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静态机械牵张力对HPDLSCs和PPDLSCs破骨相关基因表达的影响
1
作者 刘佳 郭冬会 +2 位作者 秦文 杨平 李强 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期257-262,共6页
目的:探讨健康牙周组织来源的牙周膜干细胞(HPDLSCs)和牙周病组织来源的牙周膜干细胞(PPDLSCs)在静态机械牵张力作用下破骨相关基因表达的异同。方法:采用低密度接种法分离培养HPDLSCs和PPDLSCs,应用流式细胞仪对两种细胞的表面间充质... 目的:探讨健康牙周组织来源的牙周膜干细胞(HPDLSCs)和牙周病组织来源的牙周膜干细胞(PPDLSCs)在静态机械牵张力作用下破骨相关基因表达的异同。方法:采用低密度接种法分离培养HPDLSCs和PPDLSCs,应用流式细胞仪对两种细胞的表面间充质干细胞标记物表达进行检测,使用Flexcell Tension Unit对HPDLSCs和PPDLSCs进行不同力值静态机械牵张力(SMS)加载,实时定量RT-PCR检测HPDLSCs和PPDLSCs中破骨相关基因RANKL和C-fos的表达。结果:间充质干细胞表面标记物STRO-1、CD146、CD90、CD29在HPDLSCs和PPDLSCs中均强阳性表达,且HPDLSCs中的表达显著高于PPDLSCs(P<0.05)。在未加载SMS情况下,PPDLSCs中RANKL和C-fos的表达水平明显高于HPDLSCs(P<0.05);当加载SMS≤12%形变量时,HPDLSCs中两种破骨相关基因的表达水平较未加力时无明显变化(P>0.05),而形变量达到14%时,二者的表达显著上调(P<0.05);在PPDLSCs组,当SMS≤8%形变量时,RANKL和C-fos的表达无明显变化(P>0.05),而SMS≥10%形变量时,可明显激活两种破骨基因的表达(P<0.05)。结论:HPDLSCs和PPDLSCs对SMS的反应不同,过大的静态牵张力会导致PPDLSCs表达破骨相关基因增强。 展开更多
关键词 牙周膜干细胞 静态机械牵张力 牙周炎 破骨相关基因
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牙周炎微环境下静态牵张力对牙周膜干细胞中炎性细胞因子分泌的影响 被引量：3
2
作者 蔡东轩 孙唯夫 +1 位作者 金作林 刘佳 《口腔医学》 CAS 2020年第12期1079-1083,共5页
目的探究不同大小静态牵张力(static mechanical strain,SMS)对正常来源的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells obtained from healthy periodontal tissues,HPDLSCs)和牙周病组织来源的牙周膜干细胞(periodontal ligament st... 目的探究不同大小静态牵张力(static mechanical strain,SMS)对正常来源的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells obtained from healthy periodontal tissues,HPDLSCs)和牙周病组织来源的牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells obtained from periodontal tissues of periodontitis patients,PPDLSCs)炎性细胞因子表达的影响。方法以HPDLSCs和PPDLSC为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型,采用Flexcell牵张力加载装置,分别给予静态牵张力(频率为0.1 Hz,力值设定为6%、8%、10%、12%和14%)刺激12 h,并设立正常对照组。采用Elisa检测SMS加载后HPDLSCs和PPDLSCs中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8分泌水平。结果未加力情况下PPDLSCs中IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8分泌水平均高于HPDLSCs(P<0.05),加载SMS后PPDLSCs中IL-1β和TNF-α的表达水平略有升高(P<0.05),而IL-6和IL-8的表达水平则大幅提升,且在一定的范围内与SMS的大小呈正相关。结论牙周炎微环境导致PDLSCs中炎性细胞因子的表达情况增强且不同的炎性细胞因子对SMS的敏感性有差异,其中IL-6和IL-8表达量明显升高,提示其可能参与了牙周炎微环境下PDLSCs对SMS的反应。 展开更多
关键词 牙周炎微环境 静态牵张力 牙周膜干细胞 炎性细胞因子
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静态牵张力对人炎症牙周膜干细胞增殖及成骨分化的影响及分子机制探究 被引量：1
3
作者 喻莉 杨静 宋泰来 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2022年第4期217-224,共8页
目的:研究静态牵张力(static mechanical strain,SMS)对人炎症牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖及成骨分化的影响及分子机制。方法:给予健康PDLSCs及炎症PDLSCs 10%、12%、14%SMS干预12 h,炎症PDLSCs感染阴性... 目的:研究静态牵张力(static mechanical strain,SMS)对人炎症牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖及成骨分化的影响及分子机制。方法:给予健康PDLSCs及炎症PDLSCs 10%、12%、14%SMS干预12 h,炎症PDLSCs感染阴性对照(NC)shRNA慢病毒、长链非编码RNA(long non coding RNA,lncRNA)linc00638 shRNA慢病毒、微小RNA(microRNA,miR)-NC慢病毒、miR-29a抑制物慢病毒72 h后给予14%SMS干预12 h。酶标仪在490 nm处检测吸光度值(A_(490)),代表linc00638、miR-29a的表达水平及增殖活力。成骨诱导分化14 d后进行茜素红染色,并在405 nm处检测吸光度值(A_(405)),代表PDLSCs成骨分化水平。结果:在10%、12%、14%SMS的干预后,与干预前相比,健康PDLSCs的A_(490)、A_(405)明显增加(P<0.05),linc00638、miR-29a的表达水平无明显变化(P>0.05);炎症PDLSCs的A_(490)、A_(405)及miR-29a的表达水平明显降低,linc00638的表达水平明显增加(P<0.05)。敲低linc00638后给予14%SMS干预,炎症PDLSCs A_(490)、A_(405)及miR-29a的表达水平明显增加(P<0.05);miR-29a显著降低了炎症PDLSCs中linc00638野生型双荧光素酶报告基因的荧光活力(P<0.05);敲低linc00638并抑制miR-29a后给予14%SMS干预,炎症PDLSCs的A_(490)、A_(405)明显降低(P<0.05)。结论:14%SMS通过调控linc00638/miR-29a轴从而抑制炎症PDLSCs增殖及成骨分化。 展开更多
关键词 牙周膜干细胞 静态牵张力 长链非编码RNA 微小RNA 增殖 成骨分化
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长链非编码RNAlinc-01135对静态牵张力作用下人炎症牙周膜干细胞成骨分化的影响 被引量：8
4
作者 邹宛桦 秦文 +3 位作者 徐悦蓉 秦再秀 刘佳 金作林 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期193-197,共5页
目的:研究长链非编码RNA linc-01135对12%静态牵张力(SMS)作用下人炎症牙周膜干细胞(P-PDLSCs)成骨分化的影响。方法:分离培养人正常牙周膜干细胞(H-PDLSCs)和P-PDLSCs,RT-PCR检测linc-01135的表达水平以及慢病毒上调及下调linc-01135... 目的:研究长链非编码RNA linc-01135对12%静态牵张力(SMS)作用下人炎症牙周膜干细胞(P-PDLSCs)成骨分化的影响。方法:分离培养人正常牙周膜干细胞(H-PDLSCs)和P-PDLSCs,RT-PCR检测linc-01135的表达水平以及慢病毒上调及下调linc-01135表达后进行12%SMS加载的成骨基因变化,成骨诱导21 d茜素红染色检测成骨能力变化。结果:P-PDLSCs中linc-01135表达降低,利用慢病毒上调linc-01135的表达后进行12%SMS加载,RUNX2,ALP,OPG的表达明显上升(P<0.001);下调linc-01135的表达后,RUNX2、ALP、OPG的表达明显下降(P<0.001)。结论:inc-01135可以促进人炎症牙周膜干细胞在12%SMS作用下的成骨分化。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 牙周膜干细胞(PDLSCs) 静态牵张力(SMS) 成骨分化
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不同等级应力对人炎症牙周膜干细胞分化及细胞骨架重组的研究 被引量：6
5
作者 赵艳 刘佳 +2 位作者 秦文 李强 金作林 《临床口腔医学杂志》 2019年第3期131-135,共5页
目的:探究不同等级静态牵张力(static mechanical strain,SMS)对人炎症牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells derived from periodontits tissue,h PPDLSCs)分化特性及细胞骨架重组的影响。方法:对体外培养h PPDLSCs分... 目的:探究不同等级静态牵张力(static mechanical strain,SMS)对人炎症牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells derived from periodontits tissue,h PPDLSCs)分化特性及细胞骨架重组的影响。方法:对体外培养h PPDLSCs分别施加力值为6%,8%,10%,12%,14%的静态牵张力,连续加力12 h(对照组不加力)后,分别通过ALP染色,茜素红染色检测其成骨分化能力;油红O染色检测其成脂能力;倒置显微镜检测细胞形态学改变;免疫荧光染色和共聚焦显微镜观察细胞骨架的改变。Western Blot法检测细胞骨架相关蛋白ROCK1,p-cofilin,RhoGDIα,Rho-A的表达。结果:8%加力组h PPDLSCs镜下矿化结节和脂滴形成明显增多,ALP活性增强;共聚焦显微镜下细胞骨架弹力纤维的形成增多; ROCK1,cofilin,Rho-A细胞骨架正向蛋白表达水平上调,p-cofilin,Rho-GDIα表达水平则明显下降(P<0. 05)。结论:8%静态牵张力明显提高h PPDLSCs增殖分化能力和促进细胞骨架的重组;过大或过小的机械应力均不利于细胞生物学潜能的发挥。 展开更多
关键词 炎症微环境 细胞骨架 炎症牙周膜干细胞 静态牵张力 细胞分化
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静态牵张力对人炎症牙周膜干细胞成骨分化及细胞骨架重组的影响 被引量：1
6
作者 赵艳 王佳帅 +3 位作者 郭冬会 高洁 何晓天 金作林 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2017年第4期183-188,共6页
目的:探究静态牵张力(SMS)对人炎症来源的牙周膜干细胞(PPDLSCs)的成骨分化能力及细胞骨架重组的影响。方法:体外培养PPDLSCs,用FX-T4000力学加载系统对PPDLSCs体外施加力值为12%、频率为0.1 Hz的静态牵张力,加载12 h后(对照组不加力),... 目的:探究静态牵张力(SMS)对人炎症来源的牙周膜干细胞(PPDLSCs)的成骨分化能力及细胞骨架重组的影响。方法:体外培养PPDLSCs,用FX-T4000力学加载系统对PPDLSCs体外施加力值为12%、频率为0.1 Hz的静态牵张力,加载12 h后(对照组不加力),分别通过ALP染色、茜素红染色检测其成骨分化能力;倒置显微镜观察细胞的形态变化;免疫荧光染色和共聚焦显微镜观察细胞骨架的改变;Western blot法检测ALP、RUNX2、ROCK1、p-cofilin、Rho-GDIα、Rho-A蛋白的表达水平。结果:实验组PPDLSCs的矿化结节形成量明显减少;细胞骨架弹力纤维的形成受到抑制;ALP、RUNX2、ROCK1、cofilin、Rho-A蛋白表达水平下降,p-cofilin、Rho-GDIα蛋白的表达水平则升高(P<0.05)。结论:12%静态牵张力抑制PPDLSCs成骨分化和细胞骨架的重组。 展开更多
关键词 炎症牙周膜干细胞 细胞骨架 成骨分化 静态牵张力
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