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槲皮素-替米考星混合物纳米粒的制备及对金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性研究 被引量：6
1
作者 刘金环 张珊玲 +2 位作者 宋玮 罗万和 陈伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期1470-1478,共9页
【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、... 【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、0.15和0.20 g)和替米考星原料药用量(0.2、0.3、0.4和0.5 g)及转速(500、1000、1500 r/min)、反应时间(0.5、1.0、2.0 h)、反应温度(25、50、75℃)、溶剂浓度(5.0%、7.5%、10.0%)进行考察,以外观性状为指标,筛选槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优配方和制备条件;以微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径和Zeta电位为指标,对制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒表征;通过琼脂扩散法、微量肉汤稀释法和体外杀菌曲线,对比槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抗菌活性,评价槲皮素-替米考星混合物纳米粒的优势。【结果】当替米考星为0.4 g、槲皮素为0.1 g、溶剂为20 mL 7.5%的聚乙二醇溶液,在转速为1000 r/min、反应时间为1 h、反应温度为50℃时,所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优,其溶液外观性状显示颜色清亮,无沉淀和絮状物;微观形态显示该混合物纳米粒分布均匀,颗粒大小一致;沉降体积比为1,再分散性良好,平均粒径为741.9 nm,Zeta电位为-7.69 mV。替米考星标准品、槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抑菌圈直径分别为2.54、1.51和1.38 cm,对SASCVs菌株的最低抑菌浓度分别为1、1和2μg/mL;体外杀菌曲线表明,槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株表现出明显的浓度依赖性。【结论】本研究所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株具有较强杀菌能力,可为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供基础研究资料。 展开更多
关键词 槲皮素 替米考星 混合物纳米粒 金黄色葡萄球菌小菌落变异株 抗菌活性
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金黄色葡萄球菌小菌落突变株感染小鼠乳房炎模型的建立 被引量：3
2
作者 朱立力 王奇惠 +1 位作者 时永强 曲伟杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第7期1865-1870,共6页
为了建立由金黄色葡萄球菌小菌落突变株（small colony variants，SCVs）诱发感染乳房炎动物模型，本试验取40只分娩6-8d的BALB／c小鼠，随机分成8组（n=5），分别为阴性对照、生理盐水组和不同剂量金黄色葡萄球菌SCVs及金黄色葡萄球菌... 为了建立由金黄色葡萄球菌小菌落突变株（small colony variants，SCVs）诱发感染乳房炎动物模型，本试验取40只分娩6-8d的BALB／c小鼠，随机分成8组（n=5），分别为阴性对照、生理盐水组和不同剂量金黄色葡萄球菌SCVs及金黄色葡萄球菌质控菌株（1．0×10^3、1．0×10^4、1．0×10^5CFU／mL）试验组，对生理盐水组及各试验组小鼠第4对乳腺注射生理盐水和对应剂量的菌液（50mL／只），注射后24h解剖观察病理变化，一侧乳头制作石蜡切片，另一侧研磨后用ELISA检测试剂盒检测组织匀浆上清中的TNF-α含量。结果显示，注射菌液的试验组，小鼠均出现不同程度的临床症状，乳腺出现不同程度的炎性症状和病理变化。同一注射剂量下，金黄色葡萄球菌质控菌株较金黄色葡萄球菌SCVs病理变化严重，通过SPSS等软件对试验数据进行统计分析后得出，高浓度处理组金黄色葡萄球菌质控菌株的TNF-α表达量极显著高于金黄色葡萄球菌SCVs（P〈0．01）。结果表明，金黄色葡萄球菌及其SCVs均可用来建立小鼠乳房炎模型，且金黄色葡萄球菌SCVs引起的情况较其正常株轻微，这一结果为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究提供了新的材料和有益的探索，为SCVs与慢性乳房炎更深层次关系的研究奠定基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌小菌落突变株 小鼠 乳房炎模型
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金黄色葡萄球菌小菌落突变株体外感染乳腺上皮细胞的研究 被引量：5
3
作者 王奇惠 朱立力 +2 位作者 时永强 朱娟 曲伟杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第8期2169-2175,共7页
为研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株(S.aureus small colony variants,SASCVs)与正常株对原代培养的乳腺上皮细胞的侵袭情况,并观察对比其对细胞结构的损坏程度和对乳腺上皮细胞的影响,本试验对由云南农业大学动物医学实验教学中心实验... 为研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株(S.aureus small colony variants,SASCVs)与正常株对原代培养的乳腺上皮细胞的侵袭情况,并观察对比其对细胞结构的损坏程度和对乳腺上皮细胞的影响,本试验对由云南农业大学动物医学实验教学中心实验室分离的一株SASCV进行体外感染小鼠乳腺上皮细胞试验,将分离出的一株SASCV及质控菌株ATCC 25923分别注入实验室体外培养的小鼠乳腺上皮细胞内,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察质控菌株ATCC 25923及SASCVs诱导乳腺上皮细胞凋亡的细胞形态学变化;用流式细胞仪(Annexin VFITC/PI双染法)定量检测质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用,观察细胞的变化。结果显示,质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染小鼠乳腺上皮细胞3h后,可诱导乳腺上皮细胞发生凋亡,显示为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型的凋亡特征。Annexin V-FITC/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,并且阳性对照组的细胞凋亡率明显高于试验组。结果表明,SASCVs在侵染细胞的过程中达到一定数量不再上升;SASCVs的凋亡率明显的较正常金黄色葡萄球菌低。因此,SASCVs也可诱导乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征。本试验结果为以后预防和控制SASCVs感染奶牛慢性乳房炎提供试验依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌及其小菌落突变株 小鼠乳腺上皮细胞 细胞培养 体外感染 细胞凋亡
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