开更多

关键词 猪水肿病 发病原因 病症防治

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猪水肿病病理模型复制 被引量：7

4

作者 周宏超 高立云 +5 位作者 王中杰 索占伟 张涛 范光丽 刘钟杰 穆祥 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期16-19,共4页

以小鼠为试验动物,分别经腹腔注射产志贺样毒素大肠埃希菌菌液和志贺样毒素二型变异体粗制品,复制猪水肿病病理模型。结果表明,小鼠最佳感染细菌数为1.6×1010,志贺样毒素二型变异体最佳感染剂量为0.25 mg。大肠埃希菌菌菌液和志贺... 以小鼠为试验动物,分别经腹腔注射产志贺样毒素大肠埃希菌菌液和志贺样毒素二型变异体粗制品,复制猪水肿病病理模型。结果表明,小鼠最佳感染细菌数为1.6×1010,志贺样毒素二型变异体最佳感染剂量为0.25 mg。大肠埃希菌菌菌液和志贺样毒素二型变异体人工感染小鼠,其临床症状、病理变化没有明显差异。主要病理组织学变化为:肝变性、坏死,脾巨细胞增生、部分淋巴细胞坏死,肺充血,肾间质血管微血栓形成,小肠绒毛结构被破坏,固有层水肿,间质微血管充血,大脑噬神经现象和卫星化现象等。结果表明志贺样毒素二型变异体是引起猪水肿病主要致病因子,小鼠可作为研究猪水肿病的动物模型。 展开更多

关键词 猪水肿病 志贺样毒素二型变异体 病理模型 小鼠

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类志贺氏菌毒素型变异体基因的克隆与鉴定 被引量：6

5

作者 成大荣 徐建生 +1 位作者 董国雄 李俊宝 《扬州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第3期23-26,共4页

用聚合酶链式反应(PCR)技术,从大肠杆菌TB1中扩增出类志贺氏菌毒素型变异体(SLTe)的A亚单位基因(slteA)的960bp的编码序列和B亚单位基因(slteB)的207bp的编码序列.将这两个PCR扩增产物在EcoR和BamH位点分别克隆进pUC18质粒载体,并转化... 用聚合酶链式反应(PCR)技术,从大肠杆菌TB1中扩增出类志贺氏菌毒素型变异体(SLTe)的A亚单位基因(slteA)的960bp的编码序列和B亚单位基因(slteB)的207bp的编码序列.将这两个PCR扩增产物在EcoR和BamH位点分别克隆进pUC18质粒载体,并转化到大肠杆菌TG1中,再根据限制性内切酶酶切分析筛选到含有slteA的重组质粒p18slteA和含有slteB的重组质粒p18slteB.将重组质粒p18slteA和p18slteB进行序列分析,结果表明:这两个重组质粒中的插入序列与发表的slteA和slteB是一致的。 展开更多

关键词 仔猪 水肿病 基因 类志贺氏菌毒素 克隆 变异体

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致猪水肿病大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立及应用 被引量：5

6

作者 李伟杰 赵耘 +3 位作者 魏财文 岂晓鑫 田野 蒋桃珍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期537-543,共7页

本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法。分别针对大肠埃希菌16SrDNA、志贺毒素Stx2eA亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测。结果显示,阳性... 本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法。分别针对大肠埃希菌16SrDNA、志贺毒素Stx2eA亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测。结果显示,阳性对照菌株扩增产物大小分别为1 062、733和313bp。特异性和灵敏性检测结果表明,与肠炎沙门菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、支气管败血波氏杆菌和猪链球菌等猪常见致病菌均无交叉反应;菌体直接扩增法最低检出量为1 875CFU。利用建立的多重PCR检测方法对分离收集的128株大肠埃希菌进行鉴定,得到36株致猪水肿病大肠埃希菌,其中30株既有菌毛F18ab又产志贺毒素Stx2e,另外6株仅产志贺毒素Stx2e。结果表明,本试验所建立的多重PCR检测方法对致猪水肿病大肠埃希菌的快速诊断和流行病学调查具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 猪水肿病 大肠埃希菌 志贺毒素Stx2e 菌毛F18ab

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一起猪水肿病病原分离鉴定及药敏试验 被引量：3

7

作者 梁乔 赵凤菊 +2 位作者 于学武 李井春 赵晓彤 《动物医学进展》 北大核心 2016年第8期120-123,共4页

为查明猪群的发病原因,对发病猪进行了临床剖检及实验室检测,通过分子病原学检测,排除了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种病原感染,并对病料进行了细菌分离鉴定与药敏试... 为查明猪群的发病原因,对发病猪进行了临床剖检及实验室检测,通过分子病原学检测,排除了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种病原感染,并对病料进行了细菌分离鉴定与药敏试验。结果发现,所分离到的菌株培养特性及生化反应特性与大肠埃希菌基本一致,经进一步鉴定菌体抗原血清型均为O65和O68;药敏试验结果表明,分离株存在多重耐药现象,其对喹诺酮类、大环内酯类、青霉素类、氨曲南类药物均呈不同程度耐药,而其对氨基糖苷类、磺胺类药物均较敏感,进一步试验验证分离株均能产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。 展开更多

关键词 猪水肿病 大肠埃希菌 分离鉴定 耐药性 超广谱Β-内酰胺酶

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猪水肿病毒素A亚单位基因的克隆及表达的尝试 被引量：1

8

作者 成大荣 徐建生 +1 位作者 董国雄 李俊宝 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第5期4-8,共5页

以聚合酶链式反应 ( PCR)技术从大肠杆菌 TB1中扩增出猪水肿病毒素 ( SLT- IIe)的 A亚单位基因的 960 bp。将此 PCR扩增产物 ( slt- IIe A)在 Eco RI和 Bam HI位点间克隆进质粒p UC1 8中 ,获得了重组质粒 p1 8slt- IIe A,经 Micro Genic... 以聚合酶链式反应 ( PCR)技术从大肠杆菌 TB1中扩增出猪水肿病毒素 ( SLT- IIe)的 A亚单位基因的 960 bp。将此 PCR扩增产物 ( slt- IIe A)在 Eco RI和 Bam HI位点间克隆进质粒p UC1 8中 ,获得了重组质粒 p1 8slt- IIe A,经 Micro Genic computer program分析证明在其整个序列中含有与已发表的 slt- IIe序列相同的序列 ,说明质粒 p1 8slt- IIe A是含有 slt- IIe A的重组质粒。切割重组质粒 p1 8slt- IIe A,将 slt- IIe A基因插入到表达性质粒载体 p GEX- 6p- 1中处于谷胱苷肽转移酶 ( GST)基因的下游 ,构建成重组质粒 ppslt- IIe A,并证明其中含有 slt- IIe A基因。然而 ,与原初预计结果相反 ,受到质粒 ppslt- IIe A转染的大肠杆菌 BL2 1 (名为重组质粒 PPSLT- IIe A)在不同温度条件、不同培养时间和不同 IPTG浓度下 ,却未表达预期的融合蛋白 GST- SLT- IIe A。本文对未能表达一事的可能原因进行了讨论。 展开更多

关键词 仔猪 水肿病 毒素A 亚单位基因 克隆 表达

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仔猪水肿病的鉴别诊断与防治 被引量：2

9

作者 徐波 《河北农业科学》 2008年第12期47-48,共2页

介绍了仔猪水肿病的流行病学、临床症状、病理学诊断、细菌学诊断和鉴别诊断等,并提出了治疗和预防综合措施。

关键词 仔猪 仔猪水肿病 鉴别诊断 防治

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猪水肿病毒素B亚单位的表面表达

10

作者 徐建生 崔治中 +2 位作者 成大荣 董国雄 李俊宝 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期219-223,共5页

用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从大肠杆菌PPSLT_ⅡeB中扩增出猪水肿病素 (SLT_Ⅱe)的B亚单位基因 (slt_ⅡeB)的 2 0 4bp的编码序列。将此PCR扩增产物按预定的阅读框架克隆进质粒表达载体PZSPAX ,并转化到大肠杆菌HB10 1中 ,筛选到含有s... 用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从大肠杆菌PPSLT_ⅡeB中扩增出猪水肿病素 (SLT_Ⅱe)的B亚单位基因 (slt_ⅡeB)的 2 0 4bp的编码序列。将此PCR扩增产物按预定的阅读框架克隆进质粒表达载体PZSPAX ,并转化到大肠杆菌HB10 1中 ,筛选到含有slt_ⅡeB的重组质粒PZBSPAX。将重组质粒PZBSPAX进行序列分析 ,结果表明 :重组质粒PZBSPAX中的插入序列与发表的slt_ⅡeB是一致的 ,证明PZBSPAX就是含有slt_ⅡeB的重组表达质粒。含有重组质粒PZBSPAX的大肠杆菌HB10 1命名为重组大肠杆菌PZBSPAX。通过在不同温度条件下、不同培养时间情况下、不同IPTG诱导条件下 ,利用荧光抗体染色证明重组大肠PZBSPAX可表面表达预期的融合蛋白PP_SLT_ⅡeB_SPAX ;利用SDS_PAGE、Western_blot对重组大肠杆菌PZBSPAX的表达进行了分析 ,结果表明重组大肠杆菌PZBSPAX表达的融合蛋白PP_SLT_lleB_SPAX与预期大小一致 。 展开更多

关键词 仔猪 水肿病 毒素 B亚单位 表面表达 传染病 大肠杆菌 抗原性

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猪水肿病发病原因及综合防治措施

11

作者 王强 《畜牧兽医科学（电子版）》 2022年第8期89-90,共2页

猪水肿病是由溶血性大肠杆菌、仔猪消化机能不完善、所食饲料蛋白含量高及应急等因素引起的疾病,又名猪胃肠水肿,俗称猪摇摆病。该病的临床特征是猪突然发病,病猪蹒跚、左右摇摆,肌肉抽搐、震颤,眼睑、头部水肿。我国各地均有发生,发病... 猪水肿病是由溶血性大肠杆菌、仔猪消化机能不完善、所食饲料蛋白含量高及应急等因素引起的疾病,又名猪胃肠水肿,俗称猪摇摆病。该病的临床特征是猪突然发病,病猪蹒跚、左右摇摆,肌肉抽搐、震颤,眼睑、头部水肿。我国各地均有发生,发病特点表现为:多发于同一窝仔猪中体质硕壮、生长发育良好的断奶仔猪,没有断奶的仔猪和育肥猪发生的很少。该文总结阐述了猪水肿病的发病原因、流行病学、临床症状、病理变化、鉴别诊断、防控措施等。 展开更多

关键词 猪水肿病 发病原因 流行病学 临床症状 防控措施

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猪水肿病预防与治疗 被引量：1

12

作者 张洪兵 《畜牧兽医科学（电子版）》 2021年第2期56-57,共2页

猪水肿病在生猪养殖业中较为常见,其主要发生于仔猪,整体发病率较高,且仔猪患病后死亡率长期高居不下,若无法给予及时处理,将会给养殖户造成严重的经济损失。该文从猪水肿病的研究现状出发,结合生猪养猪业实际情况,简要介绍猪水肿病的... 猪水肿病在生猪养殖业中较为常见,其主要发生于仔猪,整体发病率较高,且仔猪患病后死亡率长期高居不下,若无法给予及时处理,将会给养殖户造成严重的经济损失。该文从猪水肿病的研究现状出发,结合生猪养猪业实际情况,简要介绍猪水肿病的临床特征和发病原因,并深入探究猪水肿病预防和治疗措施。 展开更多

关键词 猪水肿病 预防 治疗 措施

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猪水肿病症状与防治 被引量：1

13

作者 苏德昌 《畜牧兽医科学（电子版）》 2021年第3期80-81,共2页

猪水肿病是产毒素的大肠杆菌感染引发,多发生于断奶后营养状态良好的仔猪群体,典型的症状是胃壁出现水肿。猪水肿病的发生率虽然不高,一旦发生将会快速向整个猪群传播蔓延,具有很高的致死率,常会对生猪养殖业造成巨大经济损失。猪水肿... 猪水肿病是产毒素的大肠杆菌感染引发,多发生于断奶后营养状态良好的仔猪群体,典型的症状是胃壁出现水肿。猪水肿病的发生率虽然不高,一旦发生将会快速向整个猪群传播蔓延,具有很高的致死率,常会对生猪养殖业造成巨大经济损失。猪水肿病的发生常呈地方流行,仅限于某些猪群不具备广泛传播性,发病率10%~35%,致死率80%以上,威胁严重时高达100%。该文主要论述猪水肿病的临床症状和防治措施。 展开更多

关键词 猪水肿病 发生 防治

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应用聚合酶链式反应(PCR)技术诊断仔猪水肿病 被引量：1

14

作者 杨莉 吴位珩 +3 位作者 杨茂生 贾慧珺 杨胜坤 杨相策 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2009年第6期139-141,共3页

聚合酶链式反应(PCR)是一种DNA快速扩增技术及基因检测的常用手段。应用PCR技术原理,研究建立了仔猪水肿病PCR检测方法。试验结果表明:该方法的敏感性测定模板浓度为4.5 pg,特异性测定仔猪水肿溶血性大肠杆菌在230 bp出现特异扩增带。... 聚合酶链式反应(PCR)是一种DNA快速扩增技术及基因检测的常用手段。应用PCR技术原理,研究建立了仔猪水肿病PCR检测方法。试验结果表明:该方法的敏感性测定模板浓度为4.5 pg,特异性测定仔猪水肿溶血性大肠杆菌在230 bp出现特异扩增带。通过对24份疑似仔猪水肿病样本的检测,测得仔猪水肿病的阳性率为75%(18/24);用血清型鉴定试验检测,检出率为54.17%(13/24);两种试验对比检测的符合率为72.22%(13/18)。表明:仔猪水肿病PCR检测方法具有敏感性强、特异性高、检测快速等优点,为仔猪水肿病临床诊断提供了快速检测参考依据。 展开更多

关键词 聚合酶链式反应 仔猪水肿病 诊断

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大肠杆菌O139及其所产志贺样毒素SLT-IIe对猪临床相关指征的影响 被引量：1

15

作者 范永超 刘海隆 +3 位作者 施晓杰 张倩 冯波 穆祥 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第8期106-111,共6页

为了评估大肠杆菌O139及其所产志贺样毒素二型变异体(SLT-IIe)对猪临床相关指征的影响是否一致,试验选取23日龄仔猪15头,随机分为对照组、细菌组、毒素组,每组5只。通过观察和触摸的方法采集各组仔猪的临床症状,通过剖检及HE染色观察各... 为了评估大肠杆菌O139及其所产志贺样毒素二型变异体(SLT-IIe)对猪临床相关指征的影响是否一致,试验选取23日龄仔猪15头,随机分为对照组、细菌组、毒素组,每组5只。通过观察和触摸的方法采集各组仔猪的临床症状,通过剖检及HE染色观察各组仔猪脏器的病理变化。结果表明:与对照组相比,毒素组和细菌组呈现面部水肿、共济失调等仔猪水肿病特征性症状,肠腔积液,结肠系膜呈透明胶冻样水肿,胃壁水肿;组织学检查发现模型组小肠绒毛变短,肠黏膜下层及固有层水肿。研究表明,用大肠杆菌O139和SLT-IIe均成功诱导了仔猪水肿病,且用细菌和SLT-IIe诱导的发病猪各项临床指征基本一致。 展开更多

关键词 大肠杆菌 志贺样毒素 猪水肿病 临床症状

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致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86SLT-ⅡeA基因的克隆与表达

16

作者 宁官保 田文霞 +3 位作者 刘国刚 李宏全 马海利 高荣琨 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第5期21-23,27,189,共5页

为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,... 为了克隆与表达致猪水肿病大肠杆菌标准菌株F107/86类志贺毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)基因,试验以F107/86为模板,PCR扩增去掉信号肽的935 bp的SLT-ⅡeA亚单位基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间并测序,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明:对筛选出的阳性重组质粒pGEX-SLT-ⅡeA-4测序并与GenBank登录的M36727序列比较,证明插入序列及读码框正确;表达产物GST-SLT-ⅡeA经SDS-PAGE分析其大小为58.3 ku;Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫原性。说明试验所构建的原核表达载体可大量表达抗原蛋白。 展开更多

关键词 猪水肿病 标准菌株F107/86 SLT—ⅡeA 克隆 原核表达

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志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体单克隆抗体的制备及其应用 被引量：4

17

作者 杨鹭花 董国雄 李俊宝 《中国兽医科技》 CSCD 1999年第3期6-9,共4页

应用淋巴细胞杂交瘤技术，获得１株针对志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体（ＳｈｉｇａｌｉｋｅｔｏｘｉｎⅡｖａｒｉａｎｔ，ＳＬＴⅡｖ）Ａ亚基单位的杂交瘤细胞，并建立了以硝酸纤维素膜为载体的菌落ＥＬＩＳＡ法。用此法检测１５株分离... 应用淋巴细胞杂交瘤技术，获得１株针对志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体（ＳｈｉｇａｌｉｋｅｔｏｘｉｎⅡｖａｒｉａｎｔ，ＳＬＴⅡｖ）Ａ亚基单位的杂交瘤细胞，并建立了以硝酸纤维素膜为载体的菌落ＥＬＩＳＡ法。用此法检测１５株分离自猪水肿病的野毒菌株和３株产其它型ＳＬＴ的标准菌株，发现该单克隆抗体与１４株野毒菌株呈阳性反应，与产ＳＬＴⅡ的９３３Ｗ株菌有微弱交叉反应，但与产ＳＬＴⅠ和ＶＴ２的菌株（Ｈ３０和Ｅ３２５１１）均无反应。这表明该法能特异、敏感、简便、快速地鉴定产ＳＬＴⅡｖ的大肠埃希氏菌。 展开更多

关键词 猪 水肿病 志贺氏菌样毒素 Ⅱ型变异体

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黄芩注射液对人工感染猪水肿病的治疗 被引量：3

18

作者 廖远军 崔玉梅 +5 位作者 胡汐柔 郑雨薇 吕红明 黄丹 邓彦宏 邓旭明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期823-826,共4页

为了研究黄芩注射液对人工感染猪水肿病的治疗作用,本试验以28-35日龄断奶仔猪作为实验动物,腹腔注射一定剂量的O139菌悬液,建立人工感染猪水肿病模型,通过给予不同剂量黄芩注射液进行治疗试验,测定了增重率、治愈率、有效率等指标。结... 为了研究黄芩注射液对人工感染猪水肿病的治疗作用,本试验以28-35日龄断奶仔猪作为实验动物,腹腔注射一定剂量的O139菌悬液,建立人工感染猪水肿病模型,通过给予不同剂量黄芩注射液进行治疗试验,测定了增重率、治愈率、有效率等指标。结果显示,给予0.2、0.4mL/kg剂量的黄芩注射液,显著增加了动物模型的增重率,其增重率和总有效率分别为96.13%和90%。结果表明,黄芩注射液能有效治疗人工感染猪水肿病,为临床应用黄芩注射液治疗猪水肿病提供了理论依据。 展开更多

关键词 黄芩注射液 人工感染猪水肿病 治疗试验

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