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ESCRTing in cereals: still a long way to go
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作者 Verena Ibl 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2019年第9期1144-1152,共9页
The multivesicular body(MVB) sorting pathway provides a mechanism for the delivery of cargo destined for degradation to the vacuole or lysosome.The endosomal sorting complex required for transport(ESCRT) is essential ... The multivesicular body(MVB) sorting pathway provides a mechanism for the delivery of cargo destined for degradation to the vacuole or lysosome.The endosomal sorting complex required for transport(ESCRT) is essential for the MVB sorting pathway by driving the cargo sorting to its destination.Many efforts in plant research have identified the ESCRT machinery and functionally characterised the first plant ESCRT proteins.However,most studies have been performed in the model plant Arabidopsis thaliana that is genetically and physiologically different to crops.Cereal crops are important for animal feed and human nutrition and have further been utilized as promising candidates for recombinant protein production.In this review,I summarize the role of plant ESCRT components in cereals that are involved in efficient adaptation to environmental stress and grain development.A special focus is on barley(Hordeum vulgare L.) ESCRT proteins,where recent studies show their quantitative mapping during grain development,e.g.associating HvSNF7.1 with protein trafficking to protein bodies(PBs) in starchy endosperm.Thus,it is indispensable to identify the molecular key-players within the endomembrane system including ESCRT proteins to optimize and possibly enhance tolerance to environmental stress,grain yield and recombinant protein production in cereal grains. 展开更多
关键词 ESCRT CEREAL barley grain ENDOSPERM snf7 ABIOTIC STRESS biotic STRESS
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参与唇腭部发育的重要蛋白复合体ESCRTⅢ的单分子检测体系的构建
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作者 李瑶 杨梦铱 +3 位作者 李琳 陈春来 隋森芳 孙珊 《中华口腔正畸学杂志》 2019年第3期152-156,共5页
目的构建参与唇腭部发育的重要蛋白ESCRTⅢ的单分子检测体系。方法分析ESCRTⅢ蛋白的结构,选取不影响结构稳定和纤丝形成的氨基酸进行突变,体外提取突变蛋白检测蛋白的稳定性,吸收光谱检测突变蛋白荧光标记的效率,负染电镜观察突变蛋白... 目的构建参与唇腭部发育的重要蛋白ESCRTⅢ的单分子检测体系。方法分析ESCRTⅢ蛋白的结构,选取不影响结构稳定和纤丝形成的氨基酸进行突变,体外提取突变蛋白检测蛋白的稳定性,吸收光谱检测突变蛋白荧光标记的效率,负染电镜观察突变蛋白形成纤丝的能力,负染电镜观察和离心沉淀分析突变体蛋白形成的纤丝被Vps4解聚的能力。结果选取了ESCRTⅢ蛋白Snf7上的5个位点,K57,G58,N59,G120和D122,分别突变为半胱氨酸,其中K57C突变体蛋白不稳定聚沉,G58C突变体蛋白荧光标记效率低,N59C和G120C突变体蛋白影响纤丝形成,只有D122C突变体蛋白稳定,标记效率高,且标记后的蛋白能正常形成纤丝并被Vps4蛋白解聚。结论筛选出了Snf7 D122C突变体适用于利用单分子技术检测ESCRTⅢ纤丝的解聚动态过程,从而为进一步在细胞水平和体内研究ESCRT系统对腭部发育的作用提供支持。 展开更多
关键词 唇腭裂 snf7 ESCRTⅢ 单分子检测 Vps4
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褐飞虱安全高效RNAi靶基因的筛选及Snf7同源基因的控害效果 被引量:1
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作者 黎丹 毛婕 +1 位作者 李灿 张文庆 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1-11,共11页
褐飞虱(Nilaparvata lugens)是一种具有高繁殖力、强适应性和迁飞性的重要水稻害虫。为更有效地获得安全高效的褐飞虱RNAi靶标基因,建立了一套安全高效RNAi靶基因的筛选流程,获得了32个安全高效致死候选基因,并检测了其中12个基因的RNA... 褐飞虱(Nilaparvata lugens)是一种具有高繁殖力、强适应性和迁飞性的重要水稻害虫。为更有效地获得安全高效的褐飞虱RNAi靶标基因,建立了一套安全高效RNAi靶基因的筛选流程,获得了32个安全高效致死候选基因,并检测了其中12个基因的RNAi效率。进一步对其中的转运必需内吞体分选复合物Ⅲ亚基Snf7同源基因(简称为NlSnf7)的控害效果进行了研究。NlSnf7基因在褐飞虱各个时期和组织均有表达。通过注射法和饲喂法RNAi技术对NlSnf7进行低剂量干扰,结果表明干扰后NlSnf7的mRNA表达水平显著降低,褐飞虱的校正死亡率在每头注射50 ng后第13天可达70%,饲喂50 ng/μL后第9天可达48%;注射dsNlSnf7后第5天NlSnf7的蛋白水平也显著降低。此外,选择无连续21 bp相同序列的亚洲玉米螟和白背飞虱进行dsNlSnf7注射,发现与对照组相比,实验组均无显著变化。这些结果表明dsNlSnf7片段是一个高效安全的RNAi靶标分子。 展开更多
关键词 褐飞虱(Nilaparvata lugens) RNAi靶基因 转运必需内吞体分选复合物Ⅲ亚基snf7
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