期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到1篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
高糖通过激活干扰素基因刺激因子通路导致视网膜血管内皮细胞炎症和紧密连接受损的机制研究
1
作者 刘敏婷 文哲瑶 +3 位作者 文思颖 何学敏 石国军 陈燕铭 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1255-1264,共10页
目的探讨高糖是否通过激活干扰素基因刺激因子(STING)通路参与视网膜内皮细胞损伤及炎症反应。方法取3只db/db小鼠及3只对照(db/m)小鼠视网膜铺片分为4组,每组3张视网膜铺片,通过免疫荧光染色分别检测视网膜中STING通路激活后下游分子... 目的探讨高糖是否通过激活干扰素基因刺激因子(STING)通路参与视网膜内皮细胞损伤及炎症反应。方法取3只db/db小鼠及3只对照(db/m)小鼠视网膜铺片分为4组,每组3张视网膜铺片,通过免疫荧光染色分别检测视网膜中STING通路激活后下游分子磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)及炎症标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)(n=3)。使用甲基乙二醛(MGO)分别通过浓度及时间梯度处理人视网膜血管内皮细胞(HRVEC)模拟体内高糖环境,通过Western blotting检测STING通路相关蛋白[磷酸化干扰素调节因子(p-IRF3)、p-TBK1]、内皮细胞紧密连接蛋白[钙黏蛋白-5(VE-cadherin)、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)]等的表达(n=3),实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测炎症因子基因Ⅰ型干扰素β(IFN-1β)、白细胞介素-1β(IL-1β)转录水平(n=3)。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建STING敲除的稳定细胞株(STING CRISPR HRVEC)。在MGO处理对照组(Vector)及STING CRISPR HRVEC后,使用抗线粒体外膜转位酶20(TOM20)抗体和抗双链DNA(dsDNA)抗体进行免疫荧光共染(n=3),同时采用免疫荧光检测IRF3的入核水平验证HRVEC中STING通路激活情况(n=4)。通过Western blotting检测STING通路相关蛋白(p-IRF3)、内皮细胞紧密连接蛋白(ZO-1、VE-cadherin、CD31)等的表达,RT-qPCR检测IFN-1β、IL-1β转录水平(n=3)。另外应用小干扰RNA(siRNA)技术沉默HRVEC的STING验证上述实验(n=3)。两组间比较采用独立样本t检验。结果与对照小鼠相比,db/db小鼠视网膜血管内皮细胞中p-TBK1及GFAP荧光强度增加(P<0.001)。在体外,随着MGO处理时间的延长和处理浓度的增加,HRVEC的STING信号通路激活程度越显著[p-IRF3、p-TBK1蛋白表达水平较对照组上调(P<0.01、P<0.05),免疫荧光检测IRF3的入核水平增加(P<0.001)];内皮细胞紧密连接蛋白CD31、VE-cadherin、ZO-1下降越显著(P<0.01、P<0.05、P<0.001);炎症因子IFN-1β、IL-1β转录� 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 炎症 视网膜血管内皮细胞 干扰素基因刺激因子
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部