对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：24

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作者 林思 朱华 +3 位作者 秦慧真 王孝勋 许立拔 邓玲玉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期73-79,共7页

目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总... 目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总生物碱设置添加干预的质量浓度为50,75,112,167,250 mg·L^(-1),另设置仅添加10%胎牛血清作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞克隆实验观察细胞增殖的作用,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3种凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3的表达。结果:对叶百部总生物碱可抑制SMMC-7721细胞增殖,与空白组比较,细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),作用24,48,72 h的50%细胞抑制浓度(IC_(50))分别为(173.36±8.75),(112.14±16.50),(96.41±2.60)mg·L^(-1),细胞集落形成抑制率显著升高(P<0.01),存在浓度依赖性。与空白组比较,对叶百部总生物碱可促进细胞凋亡,SMMC-7721细胞凋亡数目和凋亡率显著增加(P<0.01),在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态,如亮蓝色细胞核染色,细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较,抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调(P<0.01);与空白组比较,对叶百部总生物碱75,112,167,250 mg·L^(-1)促凋亡蛋白Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:对叶百部总生物碱有很好的抑制SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡的作用,其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达和促进Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 对叶百部总生物碱 人肝癌 SMMC-7721细胞 凋亡 B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) Bcl-2相关X蛋白(Bax) 切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)

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对叶百部总生物碱止咳作用的谱效关系研究 被引量：16

2

作者 吴思宇 温宗良 +3 位作者 夏星 梁臣艳 杨丹丹 王孝勋 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第3期514-518,共5页

目的:研究全国29个产地对叶百部总生物碱的HPLC图谱与止咳作用的相关性,建立各产地对叶百部总生物碱与止咳作用的谱效关系,阐明止咳作用的物质基础。方法:采用灰色关联度分析方法,对全国29个产地的对叶百部总生物碱的HPLC图谱的8个特征... 目的:研究全国29个产地对叶百部总生物碱的HPLC图谱与止咳作用的相关性,建立各产地对叶百部总生物碱与止咳作用的谱效关系,阐明止咳作用的物质基础。方法:采用灰色关联度分析方法,对全国29个产地的对叶百部总生物碱的HPLC图谱的8个特征峰峰面积与止咳的2个评价指标(2 min内咳嗽次数、抑咳率)进行相关性分析,研究对叶百部总生物碱止咳作用的谱效关系。结果:对叶百部总生物碱对浓氨水致小鼠咳嗽有显著的抑制作用,与百部的止咳功效一致。在全国29个产地的对叶百部总生物碱HPLC图谱中,1号金刚大碱色谱峰峰面积大、关联度强;2~8号色谱峰对止咳作用也有较大的贡献,关联度差距较小,对止咳作用起协同作用。结论:全国29个产地的对叶百部总生物碱HPLC图谱与止咳作用具有相关性。通过谱效关系研究,可阐明对叶百部止咳作用的物质基础,为其质量控制与评价提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 对叶百部 总生物碱 止咳作用 灰色关联度分析法 谱效关系

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百部生物碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用 被引量：16

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作者 向娟 余平 +3 位作者 李明丹 张朝凤 许翔鸿 张勉 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期76-81,共6页

对叶百部总生物碱及其主要成分新对叶百部碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用进行研究,并采用细胞模型初步探讨其作用机制。实验分为假手术组、模型组、总碱组(60 mg/kg)和新对叶百部碱低、高(10、20 mg/kg)剂量组,泼尼松(6.67 mg/... 对叶百部总生物碱及其主要成分新对叶百部碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用进行研究,并采用细胞模型初步探讨其作用机制。实验分为假手术组、模型组、总碱组(60 mg/kg)和新对叶百部碱低、高(10、20 mg/kg)剂量组,泼尼松(6.67 mg/kg)为阳性对照药,以肺组织羟脯氨酸含量、TGF-β1水平、炎性水平、胶原沉积和α-SMA表达等为指标考察其抗肺纤维化效果。结果表明,总碱和新对叶百部碱均能显著改善模型小鼠的肺组织炎症和损伤,降低羟脯氨酸含量和胶原沉积;新对叶百部碱能显著降低模型小鼠肺组织α-SMA表达和TGF-β1水平。初步机制研究表明,新对叶百部碱能抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞中α-SMA的升高,表明抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化是其作用机制之一。 展开更多

关键词 对叶百部 总生物碱 新对叶百部碱 肺纤维化 肺成纤维细胞

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对叶百部总生物碱对人肺癌A549细胞凋亡、PI3K/Akt和JNK/p38 MAPK信号通路的影响 被引量：7

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作者 林思 秦慧真 +7 位作者 李泽宇 许立拔 邓玲玉 罗静 谢凤凤 张淼 朱华 王孝勋 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期69-76,共8页

目的:探讨对叶百部总生物碱对人肺癌A549细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路的影响。方法:以人肺癌A549细胞为研究对象,设置空白组和不同质量浓度(100、... 目的:探讨对叶百部总生物碱对人肺癌A549细胞凋亡及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路的影响。方法:以人肺癌A549细胞为研究对象,设置空白组和不同质量浓度(100、150、200、250、300 mg·L^(-1))对叶百部总生物碱组。利用噻唑蓝(MTT)比色法、平板克隆实验观察对叶百部总生物碱对A549细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色法和流式细胞术膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙锭(PI)双染法观察细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)和Bcl-2表达及PI3K、磷酸化(p)-PI3K、Akt、p-Akt、JNK、p-JNK、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白的表达。结果:与空白组比较,对叶百部总生物碱组(150、200、250、300 mg·L^(-1))细胞增殖抑制率显著增高(P<0.01);对叶百部总生物碱组(150、200、250、300 mg·L^(-1))细胞克隆抑制率显著升高,细胞克隆形成率显著降低(P<0.01)。与空白组比较,对叶百部总生物碱组细胞出现染色质凝聚,荧光反应加强等典型的细胞凋亡特征。与空白组比较,对叶百部总生物碱组细胞凋亡率显著升高(P<0.01);对叶百部总生物碱(150、200、250、300 mg·L^(-1))能够明显上调Caspase-3、Bax蛋白表达(P<0.05,P<0.01),显著下调Bcl-2蛋白表达(P<0.01);对叶百部总生物碱对PI3K、Akt、JNK、p38 MAPK总蛋白表达无明显影响,对叶百部总生物碱(150、200、250、300 mg·L^(-1))能够明显下调PI3K、Akt磷酸化水平(P<0.05,P<0.01);明显上调p38 MAPK磷酸化水平(P<0.05,P<0.01);对叶百部总生物碱(200、250、300 mg·L^(-1))能够明显上调JNK磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论:对叶百部总生物碱可抑制人肺癌A549细胞的增殖,并能诱导A549细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路和激活JNK/p38 MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 对叶百部总生物碱 肺癌 A549细胞 凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路 c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路

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序贯法研究广西不同产地对叶百部总生物碱对小鼠的止咳作用 被引量：7

5

作者 王孝勋 黄茂春 +2 位作者 赵旭 夏星 黄骞春 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1935-1937,共3页

目的:采用序贯法研究广西不同产地对叶百部总生物碱止咳作用,为对叶百部品质评价以及临床用药提供理论依据。方法:采用序贯法先进行预实验确定止咳有效剂量,再取10个广西不同产地对叶百部总生物碱作用于不同组别的小鼠,求得各组的EDT50... 目的:采用序贯法研究广西不同产地对叶百部总生物碱止咳作用,为对叶百部品质评价以及临床用药提供理论依据。方法:采用序贯法先进行预实验确定止咳有效剂量,再取10个广西不同产地对叶百部总生物碱作用于不同组别的小鼠,求得各组的EDT50,依次定量判断其止咳活性。结果:不同组别的小鼠EDT50均较空白组有所延长,广西不同产地对叶百部总生物碱均能延长氨水引咳时间(R值>100%),6.9g生药/kg为止咳有效剂量,平均R值为138.8%。结论:广西各产地对叶百部总生物碱均具有止咳作用,而恭城、凤山、靖西产地效果较好。 展开更多

关键词 对叶百部 总生物碱 止咳作用 不同产地 序贯法

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基于JAK2/STAT3信号通路探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响 被引量：1

6

作者 杨雅钧 许立拔 +2 位作者 王孝勋 黄珍 黎燕兰 《广西医学》 CAS 2023年第11期1305-1309,1325,共6页

目的基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路,探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响。方法将人结肠癌HT-29细胞分为55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组进行实验,另设仅添加培养基的空白组... 目的基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路,探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响。方法将人结肠癌HT-29细胞分为55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组进行实验,另设仅添加培养基的空白组(含细胞)。除空白组外,其他组给予相应浓度的对叶百部总生物碱进行干预。干预24 h、48 h、72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝法检测各组细胞增殖抑制率;干预48 h后,采用Hoechst 33258染色法观察各组细胞凋亡情况,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用Western blot检测各组细胞JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达水平。结果与空白组比较,各浓度组细胞增殖抑制率增加;经Hoechst 33258染色后在各浓度组中可观察到典型的细胞凋亡形态改变,凋亡细胞数及细胞凋亡率均增加(均P<0.05);流式细胞术检测结果显示150μg/mL组和250μg/mL组细胞凋亡率增加(均P<0.05)。与空白组比较,各浓度组的p-JAK2蛋白和p-STAT3蛋白表达水平均下调(均P<0.05)。55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组的细胞增殖抑制率、凋亡细胞数及细胞凋亡率依次增加,p-JAK2蛋白和p-STAT3蛋白表达水平依次降低(均P<0.05)。结论对叶百部总生物碱可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的活化,来抑制人结肠癌HT-29细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 结肠癌 HT-29细胞 对叶百部 总生物碱 细胞凋亡 细胞增殖 Janus激酶2/信号转导及转录激活因子3信号通路

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对叶百部药材中四种主要生物碱的分布规律 被引量：4

7

作者 冯天龙 黄灵芳 +1 位作者 许翔鸿 张勉 《中国野生植物资源》 2018年第3期42-47,共6页

目的:了解百部药材中主要生物碱的含量和分布规律,为百部药材的质量控制提供依据。方法:采用反向HPLC-ELSD方法对百部药材中4种主要生物碱金刚大碱、百部新碱、新对叶百部碱和对叶百部碱的含量就行了测定,以0.1%三乙胺-甲醇(43∶57)为... 目的:了解百部药材中主要生物碱的含量和分布规律,为百部药材的质量控制提供依据。方法:采用反向HPLC-ELSD方法对百部药材中4种主要生物碱金刚大碱、百部新碱、新对叶百部碱和对叶百部碱的含量就行了测定,以0.1%三乙胺-甲醇(43∶57)为流动相,Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流速1m L/min;ELSD漂移管温度为80℃,氮气流速为2.1 m L/min,增益为8。结果:83批百部药材含金刚大碱、百部新碱、新对叶百部碱和对叶百部碱的药材分别有27、48、22和48批,其平均含量分别为1.98、4.75、3.73和5.34 mg/g;含有1~4种生物碱的药材分别有38、28、17和0批次,其中对叶百部碱与其余三种生物碱中任意一种同时出现的概率较高;购于安徽亳州和广州清平药市的药材不含新对叶百部碱。结论:本文建立的含量测定方法简便、准确、可靠;含量测定结果说明4种生物碱在药材中的分布具有趋单性,仅含一种生物碱的药材占45.8%,含2种及以上生物碱的药材占54.2%。本文研究结果对于对照品短缺情况下,对购买百部药材化学成分的预测具有一定的指导意义。 展开更多

关键词 对叶百部 生物碱 HPLC-ELSD 含量测定 分布规律

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对叶百部总生物碱对CHL细胞活性的影响

8

作者 梁月铭 韦卫宁 +1 位作者 何石燕 王孝勋 《壮瑶药研究》 2023年第1期192-194,共3页

目的:探讨对叶百部总生物碱对中国仓鼠肺细胞CHL活性的影响。方法:以对叶百部总生物碱为指标成分,通过采用MTT比色法检测不同的含药浓度(10μg/mL、22μg/mL、50μg/mL、112μg/mL、250μg/mL)对CHL细胞存活的影响。结果:MTT比色法检测... 目的:探讨对叶百部总生物碱对中国仓鼠肺细胞CHL活性的影响。方法:以对叶百部总生物碱为指标成分,通过采用MTT比色法检测不同的含药浓度(10μg/mL、22μg/mL、50μg/mL、112μg/mL、250μg/mL)对CHL细胞存活的影响。结果:MTT比色法检测,在不同药液浓度(10μg/mL、22μg/mL、50μg/mL、112μg/mL、250μg/mL)干预CHL细胞24 h后,与空白组比较,对叶百部总生物碱250μg/mL及以下药液浓度对存活率均无显著差异(P>0.05),说明对叶百部总生物碱浓度在250μg/mL及以下对CHL细胞无明显毒性作用。结论:在本实验条件下,对叶百部总生物碱(10~250μg/mL)对中国仓鼠肺细胞株CHL细胞无明显的细胞毒性作用。 展开更多

关键词 对叶百部总生物碱 CHL细胞 活性

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对叶百部总生物碱抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用机制

9

作者 林思 秦慧真 +3 位作者 许立拔 龙莉 朱华 王孝勋 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第22期71-78,共8页

目的:观察对叶百部总生物碱对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以非小细胞肺癌NCI-H460细胞作为研究对象,设置空白组和对叶百部总生物碱组(50、100、150、200、250 mg·L^(-1))。通过噻唑... 目的:观察对叶百部总生物碱对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以非小细胞肺癌NCI-H460细胞作为研究对象,设置空白组和对叶百部总生物碱组(50、100、150、200、250 mg·L^(-1))。通过噻唑蓝(MTT)比色法和平板克隆形成实验观察对叶百部总生物碱对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响;Hoechst33258染色法和流式细胞术观察细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测对叶百部总生物碱对胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测对叶百部总生物碱对Caspase-3、Bax、Bcl-2、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化(p)-Akt、EGFR、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及p-p38 MAPK蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,对叶百部总生物碱组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01);细胞克隆形成数目和克隆形成率明显降低(P<0.05,P<0.01);细胞核固缩、细胞质凝聚及细胞凋亡率显著增加(P<0.01);对叶百部总生物碱组(100、150、200、250 mg·L^(-1))Caspase-3 mRNA表达明显升高(P<0.05);对叶百部总生物碱组Bax mRNA表达显著升高(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达显著降低(P<0.01);对叶百部总生物碱组(100、150、200、250 mg·L^(-1))EGFR mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01);对叶百部总生物碱组(100、150、200、250 mg·L^(-1))Caspase-3、p-JNK蛋白表达显著上调(P<0.01);对叶百部总生物碱组Bax、p-p38 MAPK蛋白表达显著上调(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01);对叶百部总生物碱组(100、150、200、250 mg·L^(-1))EGFR、p-Akt蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论:对叶百部总生物碱可抑制人非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖,并能诱导其凋亡,其机制可能与抑制EGFR蛋白的表达和Akt蛋白的磷酸化及激活JNK/p38 MAPK信号通路� 展开更多

关键词 对叶百部总生物碱 非小细胞肺癌 NCI-H460细胞 凋亡 表皮生长因子(EGFR) 蛋白激酶B(Akt) c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路

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百部总生物碱含量测定方法的研究 被引量：3

10

作者 高卫东 高英 李卫民 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2007年第B05期124-126,共3页

分别运用酸碱滴定法和雷氏盐吸收系数法对百部中总生物碱的含量进行了测定，并加以比较。结果表明：雷氏盐吸收系数法的测定结果比酸碱滴定法的测定结果稍高，提取步骤少，操作简单，更能最大限度的减少干扰因素的影响，方法学考察均符... 分别运用酸碱滴定法和雷氏盐吸收系数法对百部中总生物碱的含量进行了测定，并加以比较。结果表明：雷氏盐吸收系数法的测定结果比酸碱滴定法的测定结果稍高，提取步骤少，操作简单，更能最大限度的减少干扰因素的影响，方法学考察均符合规定，可以用来测定百部总碱的含量． 展开更多

关键词 百部 总生物碱 酸碱滴定法 雷氏盐比色法

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对叶百部总生物碱的血清药物化学研究 被引量：3

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作者 吴思宇 罗点 +2 位作者 王孝勋 杨丹丹 郝二伟 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第5期1138-1142,共5页

目的:对对叶百部总生物碱的血清药物化学进行研究,探讨对叶百部总生物碱在体内的药效物质基础。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS和MetaboLynx分析方法,通过比对对叶百部总生物碱、含药血清、空白血清的差异图谱,根据液质所提供的保留时间、精确... 目的:对对叶百部总生物碱的血清药物化学进行研究,探讨对叶百部总生物碱在体内的药效物质基础。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS和MetaboLynx分析方法,通过比对对叶百部总生物碱、含药血清、空白血清的差异图谱,根据液质所提供的保留时间、精确相对分子质量以及与对照品的比较,判定口服对叶百部总生物碱大鼠体内的入血成分。结果:口服对叶百部总生物碱后,从血清中检测出15个化学成分,均为新对叶百部碱开环衍生物和Ineotuberostemonol的代谢产物。结论:这些入血成分最有可能是对叶百部总生物碱在体内直接作用的物质,有助于阐明其药效物质基础和作用机制。 展开更多

关键词 对叶百部 总生物碱 血清药物化学 液质分析

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滇产对叶百部中一个新的百部生物碱(英文) 被引量：2

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作者 郭婕 何红平 +2 位作者 李顺林 华会明 郝小江 《云南植物研究》 CSCD 北大核心 2010年第5期463-465,共3页

从对叶百部(Stemona tuberosa)根的乙醇提取物中分离鉴定1个新的百部生物碱,命名为去氢异滇百部碱(1),以及1个已知化合物:异滇百部碱(2)。它们的化学结构通过现代波谱解析得以鉴定。

关键词 对叶百部 百部生物碱 去氢异滇百部碱

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