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清热解毒类中药的生物鉴定法Ⅲ——穿心莲的生物鉴定 被引量:12
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作者 王盛民 张瑛 +3 位作者 赵子剑 张恩户 赵启鹏 赫媛媛 《实用临床医药杂志》 CAS 2006年第3期27-29,37,共4页
目的 研究穿心莲的抑菌效应。探明穿心莲生物检定的适用剂量范围,建立标准曲线。方法 通过穿心莲对照药材对4种标准菌株的抑菌实验和穿心莲对敏感菌株的剂量效应曲线,构建适用于一点法的效应模式。结果 当穿心莲的浓度为0.11~0.55g... 目的 研究穿心莲的抑菌效应。探明穿心莲生物检定的适用剂量范围,建立标准曲线。方法 通过穿心莲对照药材对4种标准菌株的抑菌实验和穿心莲对敏感菌株的剂量效应曲线,构建适用于一点法的效应模式。结果 当穿心莲的浓度为0.11~0.55g/mL时,穿心莲的对数剂量和反应效应呈线性关系。结论 在上述浓度范围内,采用一点法,以穿心莲对照药材为标准品,对穿心莲药材和含穿心莲的中成药进行生物检定,方法可行。 展开更多
关键词 穿心莲 标准菌株 脱水穿心莲内酯 HPLC
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鸡内参基因β-actin和GAPDH实时定量PCR重组质粒标准品的构建 被引量:7
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作者 陈欣虹 钱琨 +2 位作者 郁川 田野 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2011年第10期21-24,共4页
本研究从SPF鸡皮肤中提取总RNA,并反转录为cDNA;以该cDNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)分别扩增出看家基因β-actin和GAPDH,将PCR产物连入pGEM-Teasy载体,转化DH5α菌,经蓝白斑筛选和质粒酶切鉴定和DNA含量测定,得到定量的β-actin和G... 本研究从SPF鸡皮肤中提取总RNA,并反转录为cDNA;以该cDNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)分别扩增出看家基因β-actin和GAPDH,将PCR产物连入pGEM-Teasy载体,转化DH5α菌,经蓝白斑筛选和质粒酶切鉴定和DNA含量测定,得到定量的β-actin和GAPDH基因融合的重组质粒(pGEMT-actin和pGEMT-GAPDH),即实时定量PCR内参标准品。构建成功的标准品经10倍梯度稀释,作为模板,获得扩增效率良好及可信度高的标准曲线。构建成功的标准品可大量制备,可用于鸡的靶基因定量PCR所需的内参标准品。 展开更多
关键词 内参基因 实时定量PCR 标准品 标准曲线
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水质总磷测定中水样的贮存方法及稳定性研究 被引量:4
3
作者 韩惠芳 吴学贵 +4 位作者 王一晨 温巧艳 王玉 林发媚 黄肖凤 《工业用水与废水》 CAS 2020年第2期85-87,共3页
通过对天然水样进行加标的方式,分别考察总磷测定水样直接冷藏与酸化后冷藏的保存效果,以及2种保存方式下总磷的稳定性。结果表明,总磷水样不管酸化与否均能在冷藏冰箱中稳定保存一个月,且总磷含量越高的水样,其稳定性越大。因此,当无... 通过对天然水样进行加标的方式,分别考察总磷测定水样直接冷藏与酸化后冷藏的保存效果,以及2种保存方式下总磷的稳定性。结果表明,总磷水样不管酸化与否均能在冷藏冰箱中稳定保存一个月,且总磷含量越高的水样,其稳定性越大。因此,当无法立即对总磷水样进行测定时,可将其直接置于冷藏冰箱中保存,并在一个月内检测完毕,即可保证总磷水样的检测结果的准确性。 展开更多
关键词 水质 总磷 保存方式 稳定性 酸化 冷藏 标准曲线
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水中总α、总β放射性实验的影响因素及测量方法讨论 被引量:4
4
作者 唐桦明 张玮亮 +3 位作者 罗海恩 韩帅帅 杨冠东 钟瑜 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期301-306,共6页
利用低本底α、β测量仪,通过一系列比较实验和数据获得影响水中总α、总β放射性活度的实验因素。按照现行国标中的标准曲线法进行实验并分析关系曲线的拟合结果;采用^(241)Am和^(40)K标准粉末源进行串道干扰实验;最后利用热释光测量... 利用低本底α、β测量仪,通过一系列比较实验和数据获得影响水中总α、总β放射性活度的实验因素。按照现行国标中的标准曲线法进行实验并分析关系曲线的拟合结果;采用^(241)Am和^(40)K标准粉末源进行串道干扰实验;最后利用热释光测量仪分析影响样品源计数值的因素。结果表明:“质量厚度净计数率”关系曲线线性拟合结果良好,可应用在实验计算中;在测量放射性活度较高的水样时,α通道对β通道产生的串道干扰需进行修正;样品源制备完毕后,不宜立刻测量,应贮存在干燥低本底的环境中,贮存后应用红外灯干燥足够长的时间并完全冷却后进行测量。 展开更多
关键词 总α放射性 总Β放射性 标准曲线 热释光测量仪
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液相色谱法测定硝酸氧化醇酮反应产物中乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸含量 被引量:3
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作者 石鸣彦 翟国栋 +1 位作者 段微微 张心月 《精细化工中间体》 CAS 2015年第5期69-72,共4页
采用液相色谱法对标准样品溶液测定后绘制标准工作曲线,测定硝酸氧化醇酮反应产物中乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸的含量。
关键词 有机酸 含量 标准工作曲线
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鸡MHC Ⅱ基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:3
6
作者 金元昌 李玉峰 袁志栋 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1912-1915,共4页
为了建立鸡主要组织相容性复合体Ⅱ类(major histocompatibility complex class II,MHC II)基因实时荧光定量PCR(real-time FQ-PCR)的检测方法。本研究应用RT-PCR方法扩增鸡外周血淋巴白细胞(peripheral blood leukocytes,PBLs)的MHC I... 为了建立鸡主要组织相容性复合体Ⅱ类(major histocompatibility complex class II,MHC II)基因实时荧光定量PCR(real-time FQ-PCR)的检测方法。本研究应用RT-PCR方法扩增鸡外周血淋巴白细胞(peripheral blood leukocytes,PBLs)的MHC II基因片断,将得到的目标片断克隆至pGM-T载体上,然后对重组质粒进行双酶切、PCR及测序鉴定;利用浓度梯度MHC II基因的重组标准品质粒DNA进行Real-time FQ-PCR,建立MHC II基因的标准曲线。经双酶切、PCR及测序分析显示,成功构建重组克隆质粒pGM-T-MHC II;对标准曲线进行分析表明,Ct值与其标准品浓度的对数值之间有良好的线性关系,为下一步应用Real-time FQ-PCR技术检测MHC II基因的转录水平奠定了基础。 展开更多
关键词 MHC II REAL-TIME FQ-PCR 标准曲线
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直读光谱法检测铝合金中硅、锰、镁、锌的标准曲线优化 被引量:2
7
作者 彭斐 陆科呈 +3 位作者 兰标景 郑许 朱玉涛 雷泳麟 《化学分析计量》 CAS 2022年第10期5-9,共5页
为了使直读光谱法检测铝合金中硅、锰、镁、锌的标准曲线适应不同系列铝合金样品,减少测量误差,将仪器预置标准曲线细分至10条,即将1条高含量预置标准曲线细分为7条,将1条低含量预置标准曲线细分为3条。通过检测大量铝合金光谱标准样品... 为了使直读光谱法检测铝合金中硅、锰、镁、锌的标准曲线适应不同系列铝合金样品,减少测量误差,将仪器预置标准曲线细分至10条,即将1条高含量预置标准曲线细分为7条,将1条低含量预置标准曲线细分为3条。通过检测大量铝合金光谱标准样品,将检测结果与标准值进行线性拟合,得出的截距和斜率分别用于调整细分标准曲线的截距A和斜率A,并使用标准样品进行验证。结果表明,标准曲线细分和优化后,硅、锰、镁和锌的检测结果更加接近证书值,测量误差更小,所考察的标准样品中,最低含量的硅、锰、镁、锌的绝对误差分别从0.0026%降至0.0009%、从0.0010%降至0.0000%、从0.0050%降至0.0002%、从0.0051%降至0.0003%;最高含量的硅、锰、镁、锌的绝对误差分别从0.070%降至0.001%、从0.13%降至0.01%、从0.33%降至0.14%、从0.49%降至0.09%。 展开更多
关键词 直读光谱 标准曲线 化学成分 铝合金 优化
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1850mm冷轧机板形测量与控制系统分析 被引量:1
8
作者 刘河桥 《铝加工》 CAS 2001年第2期49-51,共3页
对ASEA压磁式测量辊测量张应力分布的基本原理、结构、信号处理过程和板形控制原理、程序结构及控制算法作出了较为详细的分析。
关键词 板形测量 板形控制 压磁式测量辊 弯辊 倾斜 标准曲线 误差
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激光拉曼光谱仪在A-K糖冷却结晶中的应用研究 被引量:1
9
作者 向蕾蕾 朱亮 沙作良 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2015年第9期88-90,共3页
采用激光拉曼光谱法对水中A-K糖的浓度进行测定。通过比较纯水和加了A-K糖后溶液之间拉曼谱图的变化找到了A-K糖特征峰位置为1 657 cm^(-1),以1 657 cm^(-1)与水的拉曼光谱特征峰3 427 cm^(-1)的相对强度比值和溶液浓度建立线性关系,从... 采用激光拉曼光谱法对水中A-K糖的浓度进行测定。通过比较纯水和加了A-K糖后溶液之间拉曼谱图的变化找到了A-K糖特征峰位置为1 657 cm^(-1),以1 657 cm^(-1)与水的拉曼光谱特征峰3 427 cm^(-1)的相对强度比值和溶液浓度建立线性关系,从而建立校准模型。经验证此法可简单快速测定溶液浓度,最终利用此标准曲线实现对A-K糖在水中的冷却结晶的实时监测,这对研究A-K糖工业化生产过程的在线监控有着重大意义。 展开更多
关键词 拉曼光谱 A-K糖 标准曲线 实时监测
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替勃龙I晶型定量分析标准曲线的建立 被引量:1
10
作者 王立宇 朱亮 沙作良 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期819-824,共6页
目的替勃龙(tibolone)工业生产过程中需对产品进行定量分析,以确定目标晶型的含量。方法本文采用X射线粉末衍射(PXRD)技术建立了用于Ⅰ晶型定量分析的标准曲线。进行X射线粉末衍射前,需对样品进行研磨。由于研磨将导致替勃龙晶体的晶型... 目的替勃龙(tibolone)工业生产过程中需对产品进行定量分析,以确定目标晶型的含量。方法本文采用X射线粉末衍射(PXRD)技术建立了用于Ⅰ晶型定量分析的标准曲线。进行X射线粉末衍射前,需对样品进行研磨。由于研磨将导致替勃龙晶体的晶型发生转变,因此本试验利用X射线粉末衍射法与差式量热扫描法(DSC)对玛瑙研钵、陶瓷研钵两种研磨材料进行了考察。结果确定了最佳研磨方式与研磨时间,即陶瓷研钵研磨2min。并运用该方法进行制样,进行X射线粉末衍射。最终得到的标准曲线方程为Y=322.52X-206.54;X为特征峰强度比,Y为Ⅰ晶型的质量分数,相关系数R2=0.9994。运用标准曲线对已知质量分数的样品进行定量分析,确定检测下限为10%,对于Ⅰ晶型质量分数大于10%的样品,结果表明其相对误差均小于2%。结论建立的标准曲线可用于较高精度的物相定量分析,为替勃龙产品的晶型比例分析提供了有效的方法。 展开更多
关键词 替勃龙 研磨 熔点 特征峰强度 定量分析 标准曲线
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醇液中水含量的快速测定 被引量:1
11
作者 王修慧 田丁 +1 位作者 徐文雪 李颖 《大连铁道学院学报》 2000年第1期78-81,共4页
通过测定醇水溶液(主要是醇和水)的电流和电阻,阐明了醇水溶液中水含量与电流、电阻或电导呈线性关系.
关键词 水含量 标准曲线 醇液 电解质 快速测定
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利用JAVA语言处理生化实验数据的探索
12
作者 杜崇旭 张通 王洪友 《大连民族学院学报》 CAS 2004年第5期49-52,共4页
在生化实验中,往往要测量大量的实验数据,制作标准曲线或各种参数的变化曲线,而对这些数据的计算、处理既费时又费力.本课题用计算机JAVA语言编写程序,利用最小二乘法,研究对实验数据的处理,进而快速、便捷地制作标准曲线或各种参数的... 在生化实验中,往往要测量大量的实验数据,制作标准曲线或各种参数的变化曲线,而对这些数据的计算、处理既费时又费力.本课题用计算机JAVA语言编写程序,利用最小二乘法,研究对实验数据的处理,进而快速、便捷地制作标准曲线或各种参数的变化曲线.通过与EXCEL法进行比较,初步确定这是一种比较好的优化实验数据的处理方法. 展开更多
关键词 实验数据 JAVA 标准曲线 最小二乘法
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用高纯亚硝酸钠配制标准储备液省略标定过程的探讨
13
作者 艾合买提 李世迁 周培疆 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第S1期243-247,共5页
对配制亚硝酸盐氮标准贮备液的两种方法进行简单的介绍、并做标准曲线,对标准样品和水样进行对比实验。结果表明,两种方法做的标准曲线之间无显著性差异,监测结果较为一致。用高纯亚硝酸钠配制标准储备液省略标定过程的方法实际工作中... 对配制亚硝酸盐氮标准贮备液的两种方法进行简单的介绍、并做标准曲线,对标准样品和水样进行对比实验。结果表明,两种方法做的标准曲线之间无显著性差异,监测结果较为一致。用高纯亚硝酸钠配制标准储备液省略标定过程的方法实际工作中具有参考价值。 展开更多
关键词 高纯 储备液 使用液 标准曲线 检验方法
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用计算机建立标准曲线
14
作者 赵险峰 《沈阳化工》 1995年第3期49-50,共2页
标准曲线法是仪器分析中最常用的一种定量方法。对于不联机的仪器则要在坐标纸上作图,手工绘制曲线,因而误差较大。为此,介绍了一种利用计算机进行数据处理的方法。
关键词 仪器分析 计算机应用 标准曲线
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鸡IL-6和IL-18基因实时荧光定量PCR检测方法的建立
15
作者 金元昌 李玉峰 袁志栋 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期883-888,共6页
本研究旨在建立鸡白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素18(IL-18)基因实时荧光定量PCR(Realtime FQ-PCR)检测方法。应用RT-PCR方法扩增鸡外周血淋巴白细胞(peripheral blood leukocytes,PBLs)的IL-6和IL-18基因片断,分别克隆至p... 本研究旨在建立鸡白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素18(IL-18)基因实时荧光定量PCR(Realtime FQ-PCR)检测方法。应用RT-PCR方法扩增鸡外周血淋巴白细胞(peripheral blood leukocytes,PBLs)的IL-6和IL-18基因片断,分别克隆至pGM-T载体上,将浓度梯度的IL-6和IL-18基因的重组质粒DNA进行实时荧光定量PCR,并建立相应的标准曲线。经PCR、双酶切和测序分析显示,成功地构建了重组克隆质粒pGM-T-IL-6和pGM-T-IL-18。标准曲线分析显示,IL-6和IL-18基因标准曲线的Ct值与其标准品浓度的对数值之间有良好的线性关系,IL-6和IL-18检测的灵敏度均达到10拷贝/μL。为下一步应用实时荧光定量PCR技术检测IL-6和IL-18基因的转录水平奠定了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素6 白细胞介素18 Real-time FQ-PCR 标准曲线
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双标准曲线相对定量PCR试验原理与方法 被引量:66
16
作者 徐丽华 刘春雷 +4 位作者 常玉梅 梁利群 刘金亮 高国强 韩启霞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期70-75,共6页
实时荧光定量PCR(FQ-PCR)是一种准确有效的核酸定量分析技术,具有易操作、高通量、高敏感性、高特异性、高度自动化和低污染等优点,并随新定量PCR仪及新操作方法的发展而得到广泛应用,但是,定量PCR的高敏感性特点使得实验操作严格而繁... 实时荧光定量PCR(FQ-PCR)是一种准确有效的核酸定量分析技术,具有易操作、高通量、高敏感性、高特异性、高度自动化和低污染等优点,并随新定量PCR仪及新操作方法的发展而得到广泛应用,但是,定量PCR的高敏感性特点使得实验操作严格而繁琐。阐述了一种改进的相对定量方法——双标准曲线法的试验原理和特点,描述了定量PCR体系的优化方式,探讨了试验误差分析方法及试验操作技巧,并就试验数据的处理方法进行讨论。试验证明,双标准曲线法是一种经济、简单而准确的定量方法。 展开更多
关键词 双标准曲线法 相对定量PCR 荧光扩增曲线 试验误差分析 归一化值
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鲤脑组织低温差异表达候选基因的筛选 被引量:9
17
作者 徐丽华 常玉梅 +3 位作者 刘春雷 梁利群 刘金亮 池炳杰 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期262-269,共8页
采用双标准曲线相对实时荧光定量PCR法,分别以23℃常温对照组和6℃低温待测组的黑龙江鲤脑组织cDNA为模板,以18S rRNA为内参基因,检测26个候选基因的相对表达量。实验数据经显著性分析发现,有5个候选基因在低温条件下表达量显著上升(P&l... 采用双标准曲线相对实时荧光定量PCR法,分别以23℃常温对照组和6℃低温待测组的黑龙江鲤脑组织cDNA为模板,以18S rRNA为内参基因,检测26个候选基因的相对表达量。实验数据经显著性分析发现,有5个候选基因在低温条件下表达量显著上升(P<0.01),与对照组相比它们的表达量分别上升了2.11倍、13.9倍、2.52倍、7.38倍和1.83倍,基因功能比对结果表明其编码蛋白产物分别是脂肪酸链延伸蛋白、酰基辅酶A脱氢酶、转录起始因子IIB、肌醇-1-磷酸合成酶、血脑屏障HT7抗原;有7个候选基因在低温下表达量分别下降了21.8%、25.9%、16.6%、23.7%、15.8%、16.3%、42.5%,但对照组和待测组差异不显著(P>0.05),基因功能比对发现它们主要参与抑制糖酵解,促进细胞凋亡和干扰神经系统的重塑活动。上述低温下表达量显著上升的5个冷诱导候选基因的获得为今后进行不耐低温鱼类的基因工程育种提供了基因元件。 展开更多
关键词 脑组织cDNA 低温 候选基因 实时荧光定量PCR 双标准曲线法
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转基因烟草中外源基因实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:10
18
作者 王盛 谢芝勋 +6 位作者 谢丽基 谢志勤 黄莉 罗思思 邓显文 黄娇玲 刘加波 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期745-749,共5页
【目的】建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法,为转基因植物中外源基因拷贝数的检测提供参考。【方法】采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测转基因烟草中外源绿色荧光蛋白基因(GFP)的拷贝数,以... 【目的】建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法,为转基因植物中外源基因拷贝数的检测提供参考。【方法】采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测转基因烟草中外源绿色荧光蛋白基因(GFP)的拷贝数,以烟草单拷贝的内源核糖核酸还原酶基因(RNR2)作为内参基因,建立相对定量的双标准曲线法检测转基因烟草中外源基因拷贝数的方法。【结果】构建RNR2基因、GFP基因实时荧光定量PCR的标准曲线,分别为y=-0.2858x+5.6695和y=-0.2826x+2.1048,R2分别为0.9994和0.9989,相关性较高。在检测的5株转基因烟草中GFP基因的拷贝数分别为5、8、19、28和45,非转基因烟草植株的GFP基因拷贝数为0。【结论】建立的转基因烟草中外源基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法具有简单、快速、准确等优点,可用于基因工程中对优良转化植株的筛选及外源基因表达量的快速检测和定量分析。 展开更多
关键词 转基因烟草 双标准曲线法 外源基因 拷贝数 SYBR Green I实时荧光定量PCR
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草菇冷诱导基因Cor1在低温下表达变化的研究 被引量:8
19
作者 乔娜 汪虹 陈明杰 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期213-219,共7页
将草菇菌株V23和耐低温诱变草菇菌株VH3的菌丝在4℃下处理不同时间,分别提取RNA,反转录获得cDNA作为模板,构建含Cor1基因和GPD内标基因片段的质粒作为标准品,采用荧光定量PCR技术研究Cor1基因在低温下的表达变化。结果表明草菇V23菌株的... 将草菇菌株V23和耐低温诱变草菇菌株VH3的菌丝在4℃下处理不同时间,分别提取RNA,反转录获得cDNA作为模板,构建含Cor1基因和GPD内标基因片段的质粒作为标准品,采用荧光定量PCR技术研究Cor1基因在低温下的表达变化。结果表明草菇V23菌株的Cor1基因未经低温处理的表达量最大,低温处理后表达量持续下降,在6h达到最低值,8h开始该基因的表达量上升;而VH3菌株Cor1基因低温处理后表达量明显增加,2h达到最大值,4h下降,但6h开始上升,10h又下降。通过推测Cor1基因表达与草菇耐低温特性有相关性,为今后利用草菇自身的抗寒机制进行遗传改造提供理论依据。 展开更多
关键词 食用菌 耐低温诱变菌株 双标准曲线法 定量PCR
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顶空气相色谱法对血中乙醇水平测定方法的探讨 被引量:6
20
作者 解润芳 徐天勇 +1 位作者 解继明 张秀峰 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第8期1023-1025,共3页
目的建立一种简便、快速、准确、可靠的双柱双检测器,采用顶空气相色谱法对血中乙醇进行定性、定量分析。方法利用气体对挥发性物质的萃取原理进行样品前处理,顶空进样器进样,叔丁醇为内标物,用装有2根色谱柱(001通道色谱柱,DB-ALC2;00... 目的建立一种简便、快速、准确、可靠的双柱双检测器,采用顶空气相色谱法对血中乙醇进行定性、定量分析。方法利用气体对挥发性物质的萃取原理进行样品前处理,顶空进样器进样,叔丁醇为内标物,用装有2根色谱柱(001通道色谱柱,DB-ALC2;002通道色谱柱,DB-ALC1)及2个氢火焰离子化检测器(FID1、FID2检测器)的气相色谱仪进行分离分析,用保留时间定性,内标标准曲线法定量。结果该方法线性范围为0.2~2.0 mg/mL,001通道线性回归方程为:Y=1.057 7 X+0.048 2,决定系数R2=0.999 05;002通道线性回归方程为:Y=1.039 5 X+0.046 5,决定系数R2=0.999 25。方法平均回收率为99.70%,001通道与002通道对样品测定结果的相对标准偏差(RSD)<4%。结论该方法可用于法医毒物分析血中乙醇水平的检测及实验室能力认可中能力验证计划样品的测定,结果令人满意。 展开更多
关键词 法医毒物分析 双柱双检测器顶空气相色谱法 血液 乙醇 内标标准曲线法 实验室能力认可
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