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芪归方有效组分治疗特发性肺纤维化的实验研究 被引量:8
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作者 彭艳芳 张莹雯 +2 位作者 张亚兵 夏玉坤 陈巍 《世界中医药》 CAS 2020年第12期1719-1723,1728,共6页
目的:基于Smurf2串话TGF-β1/Smad信号通路研究芪归方有效组分对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5的影响及机制。方法:体外予以10 ng/mL TGF-β1培养MRC-5细胞,PCR仪检测α-SMA的mRNA水平判断模型是否成功。设立正常... 目的:基于Smurf2串话TGF-β1/Smad信号通路研究芪归方有效组分对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5的影响及机制。方法:体外予以10 ng/mL TGF-β1培养MRC-5细胞,PCR仪检测α-SMA的mRNA水平判断模型是否成功。设立正常对照组、模型组(10 ng/mL TGF-β1处理)、泼尼松处理组、芪归方有效组分高剂量组、中剂量组、低剂量组,采用CCK-8法检测MRC-5的增殖情况,Western blot检测各组细胞Smad7、SnoN蛋白的表达水平,RT-PCR检测各组细胞Smurf2的mRNA水平。结果:与正常对照组比较,48 h模型组细胞增殖明显,α-SMA的mRNA水平增加(P<0.01),造模成功。经10 ng/mL TGF-β1处理细胞MRC-5,与正常对照组比较,Smad7、SnoN蛋白水平显著降低,Smurf2蛋白mRNA水平升高(P<0.01或P<0.05)。不同浓度芪归方有效成分处理组细胞增殖降低,可逆转以上各指标的改变,呈一定的量效关系。结论:芪归方有效组分能抑制MRC-5细胞增殖,可通过减少MRC-5细胞中Smurf2所介导的Smad7、SnoN的泛素化,恢复Smad7、SnoN蛋白的表达,从而调节肺纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 芪归方有效组分 smad泛素调节因子2 smad蛋白 核转录共抑制因子 特发性肺纤维
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糖尿病大鼠肾组织Smurf2表达及其与SnoN蛋白降解的关系 被引量:6
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作者 刘瑞霞 郭兵 +4 位作者 肖瑛 石明隽 王圆圆 桂华珍 张国忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1743-1748,共6页
目的:观察Smad泛素化调节因子2(Smurf2)和核转录共抑制因子SnoN在糖尿病(DM)大鼠肾组织的动态表达,并初步探讨Smurf2在DM大鼠肾组织SnoN蛋白表达变化中的作用。方法:链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射复制DM大鼠模型,随机分为DM2、4、8、12、16... 目的:观察Smad泛素化调节因子2(Smurf2)和核转录共抑制因子SnoN在糖尿病(DM)大鼠肾组织的动态表达,并初步探讨Smurf2在DM大鼠肾组织SnoN蛋白表达变化中的作用。方法:链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射复制DM大鼠模型,随机分为DM2、4、8、12、16和24周组,每组均设鼠龄匹配的正常对照组(n=6)。生化方法测血糖、血肌酐(Scr)及24h尿蛋白量,计算肾脏指数;HE染色观察胰腺和肾组织病理学改变;免疫荧光染色检测胰腺组织胰岛素、肾组织Smurf2和SnoN的表达;Westernblotting检测肾皮质Smurf2、SnoN、转化生长因子β1(TGF-β1)和磷酸化Smad2(p-Smad2)蛋白的表达;RT-PCR检测肾皮质Smurf2和SnoN的mRNA。结果:(1)DM各组血糖、血Scr、24h尿蛋白量和肾脏指数均高于正常对照组,正常胰腺组织胰岛素表达强,DM大鼠胰岛素表达则明显减弱;(2)Smurf2和SnoN蛋白均主要表达于肾小管上皮细胞,从DM2周始各DM组Smurf2、TGF-β1和p-Smad2蛋白表达均多于正常对照组,DM4周起各DM组SnoN蛋白均少于正常对照组,DM各组SnoNmRNA与正常组相比无显著差异,Smurf2mRNA随病程进展逐渐增多;(3)Smurf2和SnoN蛋白的表达量呈显著负相关(r=-0.88,P<0.01)。结论:在糖尿病肾病发病过程中SnoN蛋白的表达减少可能与Smurf2介导其泛素化降解有关。 展开更多
关键词 smad泛素调节因子2 SNON 磷酸smad2 糖尿病肾病
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转化生长因子β_1对人巩膜成纤维细胞Smad泛素化调节因子2和Ⅰ型胶原α_1影响的研究 被引量:6
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作者 陈丽娟 陈婷 +3 位作者 陈雪兰 叶文文 黄丽娟 胡建民 《中华眼科医学杂志(电子版)》 2019年第1期14-20,共7页
目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)中的表达,检测转化生长因子β_1(TGF-β_1)影响下HFSFs中Smurf2和Ⅰ型胶原α_1(COLIA1)含量的变化。方法 HFSFs复苏并稳定传代后,用免疫细胞化学法检测细胞中Smurf... 目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)中的表达,检测转化生长因子β_1(TGF-β_1)影响下HFSFs中Smurf2和Ⅰ型胶原α_1(COLIA1)含量的变化。方法 HFSFs复苏并稳定传代后,用免疫细胞化学法检测细胞中Smurf2的表达。分别用不同浓度的TGF-β_1(0、1 ng/ml、5 ng/ml及10 ng/ml)处理HFSFs 24 h以及10 ng/ml TGF-β_1处理HFSFs不同时长(1 h、6 h、12 h及24 h)后,用实时荧光定量法检测各组Smurf2信使核糖核酸(mRNA)和COLIA1 mRNA表达水平。数据以均数±标准差(±s)描述,不同浓度和不同时长的组间比较采用单因素方差分析,当差异有统计学意义时,进一步采用SNK法两两比较。结果免疫细胞化学检测的结果显示,HFSFs中有COLIA1 mRNA和Smurf2蛋白的表达。与空白对照组比较,TGF-β_110 ng/ml组COLIA1 mRNA的表达呈上升趋势(F=3. 17,P <0. 05),TGF-β_15 ng/ml、10 ng/ml组Smurf2 mRNA表达上调(F=2. 35,2. 00; P <0. 05)。10 ng/ml TGF-β_1干预HFSFs培养1 h、6 h、12 h及24 h后,24 h组COLIA1 mRNA表达显著升高(F=29. 20,P <0. 05)。Smurf2 mRNA表达改变呈先上升后下降趋势,在6 h达到最高(F=10. 65,P <0. 05)。结论 TGF-β_1可能通过调控HFSFs Smurf2的表达,诱导HFSFs COLIA1的合成。 展开更多
关键词 smad泛素调节因子2 人胚胎眼巩膜成纤维细胞 生长因子β1smad通路 近视
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沉默Smad泛素化调节因子2基因对人增生性瘢痕成纤维细胞功能的影响 被引量:6
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作者 张志 况芳 +3 位作者 刘昌玲 陈宾 汤文彬 李孝建 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期145-151,共7页
目的探讨沉默Smad泛素化调节因子2(Smurf2)基因对人增生性瘢痕Fb分泌TGF-β1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原的影响。 方法取9例烧伤后增生性瘢痕患者的正常皮肤组织和瘢痕组织,用组织块法培养人正常皮肤Fb和增生性瘢痕F... 目的探讨沉默Smad泛素化调节因子2(Smurf2)基因对人增生性瘢痕Fb分泌TGF-β1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原的影响。 方法取9例烧伤后增生性瘢痕患者的正常皮肤组织和瘢痕组织,用组织块法培养人正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb,将2种第3代Fb均按随机数字表法分成6组,每组9孔。空白对照组,不加任何小干扰RNA培养72 h;阴性对照组,转染非靶向的小干扰RNA培养72 h;Smurf2小干扰RNA转染组,转染100 nmol/L的Smurf2小干扰RNA培养72 h;空白对照+TGF-β1组,不加任何小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF-β1刺激6 h;阴性对照+TGF-β1组,转染非靶向的小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF-β1刺激6 h;Smurf2小干扰RNA转染+TGF-β1组,转染Smurf2小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF-β1刺激6 h。(1)分别采用蛋白质印迹法、RT-PCR法检测2种细胞空白对照组、阴性对照组、Smurf2小干扰RNA转染组Smurf2的蛋白和mRNA表达。(2)采用ELISA法检测2种细胞空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF-β1含量。(3)采用蛋白质印迹法检测2种细胞6组α-SMA的蛋白表达,ELISA法检测2种细胞6组细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量。(4)采用RT-PCR法检测2种细胞6组α-SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达。以上实验中各组样本数均为9。对数据行析因设计方差分析、Bonferroni法检验。 结果(1)2种细胞Smurf2小干扰RNA转染组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均明显低于空白对照组和阴性对照组(P值均小于0.05),空白对照组和阴性对照组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均相近(P值均大于0.05)。(2)增生性瘢痕Fb空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF-β1含量分别为(4.34±0.56)、(2.14±0.28)pg/mL,均明显高于正常皮肤Fb的(1.52±0.20)、(1.41±0.18)pg/mL(P值均小于0.05)。增生 展开更多
关键词 瘢痕 成纤维细胞 生长因子Β smad泛素调节因子2
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Smad泛素化调节因子2在肝纤维化过程中对结缔组织生长因子的作用研究 被引量:4
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作者 蔡瑜 徐奕 沈锡中 《内科理论与实践》 2012年第4期305-309,共5页
目的:在体内和体外研究Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在肝纤维化过程中对结缔组织生长因子(CTGF)的作用。方法:建立四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型,收集人类肝硬化和正常肝组织样本,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western bl... 目的:在体内和体外研究Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在肝纤维化过程中对结缔组织生长因子(CTGF)的作用。方法:建立四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型,收集人类肝硬化和正常肝组织样本,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot,WB)、免疫组织化学(IHC)方法检测Smurf2和CTGF的表达;培养人类肝星状细胞(LX-2),构建Smurf2表达质粒和小干扰RNA(siRNA),在转化生长因子β1(TGF-β1)作用后,通过WB检测Smurf2过表达和小干扰后对CTGF表达的影响。结果:在大鼠肝纤维化时,Smurf2表达增加,伴有CTGF水平增高;大鼠和人类肝硬化组织中,Smurf2表达反而减少,CTGF表达仍然增加。体外肝星状细胞用TGF-β1处理后,CTGF蛋白水平升高;过表达Smurf2可以阻断CTGF蛋白的合成;抑制Smurf2表达后,CTGF表达持续增加。TGF-β1处理LX-2后可以诱导Smurf2表达内源性轻度增加。结论:Smurf2可以由TGF-β1诱导产生,作为负反馈抑制子抑制肝纤维化过程中CTGF表达的增加。 展开更多
关键词 smad泛素调节因子2 结缔组织生长因子 肝纤维 泛素蛋白水解途径 生长因子Β
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肝细胞生长因子下调Smurf2拮抗肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化 被引量:4
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作者 谭若芸 方奕 +3 位作者 苏卫芳 杨俊伟 张炜 顾民 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期616-621,共6页
目的通过观察肝细胞生长因子(HGF)对正常大鼠肾上皮细胞(NRK-52E)转化生长因子p1(TGF—B1)诱导的Smad泛素化调节因子2(Smurf2)表达的影响,探讨HGF拮抗肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(EMT)的分子机制。方法以NRK。52E细胞... 目的通过观察肝细胞生长因子(HGF)对正常大鼠肾上皮细胞(NRK-52E)转化生长因子p1(TGF—B1)诱导的Smad泛素化调节因子2(Smurf2)表达的影响,探讨HGF拮抗肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(EMT)的分子机制。方法以NRK。52E细胞为研究对象,给予TGF—B1(5μg/L)处理0~24h;或部分细胞经HGF(20μg/L)预处理30min后,再予TGF-β1(5μg,L)处理1h或48h;另外部分细胞予以Smurf2质粒表达载体或Smurf2siRNA转染24h后,再予HGF处理24h。应用Western印迹及间接免疫荧光染色方法检测Smurf2、SnoN、E钙黏蛋白(E—cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(d—SMA)和纤连蛋白(FN)的表达。结果与对照组相比,TGF—β1处理后迅速上调NRK-52E细胞中Smurf2蛋白表达(P〈0.01);同时显著诱导FN和α—SMA蛋白表达,并下调E-cadherin表达。而予HGF预处理细胞后,可快速抑制TGF—β1诱导的Smurf2表达上调(P〈0.01);并逆转TGF-β1介导的SnoN(P〈0.01)、E-cadherin(P〈0.05)、α-SMA(P〈0.01)和FN(P〈0.01)表达变化。此外,在NRK-52E细胞中过表达Smurf2蛋白可部分抑制HGF诱导的SnoN蛋白上调;而抑制Smurf2表达则可进一步促进HGF诱导的SnoN蛋白表达。结论在肾小管上皮细胞中,HGF可能通过下调Smurf2表达抑制SnoN蛋白发生泛素-蛋白酶体依赖性降解,进而拮抗TGF-β1介导EMT形成。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 纤维 生长因子Β1 smad泛素调节因子2 上皮细胞.间充质细胞转分
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MG132对高糖条件下肾小管上皮细胞SnoN蛋白表达及纤维化效应的影响 被引量:4
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作者 石春花 石明隽 +6 位作者 王圆圆 刘丽荣 张昌志 李霜 肖瑛 严瑞 郭兵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期64-68,共5页
目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对高糖培养条件下肾小管上皮细胞核转录共抑制因子Sno N蛋白表达的影响,探讨MG132减轻高糖状态下肾小管纤维化病变的作用及可能机制。方法:将体外培养的NRK-52E细胞分为正常组(NG)、高糖组(HG)和不同浓度MG... 目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对高糖培养条件下肾小管上皮细胞核转录共抑制因子Sno N蛋白表达的影响,探讨MG132减轻高糖状态下肾小管纤维化病变的作用及可能机制。方法:将体外培养的NRK-52E细胞分为正常组(NG)、高糖组(HG)和不同浓度MG132预处理后高糖培养组(HG+MG132),采用免疫荧光双染的方法观察E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾小管上皮细胞中的表达和分布,用Western blotting方法检测Sno N、Samd泛素化调节因子2(Smurf2)、Arkadia、E-cadherin、α-SMA和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)等目标蛋白的相对表达量。结果:与NG组相比,HG组肾小管上皮细胞E-cadherin和Sno N表达减少(P<0.05),而α-SMA、Col-Ⅰ、Smurf2和Arkadia表达增多(P<0.05);与HG组相比,不同浓度MG132预处理肾小管上皮细胞后高糖培养,可见肾小管上皮细胞中Sno N和E-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.05),而α-SMA和Col-Ⅰ蛋白的表达显著下调(P<0.05),并且这种效应呈量效依赖性,但MG132预处理对Smurf2和Arkadia的表达无影响。结论:MG132可对抗高糖介导的肾小管上皮细胞的纤维化效应,其机制可能是通过减少Sno N蛋白的泛素化降解作用实现的。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 高糖 MG132 SnoN蛋白 smad泛素调节因子2 Arkadia蛋白
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SMURF2/β-catenin轴促进张力条件下人牙周膜细胞成骨分化
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作者 张小岑 常茂琳 +2 位作者 邹浩 刘小瑜 韩光丽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期619-624,共6页
目的:探究Smad泛素化调节因子2(SMURF2)在循环牵张力诱导人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化中的作用和机制。方法:对hPDLCs施加循环牵张力刺激后使用qRT-PCR检测SMURF2的表达和成骨相关基因的表达,使用western blotting检测SMURF2和经典WNT... 目的:探究Smad泛素化调节因子2(SMURF2)在循环牵张力诱导人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化中的作用和机制。方法:对hPDLCs施加循环牵张力刺激后使用qRT-PCR检测SMURF2的表达和成骨相关基因的表达,使用western blotting检测SMURF2和经典WNT信号相关分子的表达,通过ALP染色检测hPDLCs的ALP活性,并结合成骨相关基因的表达评估hPDLCs的成骨分化。通过使用小干扰RNA沉默hPDLCs中的SMURF2基因探究SMURF2对牵张力诱导的hPDLCs成骨分化和经典WNT信号的影响。结果:循环牵张力刺激hPDLCs后SMURF2、ALP、OPN、OSX、COL-1和β-catenin表达升高,ALP活性也增强。沉默SMURF2基因后,hPDLCs的ALP活性减弱,ALP、OPN和OSX基因表达水平下降,β-catenin蛋白下降,但GSK-3β蛋白无变化。结论:SMURF2可能通过经典WNT信号通路促进循环牵张力诱导的hPDLCs成骨分化。 展开更多
关键词 循环牵张力 人牙周膜细胞 成骨分 smad泛素调节因子2
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Smurf2与肺纤维化关系研究进展 被引量:2
9
作者 代文静 李万成 《海南医学》 CAS 2017年第24期4053-4055,共3页
Smad泛素化调节因子2(Smurf2)是E3泛素连接酶的一种。研究发现,Smurf2与肺纤维化的发生发展有一定关系,其可选择性作用于Smad蛋白,调节肺纤维化TGF-β1信号传导,进而调控肺纤维化的发展。本文主要就Smurf2与肺纤维化TGF-β1/Smad信号通... Smad泛素化调节因子2(Smurf2)是E3泛素连接酶的一种。研究发现,Smurf2与肺纤维化的发生发展有一定关系,其可选择性作用于Smad蛋白,调节肺纤维化TGF-β1信号传导,进而调控肺纤维化的发展。本文主要就Smurf2与肺纤维化TGF-β1/Smad信号通路的关系研究进展做一综述。 展开更多
关键词 smad泛素调节因子2 肺纤维 TGF-β1/smad信号
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Smad泛素化调节因子2siRNA的筛选及转染原代肾小管上皮细胞条件的优化 被引量:1
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作者 赵海焦 高磊 +5 位作者 陆彦 田娅慧 贾志华 田海燕 吴国娟 张中文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期19-24,共6页
试验旨在优化Smad泛素化调节因子2(Smurf2) siRNA最佳转染条件,筛选最佳siRNA干扰片段,进而实现对Smurf2基因的瞬时沉默,为研究Smurf2基因在马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephrohathy,AAN)中的作用奠定基础。本研究通过培养... 试验旨在优化Smad泛素化调节因子2(Smurf2) siRNA最佳转染条件,筛选最佳siRNA干扰片段,进而实现对Smurf2基因的瞬时沉默,为研究Smurf2基因在马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephrohathy,AAN)中的作用奠定基础。本研究通过培养小鼠原代肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs),并以脂质体LipofectamineTM 2000为转染介质,将Smurf2 siRNA转染入RTECs;通过观察绿色荧光的表达量及Real-time PCR反应优化转染条件,转染后Real-time PCR检测mRNA表达抑制率。CCK-8法检测Smurf2 siRNA复合物对RTECs活性的影响;同时,用Real-time PCR和Western blotting检测不同位点Smurf2 siRNA对Smurf2 表达的影响。结果显示,当Lipofectamine TM 2000与siRNA比例为1.5 μL∶30 pmol时,转染效率最高,为70%~80%;Smurf2-619 siRNA干扰效果最明显;与正常组相比,转染siRNA组的Smurf2蛋白表达水平显著下降(P〈0.05)。最终确定了Smurf2 siRNA最佳转染条件,其中Smurf2-619 siRNA对Smurf2 表达的抑制率最高。 展开更多
关键词 smad泛素调节因子2 转染 SIRNA 肾小管上皮细胞
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2型糖尿病大鼠肾组织Smurf2和SnoN表达的变化及生物学意义 被引量:1
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作者 郭兵 崔龙 +3 位作者 刘瑞霞 肖瑛 石明隽 张国忠 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期299-301,共3页
目的研究Smad泛素化调节因子2(Smurf2)和核转录共抑制因子(SnoN)在T2DM大鼠肾组织中表达的动态变化及意义。方法建立T2DM模型,于成模8、12和16周处死。免疫组化和Western blot测肾组织Smurf2、SnoN、Tβ1和Smad2蛋白的表达;RT-PCR测肾皮... 目的研究Smad泛素化调节因子2(Smurf2)和核转录共抑制因子(SnoN)在T2DM大鼠肾组织中表达的动态变化及意义。方法建立T2DM模型,于成模8、12和16周处死。免疫组化和Western blot测肾组织Smurf2、SnoN、Tβ1和Smad2蛋白的表达;RT-PCR测肾皮质SnoN mRNA。结果 DM大鼠肾组织Smurf2蛋白表达增多(P<0.01),而SnoN蛋白的表达随病程进展逐渐减少(P<0.05),两者呈显著负相关(r=-0.71,P<0.01);SnoN mRNA在各组肾组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 T2DM肾病发病过程中,Smurf2蛋白的表达增加可能参与了SnoN蛋白的降解过程。 展开更多
关键词 smad泛素调节因子2 SNON 糖尿病 2
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肺纤维化大鼠肺组织Smurf2表达变化及意义 被引量:1
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作者 代文静 何彬普 +3 位作者 孙建 邱静 马春兰 李万成 《山东医药》 CAS 2018年第12期39-41,共3页
目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在肺纤维化发生、发展中的作用。方法将96只SD大鼠随机分为对照组、模型组、MG132组和DMSO组,每组24只;后三组气管内一次性注入博莱霉素溶液0.3 m L(5 mg/kg)制备肺纤维化模型。次日起,MG132组每天... 目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在肺纤维化发生、发展中的作用。方法将96只SD大鼠随机分为对照组、模型组、MG132组和DMSO组,每组24只;后三组气管内一次性注入博莱霉素溶液0.3 m L(5 mg/kg)制备肺纤维化模型。次日起,MG132组每天腹腔注射蛋白酶体抑制剂MG132 0.3 m L(0.1 mg/kg),DMSO组每天腹腔注射等量DMSO,模型组及对照组每天腹腔注射等量生理盐水。各组于造模后第7、14、28天观察大鼠一般情况,并分别处死大鼠8只,取肺组织,制备肺组织石蜡切片,进行Masson染色,采用免疫组化法检测TGF-β_1、Smurf2、Smad7表达。结果造模第7、14、28天模型组、MG132组和DMSO组肺组织Masson染色面积均逐渐增加,且均大于对照组,MG132组均低于模型组、DMSO组,组间比较P均<0.05。造模第7、14、28天模型组、MG132组和DMSO组肺组织TGF-β_1、Smurf2表达的积分光密度(IOD)值逐渐升高,MG132组均低于模型组、DMSO组;模型组、MG132组和DMSO组肺组织Smad7表达的IOD值逐渐降低,MG132组均高于模型组、DMSO组;组间比较P均<0.05。模型组和DMSO组各时间点上述各指标比较P均>0.05。肺组织Smurf2表达与胶原纤维染色面积及TGF-β_1表达均呈正相关(r分别为0.763、0.623,P均<0.05),与Smad7表达呈负相关(r=-0.645,P<0.05)。结论肺纤维化大鼠肺组织中Smurf2表达增加,并通过调控TGF-β_1/Smad7信号传导促进肺纤维化的发生、发展。 展开更多
关键词 肺纤维 smad泛素调节因子2 生长因子Β1 大鼠
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IgA肾病大鼠肾Smurf2与TGF-β1表达的关系及其意义 被引量:5
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作者 任荣 张艳 +2 位作者 张静 张蕾 梁新华 《中国临床研究》 CAS 2018年第6期721-724,共4页
目的明确免疫球蛋白(IgA)肾病大鼠Smad泛素化调节因子2(Smurf2)与转化生长因子β1(TGF-β1)表达的部位、关系,及其对肾脏病变的影响。方法将27只4~6周龄雄性SD大鼠,随机分成3组,分别为正常对照组,轻度系膜增生组及中重度系膜增生组,每组... 目的明确免疫球蛋白(IgA)肾病大鼠Smad泛素化调节因子2(Smurf2)与转化生长因子β1(TGF-β1)表达的部位、关系,及其对肾脏病变的影响。方法将27只4~6周龄雄性SD大鼠,随机分成3组,分别为正常对照组,轻度系膜增生组及中重度系膜增生组,每组9只,使用牛血清+脂多糖+四氯化碳方法制造IgA肾病模型,并使用原位免疫荧光方法观察Smurf2及TGF-β1蛋白表达部位。使用qRT-PCR方法及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别进行Smuf2、TGF-β1 mRNA及蛋白质表达。结果 (1)IgA肾病模型造模成功,中重度系膜增生组系膜增生程度和肾间质基质增生纤维化程度较轻度系膜增生组明显,正常对照组无系膜增生、间质基质增生纤维化改变。IgA肾病组系膜在可见IgA颗粒性沉积,以中重度系膜增生组明显,正常对照组阴性。(2)Smurf2和TGF-β1主要在IgA肾病肾小球表达,其次在肾小管表达,正常对照组偶见表达,二者表达量呈正相关。(3)Smurf2 mRNA和TGF-β1 mRNA在IgA肾病组表达较对照组增加,且在中重度系膜增生组表达最多。结论 IgA肾病Smurf2主要在肾小球表达,与TGF-β1表达部位及趋势相同,随着系膜增生程度加重,表达增多,Smurf2表达可能通过兴奋TGF-β1/Smad信号通路在IgA肾病肾小球硬化及间质纤维化方面起促进作用。 展开更多
关键词 免疫球蛋白A肾病 smad泛素调节因子 生长因子β1 肾脏纤维 TGF-β1/smad信号途径
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脉冲电磁场抗骨质疏松作用及对Smurf1表达的影响 被引量:3
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作者 孙智路 尹剑 +2 位作者 黄开亮 谭位华 刘静 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1093-1097,共5页
目的研究脉冲电磁场(PEMF)对去卵巢骨质疏松(OVX-OP)大鼠的作用及机制。方法将6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(M组,双侧卵巢切除)、雌激素治疗组(E组,M组基础上进行雌激素治疗)和PEMF组(M组基础上进行PEMF治疗),每组各10... 目的研究脉冲电磁场(PEMF)对去卵巢骨质疏松(OVX-OP)大鼠的作用及机制。方法将6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(M组,双侧卵巢切除)、雌激素治疗组(E组,M组基础上进行雌激素治疗)和PEMF组(M组基础上进行PEMF治疗),每组各10只,术后饲养8周后进行治疗,治疗持续8周。称取治疗前后各组大鼠体重;采用双能X射线实验动物骨密度测定仪检测各组大鼠右肱骨骨密度。治疗结束后,采用半自动图像数字化分析仪对胫骨上1/3作静态骨形态计量学检测;采用免疫印迹(WB)检测各组大鼠骨组织Smad泛素化调节因子1(Smurf1)蛋白表达量。结果与S组比较,M组、E组、PEMF组精神状况欠佳,饮食、活动及大小便未见异常。治疗前,与S组比较,M组、E组、PEMF组大鼠体重显著增加(P<0.05),骨密度值显著降低(P<0.05)。治疗后,E组、PEMF组大鼠体重显著降低(P<0.05),骨密度值较治疗前显著增加(P<0.05);与S组比较,M组大鼠骨密度值、BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著降低(P<0.05),体重、Tb.Sp、Smurf1蛋白水平显著增加(P<0.05);与M组比较,E组、PEMF组大鼠骨密度值、BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著升高(P<0.05),体重、Tb.Sp、Smurf1蛋白水平显著降低(P<0.05);E组与PEMF组比较,大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论PEMF可增加骨密度、改善骨形态变化,发挥抗骨质疏松的作用,可能与Smurf 1蛋白表达下调有关。 展开更多
关键词 骨质疏松 脉冲电磁场 smad泛素调节因子1
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Smad泛素化调节因子2对人胚胎眼巩膜成纤维细胞TGF-β1/Smads信号通路和I型胶原表达的影响 被引量:1
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作者 陈婷 陈丽娟 陈银河 《福建医药杂志》 CAS 2022年第2期110-113,F0004,共5页
目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导后对人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)分泌Smads蛋白、I型胶原α1(COLIA1)的影响,探讨泛素化在巩膜重塑中的作用。方法HFSFs复苏并稳定传代后,免疫组化(IHC)法检测细... 目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导后对人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)分泌Smads蛋白、I型胶原α1(COLIA1)的影响,探讨泛素化在巩膜重塑中的作用。方法HFSFs复苏并稳定传代后,免疫组化(IHC)法检测细胞中Smurf2的表达。将HFSFs细胞分别设空白对照组、TGF-β1组(加入10 ng/mL TGF-β1)、Control siRNA转染组(10 ng/mL TGF-β1+Control siRNA)及Smurf2 siRNA转染组(10ng/mL TGF-β1+Smurf2 siRNA)。Western Blot法检测COLIA1蛋白表达水平。RT-PCR法检测各组细胞中Smurf2、Smad2、Smad3和Smad7的mRNA表达水平。结果IHC结果显示,HFSFs中有Smurf2蛋白表达。TGF-β1诱导HFSFs中COLIA1蛋白显著性高表达,而当Smurf2被抑制时,COLIA1蛋白表达受抑制。与空白对照组比较,Smad7 mRNA表达水平呈上升趋势,差异有统计意义(P<0.05),但Smad7蛋白表达水平与PCR结果不完全相同;各培养组中Smad2和Smad3 mRNA和蛋白表达水平,与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Smurf2表达于HFSFs细胞中,且随着Smurf2表达减少,HFSFs细胞中Smad7蛋白含量呈上升趋势,COLIA1含量呈下降趋势。提示Smurf2可能通过作用于TGF-β1/Smads信号通路参与了巩膜重塑过程。 展开更多
关键词 smad泛素调节因子2(Smurf2) 人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs细胞) TGF-β1/smad通路 近视
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Smad泛素化调节因子1与胃腺癌发生相关性研究
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作者 王曦 张红军 +2 位作者 胡永胜 栾涛 李英慧 《武警后勤学院学报(医学版)》 CAS 2014年第8期643-645,649,共4页
【目的】探讨Smad泛素化调节因子1(Smad ubiquitination regulatory factor 1,SMURF1)在胃腺癌中的表达水平,从而证明其在胃腺癌发生中的可能作用。【方法】以相应癌旁正常组织为对照,应用实时定量聚合酶链式反应方法和Western blottin... 【目的】探讨Smad泛素化调节因子1(Smad ubiquitination regulatory factor 1,SMURF1)在胃腺癌中的表达水平,从而证明其在胃腺癌发生中的可能作用。【方法】以相应癌旁正常组织为对照,应用实时定量聚合酶链式反应方法和Western blotting印迹杂交方法检测101例胃腺癌组织中SMURF1 mRNA和蛋白表达水平,并应用统计学方法比较组间差异。【结果】肿瘤组SMURF1 mRNA表达水平均值为0.921±0.293,癌旁组织均值为0.611±0.251,在检测的101例标本中,肿瘤组织SMURF1mRNA水平高于相应癌旁组织的有71例,占70%;肿瘤组SMURF1蛋白表达均值为0.665±0.223,癌旁组织为0.416±0.203,肿瘤组织SMURF1蛋白表达高于相应癌旁组织的有78例,占77%。经统计分析,SMURF1 mRNA与蛋白表达水平肿瘤组与对照组组间差异均显著(P<0.05)。【结论】胃腺癌中SMURF1表达水平升高,其可能在胃腺癌的发生中发挥一定作用。 展开更多
关键词 胃腺癌 smad泛素调节因子1 表达
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补肾中药对肾虚骨质疏松症大鼠骨、肾、下丘脑组织中Smurf1/Smurf2的mRNA表达影响 被引量:16
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作者 尚德阳 邓洋洋 +1 位作者 孙鑫 郑洪新 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期3629-3633,共5页
目的:探讨摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究补肾中药防治疗效及其作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用具有补肾壮骨益精作用的补肾中药(高、低剂量)对实验大鼠治疗12周,以骨疏康颗粒剂、... 目的:探讨摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究补肾中药防治疗效及其作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用具有补肾壮骨益精作用的补肾中药(高、低剂量)对实验大鼠治疗12周,以骨疏康颗粒剂、盖天力片作为阳性对照组,正常大鼠、假手术组作为标准对照组,模型大鼠作为空白对照组。用RT-PCR法检测肾虚骨质疏松症大鼠骨、肾、下丘脑组织中Smurf1/Smurf2的m RNA表达。结果:与模空组相比较,补肾中药高、低剂量组可不同程度上调骨、肾组织中Smurf1/Smurf2的m RNA表达水平(P<0.01),并明显下调在下丘脑组织中Smurf1/Smurf2的m RNA表达水平(P<0.01),其中,补肾中药高剂量组效果最佳(P<0.05,P<0.01)。结论:骨质疏松症的发生,可能与骨、肾、下丘脑组织中Smurf1/Smurf2的m RNA表达的异常变化有关;补肾中药通过调控骨、肾、下丘脑组织中Smurf1/Smurf2的m RNA表达,对于骨质疏松症有一定的防治作用。 展开更多
关键词 骨质疏松症 肾虚 smad泛素调节因子1 smad泛素调节因子2 补肾中药
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补肾中药对肾虚骨质疏松症大鼠肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达影响研究 被引量:13
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作者 尚德阳 郑洪新 +3 位作者 宗志宏 孙鑫 燕燕 王思程 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第8期1684-1687,共4页
目的:通过研究摘除卵巢致肾虚骨质疏松症大鼠肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白的表达,揭示摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究补肾中药防治疗效及其作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用具有补肾... 目的:通过研究摘除卵巢致肾虚骨质疏松症大鼠肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白的表达,揭示摘除卵巢致肾虚骨质疏松症的病理机制,并研究补肾中药防治疗效及其作用机制。方法:摘除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用具有补肾壮骨益精作用的补肾中药(高、低剂量)对实验大鼠治疗12周,以骨疏康颗粒剂、盖天力片作为阳性对照组,正常大鼠、假手术组作为标准对照组,模型大鼠作为空白对照组,并与补脾中药作疗效的比较。用RT-PCR法、Western印迹法检测肾虚骨质疏松症大鼠肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达。结果:RT-PCR及Western方法检测,正常大鼠肾组织中存在Smurf2的mRNA和蛋白表达;与正常组、假手术组比较,模空组Smurf2 mRNA和蛋白的表达水平在肾组织中明显降低。用药12周后,与模空组比较,补肾高、低剂量组、盖天力组可明显上调Smurf2 mRNA和蛋白在肾组织中的表达水平。其中补肾高剂量组上调幅度大于补肾低剂量组。结论:①正常大鼠肾组织中Smurf2可以在基因、蛋白水平表达;②骨质疏松症的发生,可能与肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达的异常变化有关;③补肾中药通过调控肾组织中Smurf2的mRNA和蛋白表达,对于骨质疏松症有一定的防治作用。 展开更多
关键词 骨质疏松症 肾虚 smad泛素调节因子2
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绝经后骨质疏松患者血清SIK2,SMURF1表达水平及其与骨代谢、骨密度指标的相关性研究
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作者 高艳超 王岩 +1 位作者 柳越 孙永艳 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第4期110-115,共6页
目的探讨绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者血清盐诱导激酶2(salt-inducible kinase 2,SIK2)、Smad泛素化调节因子1(Smad ubiquitination regulatory factor 1,SMURF1)表达水平与骨代谢、骨密度的相关性。方法选取... 目的探讨绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)患者血清盐诱导激酶2(salt-inducible kinase 2,SIK2)、Smad泛素化调节因子1(Smad ubiquitination regulatory factor 1,SMURF1)表达水平与骨代谢、骨密度的相关性。方法选取朝阳市第二医院2019年4月~2021年4月收治的154例绝经后骨质疏松患者作为研究组,另选取该院同期体检的绝经后健康女性150例作为对照组。用定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测两组血清SIK2和SMURF1相对表达水平;Pearson相关分析明确血清SIK2,SMURF1与骨代谢指标、骨密度的相关性;Logistic回归分析绝经后骨质疏松的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SIK2和SMURF1对绝经后骨质疏松的预测价值。结果与对照组相比,研究组腰椎L1~4骨密度(0.71±0.20 g/cm^(3)vs 0.86±0.21 g/cm^(3))、25羟基维生素D[(25-hydroxyvitamin D,25-OH-D)(12.07±2.76 ng/ml vs 14.31±2.62 ng/ml)]和股骨颈骨密度(0.61±0.18 g/cm^(3)vs 0.82±0.19 g/cm^(3))水平均显著降低,差异均有统计学意义(t=6.378,7.254,9.895,均P<0.001);血清骨桥蛋白(osteopontin,OPN)(18.67±3.17 ng/ml vs 16.78±2.69 ng/ml)、甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)(71.26±8.88 pg/ml vs 64.31±8.24 pg/ml)、SIK2(0.94±0.16 vs 0.79±0.17)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(bate C-terminal cross-linked telopeptids of typeⅠcollagen,β-CTx)(5.12±0.96 pg/ml vs 4.28±0.84 pg/ml)、骨钙素(osteocalcin,OC)(15.64±2.73 ng/ml vs 13.28±2.14 ng/ml)、Ⅰ型胶原氨基端前肽(N-terminal propeptide of typeⅠprocollagen,PINP)(41.28±4.68 ng/ml vs 36.47±4.62 ng/ml)及SMURF1(0.93±0.22 vs 0.66±0.16)水平显著升高,差异均有统计学意义(t=5.598~11.759,均P<0.001)。血清SIK2,SMURF1与OPN,OC,SMURF1,β-CTx,PINP均呈正相关(rSIK2=0.169~0.292,rSMURF1=0.194~0.246,均P<0.05);血清SIK2,SMURF1与25-OH-D,股骨颈骨密度呈负相关(rSIK2=-0.212,-0.210;rSMURF1=-0.285,-0.252,均P<0.05)。股骨颈骨密度(OR= 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松 盐诱导激酶2 smad泛素调节因子1 骨代谢 骨密度
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特发性肺纤维化中Smurf2对TGF—β1/Smad通路调控机制 被引量:3
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作者 邱静 李万成 《国际呼吸杂志》 2016年第15期1183-1186,共4页
特发性肺纤维化是肺间质纤维化的主要原因,为最常见的间质性肺疾病。其主要病理特点为大量成纤维细胞、肌成纤维细胞集聚、增殖。近年来研究表明转化生长因子B。(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在肺纤维化的形成与发展中... 特发性肺纤维化是肺间质纤维化的主要原因,为最常见的间质性肺疾病。其主要病理特点为大量成纤维细胞、肌成纤维细胞集聚、增殖。近年来研究表明转化生长因子B。(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在肺纤维化的形成与发展中起关键性作用。Smad蛋白是参与TGF-β1信号细胞内传导的一类信号蛋白,是TGF-β1信号传导重要通路。近年来发现Smad泛素调节因子2(Smad ubiquitination regulatory factor 2,Smurf2)可选择性作用于Smad蛋白,进而调控TGF-β信号传导。本文就特发性肺纤维化中Smurf2对TGF-β1/Smad通路的调控机制作一综述。 展开更多
关键词 特发性肺纤维 生长因子β1 smad蛋白 smad泛素调节因子2
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