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Snail1对牛脂肪细胞增殖分化影响及作用机制的研究 被引量:1
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作者 张文涛 刘晨阳 +4 位作者 朱炳霖 柳丽 田媛 姚宇航 成功 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5008-5019,共12页
旨在探究Snail 1基因对于牛脂肪细胞增殖分化的影响及其潜在的作用分子机制。本研究利用腺病毒在秦川牛脂肪细胞中过表达Snail 1基因并设置试验组和对照组各3个生物学重复,采用流式细胞术、CCK-8、EdU染色、油红O染色、甘油三酯测定、qR... 旨在探究Snail 1基因对于牛脂肪细胞增殖分化的影响及其潜在的作用分子机制。本研究利用腺病毒在秦川牛脂肪细胞中过表达Snail 1基因并设置试验组和对照组各3个生物学重复,采用流式细胞术、CCK-8、EdU染色、油红O染色、甘油三酯测定、qRT-PCR和蛋白质印迹等试验方法探究Snail 1对牛脂肪细胞增殖和分化的影响;进一步通过RNA-Seq、双荧光素酶报告试验筛选其作用信号通路及靶基因。结果表明,过表达Snail 1抑制了细胞增殖(CCK-8)且减少了处于S复制期阳性细胞比例(EdU,P<0.05)。结合流式细胞术试验,结果表明Snail 1上调导致了细胞周期G1/S期阻滞。进一步的实时荧光定量PCR和蛋白质印迹结果表明,Snail 1抑制了细胞周期蛋白基因CCNB1、CCND 2的表达(P<0.05)。对诱导分化第6天牛脂肪细胞进行油红O染色和甘油三酯检测,结果表明Snail 1抑制了牛脂肪细胞的成脂分化和甘油三酯的生成。qRT-PCR分析表明,过表达Snail 1抑制了PPARγ(P=0.06)、FABP4(P<0.05)、LPL(P<0.05)基因表达,而PIK 3R3基因表达水平显著上调(P<0.01);蛋白质印迹结果表明,Snail 1表达显著抑制了FABP4蛋白表达。进一步通过RNA-Seq测序分析发现,Snail 1过表达引起的差异基因主要富集在PPAR、ECM受体互作、PI3K-AKT、MAPK、尼古丁成瘾及胰岛素分泌等信号通路。基于FIMO靶基因筛选联合RNA-Seq数据分析及荧光素酶试验等证实,转录因子Snail1可能通过靶向Wnt信号通路的拮抗剂SFRP2影响牛脂肪细胞的分化过程。Snail 1基因抑制牛脂肪细胞的增殖和分化过程,且可能通过“Snail1/SFRP2-Wnt/β-catenin-GSK3β”正反馈环参与了牛脂肪细胞分化调控过程。 展开更多
关键词 snail 1基因 脂肪细胞 增殖和分化 RNA-SEQ 靶基因
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Snail1基因表达在妊娠期糖尿病大鼠氧化应激及肝脏损伤的作用机制
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作者 刘正 郑艳丽 +2 位作者 贺云云 李静 王静 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第7期1243-1247,1230,共6页
目的:探讨Snail1基因表达在妊娠期糖尿病大鼠氧化应激及肝脏损伤的作用机制。方法:健康成年C57BL/6雌性大鼠32只作为研究对象。采用高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素注射的方式构建妊娠期糖尿病大鼠模型。将所有大鼠分为正常妊娠组,正常妊... 目的:探讨Snail1基因表达在妊娠期糖尿病大鼠氧化应激及肝脏损伤的作用机制。方法:健康成年C57BL/6雌性大鼠32只作为研究对象。采用高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素注射的方式构建妊娠期糖尿病大鼠模型。将所有大鼠分为正常妊娠组,正常妊娠+Snail1过表达组,妊娠期糖尿病组,妊娠期糖尿病+Snail1过表达组。采用qRT-PCR检测大鼠Snail1的m RNA表达水平,并检测大鼠妊娠期体重、氧化应激指标、炎症指标和肝功能指标。结果:与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的孕鼠体重、胎鼠体重、胎盘重量、Snail1 m RNA,明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组孕鼠体重、胎鼠体重、胎盘重量、Snail1 m RNA均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的FBG、FINS、HOMA-IR明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组FBG、FINS、HOMA-IR均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的ROS、GSH-Px、MDA明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组ROS、GSH-Px、MDA均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的TNF-α、IL-1β、IL-18明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组TNF-α、IL-1β、IL-18均显著高于正常妊娠+Snail1过表达组和妊娠期糖尿病组(P<0.05);与正常妊娠组相比,正常妊娠+Snail1过表达组、妊娠期糖尿病组、妊娠期糖尿病+Snail1过表达组的GPT、GOT、ALP明显更高(P<0.05),且妊娠期糖尿病+Snail1过表达组GPT、GOT、AL 展开更多
关键词 snail1基因 妊娠期糖尿病大鼠 氧化应激 肝脏损伤
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Snail1基因沉默对喉鳞癌Hep-2细胞紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响 被引量:1
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作者 刘双凤 沈阳 +1 位作者 冯唐 刘肖珩 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第4期591-596,共6页
本文为研究Snail1基因对喉鳞癌细胞株Hep-2紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响,将含有Snail1基因的短发夹RNA(Sh-RNA)的质粒转染喉鳞癌细胞株Hep-2,培养出可稳定传代的Snail1基因沉默的细胞(命名为Sh-snail1细胞)。课题组以蛋白免疫印迹... 本文为研究Snail1基因对喉鳞癌细胞株Hep-2紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响,将含有Snail1基因的短发夹RNA(Sh-RNA)的质粒转染喉鳞癌细胞株Hep-2,培养出可稳定传代的Snail1基因沉默的细胞(命名为Sh-snail1细胞)。课题组以蛋白免疫印迹技术检测紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5的表达是否发生变化。然后设计伤口愈合实验检测其迁移能力,再以蛋白免疫印迹技术检测与细胞迁移能力密切相关的Rho GTP酶家族重要成员Rho A、Cdc42蛋白的表达变化。结果表明,Sh-snail1细胞紧密连接关键蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5表达明显上调,迁移能力明显减弱,且Rho A、Cdc42蛋白表达下调。该研究表明,喉鳞癌Hep-2细胞通过下调Snail1基因的表达使细胞间连接更加紧密,同时抑制Hep-2细胞的迁移能力,下调Rho A、Cdc42蛋白的表达。本文研究结果证实,Snail1基因与Hep-2细胞转移过程中的细胞间紧密连接打开以及细胞迁移能力增强密切相关,为靶向治疗喉鳞癌提供分子机制的研究依据。 展开更多
关键词 snail1 基因沉默 HEP-2细胞 紧密连接 细胞迁移
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