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神经干细胞与乳鼠基底膜共培养后分化为毛细胞样细胞的研究 被引量:3
1
作者 陈请国 付勇 +4 位作者 王显红 吴小慧 谢静 李哲文 龚树生 《中华耳科学杂志》 CSCD 2008年第2期216-220,共5页
目的探讨体外培养和鉴定胚胎大鼠神经干细胞及诱导其分化为毛细胞样细胞。方法从SD系胚鼠大脑分离神经干细胞,在无血清培养基中培养。取乳鼠基底膜与神经干细胞一起培养,14~21天后通过免疫荧光和免疫组化法检测毛细胞标志物myosin VIIa... 目的探讨体外培养和鉴定胚胎大鼠神经干细胞及诱导其分化为毛细胞样细胞。方法从SD系胚鼠大脑分离神经干细胞,在无血清培养基中培养。取乳鼠基底膜与神经干细胞一起培养,14~21天后通过免疫荧光和免疫组化法检测毛细胞标志物myosin VIIa和calretinin。结果培养的神经干细胞胞体透亮,折光性好,Nestin鉴定阳性。诱导分化后的细胞免疫荧光和免疫组化示myosin VIIa和calretinin阳性。结论无血清条件下能培养出活性很好的神经干细胞,乳鼠基底膜能引导其朝毛细胞方向分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 基底膜 分化 毛细胞样细胞.
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胰腺干细胞样细胞在胰腺内分泌肿瘤组织发生中的作用 被引量:3
2
作者 吴宁 金晓龙 肖家诚 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期265-266,共2页
对 12例胰腺内分泌肿瘤进行光镜、电镜观察和免疫组化研究 ,所有肿瘤均观察到胰腺干细胞样细胞 。
关键词 胰腺 干细胞样细胞 内分泌肿瘤 组织发生 超微结构 免疫组织化学
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二甲双胍联合索拉非尼对HepG2干细胞样细胞增殖的影响 被引量:1
3
作者 宣杨 汪瑞辰 《肿瘤药学》 CAS 2019年第2期212-218,共7页
目的探讨二甲双胍联合索拉非尼对HepG2干细胞样细胞增殖的影响。方法采用无血清干细胞富集培养基对人肝癌细胞系HepG2细胞进行富集培养,获得干细胞样细胞悬浮球,观察记录悬浮球生长过程中的形态变化,测量直径并计算数目。将HepG2干细胞... 目的探讨二甲双胍联合索拉非尼对HepG2干细胞样细胞增殖的影响。方法采用无血清干细胞富集培养基对人肝癌细胞系HepG2细胞进行富集培养,获得干细胞样细胞悬浮球,观察记录悬浮球生长过程中的形态变化,测量直径并计算数目。将HepG2干细胞样细胞和HepG2细胞接种于软琼脂胶中,比较两组细胞的克隆形成能力。分别采用不同浓度的索拉非尼处理HepG2干细胞样细胞及HepG2细胞24、48、72 h,选择最佳药物作用时间。分别将浓度为1、3、5 mM的二甲双胍+5μM索拉非尼联合作用于HepG2干细胞样细胞,CCK8法检测细胞增殖活性,比较联合用药组与索拉非尼单独用药组HepG2干细胞样细胞增殖抑制率和细胞悬浮球直径。结果二甲双胍联合索拉非尼对HepG2干细胞样细胞作用的最佳时间为48 h。不同浓度联合用药与单独用药48 h后细胞增殖抑制率和悬浮球直径的差异均具有统计学意义(P<0.05)。浓度分别为3 mM和5 mM联合用药组作用48 h后细胞增殖抑制率更高(P<0.05),细胞悬浮球直径更小(P<0.05)。结论二甲双胍联合索拉非尼能够抑制HepG2干细胞样细胞的增殖,提高其对索拉非尼的敏感性,为临床上二甲双胍联合索拉非尼治疗肝癌提供科学理论依据。 展开更多
关键词 二甲双胍 索拉非尼 联合用药 干细胞 增殖
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川芎和丹参对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞血管内皮生长因子表达的影响 被引量:6
4
作者 李蒙 刘槟 +1 位作者 燕晓茹 张培彤 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期446-450,共5页
目的:观察川芎和丹参以及两药配伍后对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞(CSLCs)血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用无血清成球培养法分离A549 CSLCs,建立常氧组和乏氧组A549 CSLCs荷瘤小鼠模型,分为对照组、川芎组、丹参组、川... 目的:观察川芎和丹参以及两药配伍后对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞(CSLCs)血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用无血清成球培养法分离A549 CSLCs,建立常氧组和乏氧组A549 CSLCs荷瘤小鼠模型,分为对照组、川芎组、丹参组、川丹组及恩度组,ELISA法和RT-PCR法检测各组VEGF蛋白及mRNA的表达。结果:小鼠移植瘤形成实验发现A549球细胞较原代A549细胞更早成瘤,且成瘤率更高。ELISA法和RT-PCR法结果均显示,在常氧环境下,与对照组比较,川芎组、丹参组、川丹组和恩度组均显著抑制VEGF蛋白及mRNA的表达(P<0.01);在乏氧环境下,各组之间对VEGF蛋白及mRNA表达差异无统计学意义;与常氧组比较,乏氧环境下各组VEGF表达普遍增高。结论:无血清培养法分离富集的球细胞具有干细胞样细胞的干性,常氧环境下各给药组均抑制VEGF的表达;与常氧相比,乏氧环境各组VEGF表达普遍增高,这可能与乏氧本身作为信号促进VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 川芎 丹参 肺癌干细胞样细胞 氧环境 血管内皮生长因子 活血化瘀中药 无血清成球培养法 肿瘤干细胞
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鼻咽癌细胞株CNE-2Z中肿瘤干细胞样细胞的悬浮培养与鉴定 被引量:5
5
作者 肖调立 田道法 +3 位作者 何迎春 刘湘 范婧莹 YANG PC 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2013年第1期16-21,共6页
目的探讨鼻咽癌细胞株CNE 2Z中肿瘤干细胞样细胞的富集与鉴定方法。方法鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞普通培养至对数生长期,不同密度细胞分别加入无血清培养液中继续培养,制备第9天无血清培养细胞爬片,CD133和CD44克隆抗体免疫组化染色,电镜... 目的探讨鼻咽癌细胞株CNE 2Z中肿瘤干细胞样细胞的富集与鉴定方法。方法鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞普通培养至对数生长期,不同密度细胞分别加入无血清培养液中继续培养,制备第9天无血清培养细胞爬片,CD133和CD44克隆抗体免疫组化染色,电镜观察超微结构。结果无血清悬浮培养至第9天时,以1×10~5/m1细胞密度组活细胞比率最高;普通培养细胞爬片的CD133和CD44细胞强阳性率分别是2.71%和3.00%,而无血清培养细胞爬片的CD133和CD44强阳性率分别为66.7%和67.00%(P<0.01),表现正相关(P<0.01);扫描电镜和透射电镜观察显示,阳性细胞表现特殊的超微结构特点。结论无血清悬浮培养法可富集鼻咽癌细胞中的肿瘤干细胞样细胞,CD133和CD44可作为其特异性表面标志物。 展开更多
关键词 鼻咽癌 肿瘤干细胞样细胞 悬浮培养法 细胞鉴定
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CD4^+CD25^+调节性T细胞对乳腺癌细胞上皮间质转化和ALDH1^+干样细胞的影响 被引量:5
6
作者 孙立平 刘军 +1 位作者 金昊 李慧 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期177-182,共6页
目的:研究CD4^+CD25^+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)对乳腺癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、细胞迁移侵袭能力,及ALDH1^+干样细胞比例的影响。方法:采用免疫磁珠法分离乳腺癌患者外周血中CD4^+CD2... 目的:研究CD4^+CD25^+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)对乳腺癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、细胞迁移侵袭能力,及ALDH1^+干样细胞比例的影响。方法:采用免疫磁珠法分离乳腺癌患者外周血中CD4^+CD25^+Tregs,CD4^+CD25^+Tregs与乳腺癌BT474、MCF-7细胞系共培养(共培养组),BT474、MCF-7单独培养(对照组)。检测共培养组和对照组乳腺癌细胞EMT相关标志物表达的变化,及细胞迁移和侵袭能力的变化。此外,检测BT474细胞中ALDH1^+干样细胞、微球形成能力和自我更新能力的变化。结果:CD4^+CD25^+Tregs诱导BT474和MCF-7细胞间质性标志物表达增高,诱导MCF-7细胞上皮性标志物E-cadherin表达降低。CD4^+CD25^+Tregs诱导BT474和MCF-7细胞迁移和侵袭能力上调。共培养组BT474细胞中ALDH1^+干样细胞比例、微球体形成能力、自我更新能力较对照组增强。结论:CD4^+CD25^+Tregs可诱导乳腺癌细胞发生EMT,增强细胞体外迁移和侵袭能力,同时促进ALDH1^+干样细胞增加。 展开更多
关键词 调节性T细胞乳腺癌上皮间质转化ALDH1+干样细胞
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大鼠角膜缘干细胞分离培养及其横向分化能力初探 被引量:4
7
作者 严会文 陈剑英 +3 位作者 高杰 廖文萍 苏敏 胡蓉 《局解手术学杂志》 2016年第4期248-251,共4页
目的体外分离培养大鼠角膜缘干细胞(LSCs),并探讨在细胞因子EGF、b FGF联合RA作用下,LSCs体外横向分化为神经干细胞样细胞的能力。方法体外分离培养LSCs并进行p63免疫组化鉴定。在原代培养的LSCs中,设立2个诱导组进行分化实验,诱导组1加... 目的体外分离培养大鼠角膜缘干细胞(LSCs),并探讨在细胞因子EGF、b FGF联合RA作用下,LSCs体外横向分化为神经干细胞样细胞的能力。方法体外分离培养LSCs并进行p63免疫组化鉴定。在原代培养的LSCs中,设立2个诱导组进行分化实验,诱导组1加入EGF(20 ng/mL)和b FGF(10 ng/mL),诱导组2加入EGF(20 ng/mL)、b FGF(10 ng/mL)和RA(25 ng/mL),同时设立空白对照组。培养7 d后,收集各组细胞作神经元标志物Nestin的免疫组化检测及阳性细胞计数,收集各组细胞蛋白做蛋白免疫印迹分析各组Nestin蛋白表达情况,相关数据作统计学分析。结果免疫组化结果显示,体外分离培养的LSCs p63呈阳性,诱导分化的2组细胞Nestin呈阳性表达,阳性率分别为(77.01±6.32)%和(84.01±5.43)%,诱导组2的诱导率高于诱导组1,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组细胞Nestin呈阴性表达。蛋白免疫印迹结果显示,2个诱导组在240 k Da处可见Nestin蛋白条带,诱导组2 Nestin蛋白表达略高于诱导组1,对照组未见Nestin蛋白条带。结论成功分离培养大鼠LSCs,在细胞因子EGF、b FGF作用下,LSCs具有横向分化为神经干细胞样细胞的能力,同时联合使用RA有促进LSCs向神经干细胞样细胞分化的作用。 展开更多
关键词 大鼠角膜缘干细胞 神经干细胞样细胞 表皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 全反式维甲酸
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小鼠诱导多能干细胞向雄性生殖细胞样细胞诱导分化的研究
8
作者 赵振理 胡少华 +4 位作者 万智盛 卜威振 陈松强 韩天红 陆毅群 《临床医药实践》 2023年第10期748-751,共4页
目的:对小鼠诱导多能干细胞向原始生殖细胞样细胞进行诱导培养,并对获得的原始生殖细胞样细胞进行鉴定。方法:在诱导干细胞培养基中对小鼠诱导多能干细胞进行培养,用蛋白质印迹法(Western blot)对Oct-4及C-kit蛋白表达水平进行鉴定,用... 目的:对小鼠诱导多能干细胞向原始生殖细胞样细胞进行诱导培养,并对获得的原始生殖细胞样细胞进行鉴定。方法:在诱导干细胞培养基中对小鼠诱导多能干细胞进行培养,用蛋白质印迹法(Western blot)对Oct-4及C-kit蛋白表达水平进行鉴定,用定时定量PCR对Mvh,Fragilis,Stella的mRNA水平进行鉴定。结果:由小鼠诱导多能干细胞体外诱导分化获得的原始生殖细胞样细胞特异性表达Oct-4蛋白、C-kit蛋白以及Mv hmRNA,Fragilis RNA,Stella RNA。结论:由小鼠诱导多能干细胞成功诱导培养出原始生殖细胞样细胞,为进一步研究其向精子细胞的转化奠定了较好的基础。 展开更多
关键词 诱导多能干细胞 原始生殖细胞样细胞 无精症 诱导培养
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S100 protein expression during induced Schwann cell-like cell differentiation of rat bone marrow mesenchymal cells in vitro 被引量:1
9
作者 Wenting Li Zenglu Xu +1 位作者 Fei Ding Xiaosong Gu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2010年第3期178-184,共7页
BACKGROUND: S100 protein can promote axonal growth. Therefore, transplantation of induced bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) that can secrete S100 may provide a beneficial microenvironment for neural... BACKGROUND: S100 protein can promote axonal growth. Therefore, transplantation of induced bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) that can secrete S100 may provide a beneficial microenvironment for neural regeneration. OBJECTIVE: To explore the changes in S100 expression during rat MSCs differentiation into Schwann ceils in vitro. DESIGN, TIME AND SETTING: This cytology experiment was performed at the Jiangsu Key Laboratory of Neuroregeneration, Nantong University in China, from January 2006 to May 2007. MATERIALS: The rabbit anti-S100 polyclonal antibody was purchased from Dako, Denmark; the mouse anti-rat S100 monoclonal antibody was purchased from Sigma, USA. METHODS: MSCs were cultured from adult Sprague-Dawley rat femur and tibia. Cell proliferation was determined by the MTT method and CD markers, and cell cycle was measured by flow cytometry. MSCs were induced to differentiate into SC cells. SC cells were stained for S100 protein, glial fibrillary acidic protein, and low-affinity nerve growth factor receptor. S100 protein and mRNA levels were evaluated by flow cytometry, Western blot, and reverse transcription-polymerase chain reaction. MAIN OUTCOME MEASURES: S100 protein and mRNA expression. RESULTS: MSCs exhibited high amplification potential over eight passages. Prior to induction, the majority of MSCs were at the G0/G1 phase of the cell cycle. After induction, MSCs displayed morphology changes similar to Schwann cells. Moreover, induction increased S100 mRNA levels. Immunofluorescence showed that MSCs expressed S100 protein, glial fibrillary acidic protein, and low-affinity nerve growth factor receptor at 7 days of induction. Induction also increased S100 protein levels compared with untreated MSCs. CONCLUSION: MSCs are capable of differentiating into Schwann cells-like cells under conditional induction in vitro, with increasing S100 mRNA and protein expression. 展开更多
关键词 bone marrow mesenchymal stem cells INDUCTION Schwann cell-like cells S100 protein in vitro stem cells neural regeneration
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不同氧环境下川芎和丹参对肺癌干细胞样细胞血管生成拟态的作用 被引量:4
10
作者 李蒙 刘槟 +1 位作者 燕晓茹 张培彤 《辽宁中医杂志》 CAS 2021年第3期151-154,I0006,I0007,共6页
目的观察川芎和丹参以及两药配伍后对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞(CSLCs)血管生成拟态(VM)的影响。方法采用无血清成球培养法分离A549CSLCs亚群,建立A549 CSLCs荷瘤小鼠模型,分为常氧组和乏氧组,每组进一步分为对照组、川芎组、丹参... 目的观察川芎和丹参以及两药配伍后对不同氧环境下肺癌干细胞样细胞(CSLCs)血管生成拟态(VM)的影响。方法采用无血清成球培养法分离A549CSLCs亚群,建立A549 CSLCs荷瘤小鼠模型,分为常氧组和乏氧组,每组进一步分为对照组、川芎组、丹参组、川芎和丹参(川丹)组以及恩度组,通过CD31/PAS双染法检测各组VM形成。结果(1)单细胞克隆形成实验显示A549球细胞形成的单个克隆灶的细胞数目明显多于其亲代细胞,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示,分别在6 h、12 h和24 h A549球细胞均比其原代细胞有更强的细胞迁移能力(P<0.01)。(2)CD31/PAS双染法结果显示,常氧环境和乏氧环境下,川芎组、丹参组、川丹组和恩度组较对照组VM的数量均明显减少(P<0.01),不同氧环境比较,各组之间差异无统计学意义。结论(1)无血清培养法分离富集的球细胞具有干细胞样细胞的干性。(2)常氧和乏氧环境下川芎、丹参以及两者配伍均能抑制VM的形成,然而,无论常氧还是乏氧环境,川芎和丹参配伍对抑制VM的形成协同作用不明显。 展开更多
关键词 川芎和丹参 肺癌干细胞样细胞 不同氧环境 血管生成拟态
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IGF信号轴在卵巢癌干细胞样细胞增殖状态转换及预防卵巢癌复发中的作用 被引量:2
11
作者 郭欣 张科科 +2 位作者 刘燕 徐慧 蔡云朗 《东南大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第5期736-741,共6页
目的:探究胰岛素样生长因子(IGF)信号轴在促进卵巢癌干细胞样细胞增殖和抗凋亡中的作用,探讨基于IGF信号轴的IGF-1R抑制剂的靶向治疗和寻求降低卵巢癌化疗后复发的可能途径。方法:采用CD117+CD44+A2780卵巢癌细胞株,使用免疫细胞化学的... 目的:探究胰岛素样生长因子(IGF)信号轴在促进卵巢癌干细胞样细胞增殖和抗凋亡中的作用,探讨基于IGF信号轴的IGF-1R抑制剂的靶向治疗和寻求降低卵巢癌化疗后复发的可能途径。方法:采用CD117+CD44+A2780卵巢癌细胞株,使用免疫细胞化学的方法检测IGF信号轴中IGF-1、IGF-2和IGF-1R在CD117+CD44+A2780细胞中的表达;利用MTT法检测IGF-1对CD117+CD44+A2780细胞的促增殖活性,配制IGF-1的质量浓度分别为10、25、40、55 ng·ml-1,另设空白对照,从中筛选出加入外源IGF-1的适宜质量浓度用于后续实验中;再将实验分为3组,即IGF-1刺激组、NVP抑制组和空白组。通过流式细胞术检测3组细胞在药物处理48 h后的细胞周期分布和凋亡率情况。结果:IGF信号轴组件IGF-1、IGF-2和IGF-1R均表达在CD117+CD44+A2780细胞的细胞膜上和细胞质中;MTT检测发现当外源IGF-1质量浓度为40 ng·ml-1时对CD117+CD44+A2780细胞的促分裂增殖作用最明显;IGF-1刺激组较空白组增殖明显活跃,凋亡率降低(P<0.05);NVP抑制组较空白组增殖明显减少,凋亡率增高(P<0.05)。结论:IGF信号轴与卵巢癌化疗后的复发密切相关,IGF-1在卵巢癌干细胞样细胞转换增殖状态和对抗凋亡中发挥着重要作用;NVP阻断IGF-1R的作用可有效抑制卵巢癌干细胞样细胞从休眠状态启动分裂增殖;IGF信号轴组件可作为卵巢癌治疗及化疗后预防复发的靶点。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子-1受体 NVP-AEW541 卵巢癌干细胞样细胞
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转录因子配对盒基因6对骨髓间充干细胞向角膜缘干细胞样细胞分化的影响
12
作者 吴霜 邹星星 +2 位作者 高杰 胡蓉 苏敏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第24期3858-3864,共7页
背景:角膜病移植手术面临着角膜供者严重缺乏、术后发生免疫排异反应等诸多问题。在大力倡导角膜捐献的同时,急需找到一种新的替代性的治疗手段。目的:通过优化骨髓间充质干细胞培养条件,探讨转录因子配对盒基因6对骨髓间充质干细胞向... 背景:角膜病移植手术面临着角膜供者严重缺乏、术后发生免疫排异反应等诸多问题。在大力倡导角膜捐献的同时,急需找到一种新的替代性的治疗手段。目的:通过优化骨髓间充质干细胞培养条件,探讨转录因子配对盒基因6对骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞样细胞分化的影响。方法:根据细胞形态、成骨成脂分化能力、细胞表面抗原表达鉴定骨髓间充质干细胞及过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞。按照培养细胞和培养基不同进行分组:对照组(骨髓间充质干细胞+完全培养基)、实验组A(骨髓间充质干细胞+条件培养基)、实验组B(骨髓间充质干细胞+条件培养基+细胞因子)、实验组C(过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞+条件培养基+细胞因子)。诱导5,10 d时采用免疫荧光、流式细胞术检测p63、k14和k12的表达,流式细胞术检测细胞增殖指标Ki-67的表达和细胞凋亡率,Western blot法和RT-PCR法检测配对盒基因6的蛋白和mRNA表达。结果与结论:①诱导培养前,两组细胞均具有骨髓间充质干细胞的特性。②诱导培养后,均出现球型或卵圆形的细胞,呈悬浮生长。4组细胞的角膜缘干细胞样细胞特异性分子p63、k14表达阳性,实验组荧光表达量高于对照组(P<0.05),而角膜上皮分子k12表达阴性。随着培养条件的优化,实验组C的细胞增殖更明显,凋亡细胞更少。诱导5 d时,实验各组配对盒基因6的蛋白及mRNA表达量呈递增变化。③结果表明,条件培养基联合细胞因子诱导可加快骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞样细胞分化。过表达配对盒基因6的骨髓间充质干细胞向角膜缘干细胞样细胞定向分化的速度和比例更具有优越性,且其能促进细胞增殖、抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓间充干细胞 角膜缘干细胞 配对盒基因6 细胞因子 条件培养基
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肝癌Huh7干细胞样细胞的富集培养及鉴定 被引量:2
13
作者 张涛 李东 +8 位作者 漆仲春 彭晶晶 陈滔 谭勇 周进军 许涛 付曾强 刘煜 李华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期690-695,共6页
目的:建立一种体外有效富集、培养和鉴定具有肝癌于细胞特征的细胞亚群的方法。方法:采用成球培养法利用肿瘤干细胞样细胞(cancerstemcell,CSC)分化培养基对肝癌Huh7细胞进行富集培养,获得的干细胞样细胞于体外进一步扩增获得肝... 目的:建立一种体外有效富集、培养和鉴定具有肝癌于细胞特征的细胞亚群的方法。方法:采用成球培养法利用肿瘤干细胞样细胞(cancerstemcell,CSC)分化培养基对肝癌Huh7细胞进行富集培养,获得的干细胞样细胞于体外进一步扩增获得肝癌干细胞球。流式细胞术检On,0Huh7干细胞样细胞表面肿瘤干细胞标志物EpCAM、CD90和CDl33的表达,平板克隆集落形成实验和裸鼠成瘤实验分别检测Huh7细胞和Huh7干细胞样细胞的克隆集落形成能力、体内成瘤能力。结果:Huh7细胞成球培养3~7d后即可形成肝癌干细胞样细胞球,获得的干细胞样细胞具有自我更新和增殖能力,其EpCAM阳性细胞比例较Huh7细胞明显增加[(99.6%±0.31)%猫(0.12%±O.05)%,P〈0.01],但两种细胞CD90[(0.11%±0.06)%US(0.09%±0.07)%,P〉0.05]和CDl33[(0.17%±0.08)%椰(0.15%±0.05)%,P〉0.05l表达差异无统计学意义。Huh7干细胞样细胞克隆集落形成数量明显多于Huh7细胞[(188.67±12.5)协(79±16.7)个,P〈0.01];当接种量为5X10^4个细胞时,与接种Huh7细胞的对照裸鼠相比,接种Huh'/干细胞样细胞的裸鼠成瘤时间更短(1I”s30d),成瘤率更高(100%郴16.67%);接种5×10’数量级的细胞时,实验组成瘤体积[(171.90±10.94)伽(86.39±11.21)mm^3P〈0.01]和瘤体质量[(2.984±0.82)vs(0.324±0.17)g,P〈0.01]均明显大于对照组。结论:利用成球培养法能够从Huh7肝癌细胞系中富集培养获得Huh7肝癌干细胞,其具有比Huh7细胞更强的成瘤能力。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤干细胞样细胞 Huh7细胞系 富集 培养
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外周造血干细胞转化为肝样干细胞的研究 被引量:1
14
作者 韩亚民 殷舞 +3 位作者 莫明峥 李雷 蓝梅 钟晓刚 《中国临床新医学》 2018年第10期961-965,共5页
目的探讨外周血造血干细胞在体外转化为肝样干细胞的诱导条件。方法选取自愿行造血干细胞移植符合入选标准患者,用血细胞分离机采集经粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocytecolony stimulating factor,G-CSF)+化疗药物动员... 目的探讨外周血造血干细胞在体外转化为肝样干细胞的诱导条件。方法选取自愿行造血干细胞移植符合入选标准患者,用血细胞分离机采集经粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocytecolony stimulating factor,G-CSF)+化疗药物动员后患者的外周血单个核细胞,通过流式细胞仪及免疫磁珠法筛选出CD34+的单个核细胞。将CD34+的单个核细胞分为对照组、肝细胞生长因子(hepatic growth factor,HGF)组、成纤维细胞生长因子4(fibroblast growth factor,FGF4)组、FGF4+HGF组、HGF+FGF4+巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,MCSF)组。动态观察细胞形态学变化,15 d后免疫细胞化学检测Oct4、ALB、AFP、c-Kit、CK19及CD34在各组细胞中的表达。结果 HGF+FGF4+MCSF组:见大量类圆形细胞,贴壁生长,核仁明显,核质比例大,部分细胞串珠样生长; FGF4+HGF组:见少量类圆形细胞,余细胞形变明显;对照组、HGF组、FGF4组:仅个别细胞呈类圆形,大部分死亡。HGF+FGF4+MCSF组:Oct4、c-Kit、CK19、CD34阳性表达,AFP弱阳性,ALB阴性; FGF4+HGF组:细胞AFP、ALB阳性表达,CK19、CD34弱阳性表达,Oct4、c-Kit阴性;对照组、HGF组、FGF4组:检测指标均无表达。结论经HGF、FGF4及MCSF联合诱导后的外周血CD34+单个核细胞更易转化为肝样干细胞。 展开更多
关键词 外周血干细胞 肝样干细胞 诱导分化
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Tbx3在膀胱癌中的表达及其对肿瘤干细胞样细胞的影响 被引量:1
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作者 杜红飞 庞雪利 +2 位作者 阳燕 周晓萍 许颖 《四川医学》 CAS 2021年第4期342-345,共4页
目的研究Tbx3在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌干细胞样细胞的影响。方法利用免疫组化方法检测膀胱癌组织和癌旁组织中Tbx3蛋白水平的表达,并分析Tbx3的表达与膀胱癌临床病理参数的关系;实时荧光定量PCR方法检测Tbx3在正常膀胱上皮细胞... 目的研究Tbx3在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌干细胞样细胞的影响。方法利用免疫组化方法检测膀胱癌组织和癌旁组织中Tbx3蛋白水平的表达,并分析Tbx3的表达与膀胱癌临床病理参数的关系;实时荧光定量PCR方法检测Tbx3在正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,T24细胞及膀胱癌干细胞样细胞中的表达;运用干扰质粒沉默Tbx3的表达,悬浮成球试验检测Tbx3对膀胱癌干细胞样细胞的成球能力的影响。结果 Tbx3在膀胱癌组织的表达明显高于膀胱癌旁组织,且Tbx3的高表达与膀胱癌的淋巴结转移具有相关性;K-M生存分析揭示,与Tbx3低表达组比较,Tbx3高表达组具有较低生存率。细胞水平试验结果显示,与正常细胞比较,Tbx3的mRNA水平高表达于T24细胞中(P<0.05),且高表达于膀胱癌干细胞样细胞;转染Tbx3干扰质粒后,膀胱癌干细胞样细胞的成球能力明显减低(P<0.05)。结论Tbx3高表达于膀胱癌组织中,对膀胱癌干细胞样细胞的形成有促进作用,可能为膀胱癌潜在的重要靶点。 展开更多
关键词 膀胱癌 Tbx3 膀胱癌干细胞样细胞
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小鼠精原干细胞与胚胎干细胞样细胞
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作者 王宝峰 谢松松 周宗瑶 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第17期3398-3400,共3页
近年来,通过培养小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)获得了胚胎干细胞样细胞(,embryonic stem cell-like cells,ES样细胞)。这些研究表明小鼠精原干细胞不仅具备特异分化为精子的干细胞潜能,而且具备胚胎干细胞(embryonic ... 近年来,通过培养小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)获得了胚胎干细胞样细胞(,embryonic stem cell-like cells,ES样细胞)。这些研究表明小鼠精原干细胞不仅具备特异分化为精子的干细胞潜能,而且具备胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)分化为三胚层的多向分化潜能。因此,这将有助于研究干细胞的分化调控机制,并且这些研究成果延伸至人类精原干细胞,也将为再生医学获取特殊的胚胎干细胞样细胞或特异分化的精子细胞开辟了蹊径。 展开更多
关键词 精原干细胞 胚胎干细胞样细胞 多向分化潜能
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基础培养液和小分子对猪类胚胎干细胞建系效率的影响
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作者 李妍 薛冰华 +3 位作者 张雪 赫义龙 伟人悦 刘忠华 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第5期621-629,共9页
猪是人类疾病模型的重要候选动物之一,建立真正的猪胚胎干细胞系将极大地推动该领域的进展。培养液和细胞信号通路是目前限制猪胚胎干细胞系建立的两个主要影响因素。该研究探索了基础培养液(KO-DMEM和DMEM/F12)和小分子(PD0325901和CHI... 猪是人类疾病模型的重要候选动物之一,建立真正的猪胚胎干细胞系将极大地推动该领域的进展。培养液和细胞信号通路是目前限制猪胚胎干细胞系建立的两个主要影响因素。该研究探索了基础培养液(KO-DMEM和DMEM/F12)和小分子(PD0325901和CHIR99021,简称2i)对猪类胚胎干细胞建系效率的影响。实验结果显示,发育至6 d的体外受精胚胎在KO-DMEM培养液中贴壁率和原代克隆形成率显著高于DMEM/F12培养液;添加2i后,两种培养液中的胚胎贴壁率和原代克隆形成率均下降。在KO-DMEM培养液中可获得稳定传代的细胞系,获得的细胞系呈碱性磷酸酶阳性,核型正常,表达Oct4、Sox2和Nanog,不表达Cdx2。细胞系可成功进行转基因操作。结果表明,以KO-DMEM为基础培养液的培养体系可以获得猪类胚胎干细胞,2i不利于胚胎贴壁和原代克隆形成。该研究为猪胚胎干细胞建系培养体系的选择及推断猪胚胎干细胞多能性细胞信号调控通路提供了重要的实验依据。 展开更多
关键词 类胚胎干细胞 基础培养液 小分子抑制剂
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血管内皮诱导培养基促进结肠癌细胞向血管内皮细胞方向分化的研究 被引量:3
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作者 李逸仙 孙保存 +4 位作者 刘志勇 赵秀兰 张艳辉 程润芬 齐丽莎 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期620-623,共4页
目的:探讨结肠癌细胞在血管内皮诱导环境下向血管内皮细胞方向分化的潜能。方法:将3种不同分化程度的结肠癌细胞HCT116、SW480和HT29分别置于含有内皮细胞诱导因子的条件培养基中培养15 d后,利用Western blot检测血管内皮特异性指标白... 目的:探讨结肠癌细胞在血管内皮诱导环境下向血管内皮细胞方向分化的潜能。方法:将3种不同分化程度的结肠癌细胞HCT116、SW480和HT29分别置于含有内皮细胞诱导因子的条件培养基中培养15 d后,利用Western blot检测血管内皮特异性指标白细胞分化抗原31(cluster of differentiation 31,CD31)和白细胞分化抗原34(cluster of differentiation 34,CD34)的表达变化;利用细胞免疫荧光检测HCT116细胞在内皮诱导培养基及普通培养基中CD31、CD34的表达变化;通过三维培养观察内皮诱导培养基对HCT116细胞体外成管能力的影响。结果:Western blot显示诱导培养15 d后的3种细胞中低分化HCT116细胞的CD31、CD34表达增强最明显,而中分化的SW480细胞和高分化的HT29变化不显著。细胞免疫荧光显示与普通培养基相比,内皮诱导培养基中HCT116细胞的CD31、CD34表达显著增强。体外三维培养发现经内皮诱导培养后的HCT116细胞较对照细胞成管能力显著增强。结论:血管内皮诱导培养基促进具有较强干细胞样特性的结肠癌细胞向血管内皮细胞方向分化。 展开更多
关键词 结肠癌 血管内皮细胞 诱导分化 干细胞样特性
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多能性干细胞向原始生殖细胞诱导分化的研究进展 被引量:1
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作者 马禹佳 孙博 孙莹璞 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期947-950,共4页
原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)是哺乳动物卵子与精子的前体细胞,在生殖系统早期发育过程中至关重要。配子生成障碍是辅助生殖技术面临的巨大挑战。由于伦理及技术受限,PGCs在人类胚胎中的起源及特化机制仍不清楚。多能性干... 原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)是哺乳动物卵子与精子的前体细胞,在生殖系统早期发育过程中至关重要。配子生成障碍是辅助生殖技术面临的巨大挑战。由于伦理及技术受限,PGCs在人类胚胎中的起源及特化机制仍不清楚。多能性干细胞体外培养技术的逐步建立与成熟,使体外诱导生成原始生殖细胞样细胞(primordial germ cell like cells,PGCLCs)并深入研究其发生发展机制成为可能,同时也为配子生成障碍的临床治疗带来了希望。本文将从PGCs的体内发生过程、多能性干细胞体外分化形成PGCLCs及其进而分化形成配子的主要诱导分化方案及特异性标记因子等相关研究进展进行综述。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 胚胎干细胞 诱导多能性干细胞 原始生殖细胞样细胞
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小鼠胚胎干细胞系的建立及向雌性生殖细胞诱导的研究 被引量:1
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作者 曾明 绳小艳 +5 位作者 叶孝颖 王玲玲 王华 周忠诚 赵强 刘林 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-7,共7页
胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能的两大特性.在体外产生功能性的配子需要模拟体内生殖细胞发育的多个步骤.而将胚胎干细胞诱导成生殖细胞对于生殖细胞特化的机制研究以及在辅助生殖领域的应用都有着重大的意义.建立了具有生殖系... 胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能的两大特性.在体外产生功能性的配子需要模拟体内生殖细胞发育的多个步骤.而将胚胎干细胞诱导成生殖细胞对于生殖细胞特化的机制研究以及在辅助生殖领域的应用都有着重大的意义.建立了具有生殖系转移能力的雌性胚胎干细胞系,并在体外将其定向分化成原始生殖细胞样细胞,这些原始生殖细胞样细胞在体内可以发生减数分裂,证明了诱导的生殖细胞具有功能性.建立一个有效的生殖细胞诱导的平台,为以后研究体外配子的发生打下了坚实的基础. 展开更多
关键词 雌性胚胎干细胞 原始生殖细胞样细胞 减数分裂
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