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题名沉默乙酰肝素酶对人胃癌细胞侵袭迁移能力的影响
被引量：12
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作者
马秀梅
王栓柱
于宏
怀娜
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机构
内蒙古医学院病理学中心
内蒙古医学院组织胚胎教研室
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出处
《肿瘤》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第10期924-928,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30660065)
教育部"春晖计划"科研合作项目(编号:z2007-1-01003)
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文摘
目的:探讨RNA干扰沉默乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因表达对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移的影响。方法:根据人HPA基因序列转录RNA的位置及小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,设计了4个靶位点,并构建了4个分别针对靶位点的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的质粒表达载体,同时合成了阴性和阳性对照质粒表达载体。采用阳离子脂质体法将以上质粒转染入人胃癌SGC-7901细胞,分别采用RT-PCR和Western印迹法检测转染前后HPA mRNA和蛋白表达的变化,选出对HPA沉默效果最佳的质粒,再应用Transwell小室基质侵袭实验和划痕损伤实验分别研究HPA表达沉默后对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:质粒载体pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085沉默人胃癌SGC-7901细胞HPA mRNA和蛋白表达的效果最好。pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085转染组中穿透Transwell小室基质的SGC-7901细胞数(289.90±18.11)明显高于对照组(44.00±15.22)(P<0.05),SGC-7901细胞的迁移距离在48、72和96h内pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085转染组明显低于对照组(P<0.05)。结论:RNA干扰技术可沉默人胃癌SGC-7901细胞中HPA mRNA和蛋白表达,从而抑制SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力。HPA可能是治疗胃癌侵袭和转移的一个新靶点。
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关键词
胃肿瘤
基因沉默
rna干扰
乙酰肝素酶
肿瘤侵润
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Keywords
stomach neoplasms gene silencing rna interference heparanase neoplasm invasiveness
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分类号
R735.2
[医药卫生—肿瘤]
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