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PM2．5对HaCaT细胞的损伤作用及机制研究 被引量：4
1
作者 熊书晗 武月婷 +3 位作者 孟繁竹 王元 侯宝莲 任淑萍 《医学临床研究》 CAS 2017年第10期1900-1903,共4页
【目的】探讨PM2.5对人永生化角质形成细胞（HaCaT）的损伤作用及NF-κB抑制剂PDTC对PM2.5致HaCaT细胞损伤作用的影响。【方法】将HaCaT细胞分别PM2.5、PDTC、PM2.5＋PDTC共孵育24h,同时设不加任何处理因素的正常组。24 h后收集细胞,测... 【目的】探讨PM2.5对人永生化角质形成细胞（HaCaT）的损伤作用及NF-κB抑制剂PDTC对PM2.5致HaCaT细胞损伤作用的影响。【方法】将HaCaT细胞分别PM2.5、PDTC、PM2.5＋PDTC共孵育24h,同时设不加任何处理因素的正常组。24 h后收集细胞,测定细胞内丙二醛（MDA）含量、活性氧（ROS）水平、 超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）的活性以及NF-κB p65的蛋白表达情况。【结果】HaCaT细胞的存活率随PM2.5浓度的增加而下降,浓度为200、400、800μg/mL组的细胞存活率明显低于正常组（P〈0.05）。PM2.5组细胞中MDA含量、ROS水平和NF-κB p65蛋白表达水平显著高于正常组、PDTC组和PM2.5＋PDTC组（P〈0.05）,SOD、GSH-Px的活性显著低于上述各组（P〈0.05）。PM2.5＋PDTC组细胞中MDA含量、ROS水平和NF-κB p65蛋白表达水平显著高于正常组和PDTC 组。【结论】PM2.5能够降低HaCaT细胞的存活率。PM2.5能够对HaCaT细胞造成氧化损伤,而PDTC能够缓解这种损伤作用。应用NF-κB抑制剂PDTC可以特异性抑制NF-κB的表达,在一定程度上减轻PM2.5对HaCaT细胞的损伤作用。 展开更多
关键词 颗粒物 皮肤/细胞学 角蛋白细胞 NF-ΚB 细胞凋亡
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人皮肤成纤维细胞来源诱导性多潜能干细胞的建立和鉴定 被引量：2
2
作者 蒋知新 张清华 +3 位作者 艾民 沙杭 高毅 卢海 《中国医师杂志》 CAS 2011年第8期1026-1029,1032,共5页
目的建立和鉴定人皮肤成纤维细胞（HSF）来源的诱导性多潜能干细胞（iPS）。方法利用逆转录病毒将Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因导入原代HSF细胞，将其编程为iPS细胞。检测细胞内源、外源基因表达量，鉴定外源基因是否插入iPS细胞，分析... 目的建立和鉴定人皮肤成纤维细胞（HSF）来源的诱导性多潜能干细胞（iPS）。方法利用逆转录病毒将Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因导入原代HSF细胞，将其编程为iPS细胞。检测细胞内源、外源基因表达量，鉴定外源基因是否插入iPS细胞，分析细胞核型，细胞碱性磷酸酶染色和免疫荧光染色，体内分化畸胎瘤，体外分化拟胚体实验，对建立的iPS细胞进行鉴定。结果（1）iPS细胞形态类似于胚胎干细胞（ES）。（2）iPS细胞内源多能基因（Nanog、Oct4、Rexl、Sox2）表达量增高，外源编程基因（Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc）表达量降低。（3）琼脂糖凝胶电泳实验证实外源基因插入iPS细胞核内。（4）iPS细胞核型正常，碱性磷酸酶活性增高，表达ES细胞特异性蛋白。（5）iPS细胞在体内能分化为畸胎瘤，在体外能分化为拟胚体。结论新建立的iPS细胞类似于ES细胞具有多向分化潜能。 展开更多
关键词 皮肤/细胞学 成纤维细胞 多能干细胞 细胞培养技术
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脂多糖对人正常皮肤成纤维细胞增殖周期及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响 被引量：1
3
作者 王舒琦 李凤玉 +3 位作者 万立 闫淑英 张建宇 杨红明 《中国医师杂志》 CAS 2011年第7期865-868,共4页
目的观察大肠杆菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激后，皮肤成纤维细胞增殖周期和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达变化规律。方法体外培养正常人皮肤成纤维细胞，加入不同浓度（0．005～1．0μg／m1）的大肠杆菌LPS（Ecoli055：B5），于LP... 目的观察大肠杆菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激后，皮肤成纤维细胞增殖周期和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达变化规律。方法体外培养正常人皮肤成纤维细胞，加入不同浓度（0．005～1．0μg／m1）的大肠杆菌LPS（Ecoli055：B5），于LPS加入后第7天细胞处于对数生长期时，采用流式细胞术观察细胞增殖周期；用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及胶原酶mRNA的表达。结果LPS刺激浓度在0．005～0．1μg／ml时，S期细胞比例随着刺激浓度增加而增高，且呈浓度依赖性；当LPS浓度为0．5μg／ml时，上述作用开始降低，但仍高于空白对照；当浓度达到1．0μg／ml时，s期细胞比例均低于空白对照；LPS刺激浓度在0．005～0．1μg／ml时，促进正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达，抑制胶原酶mRNA表达，且呈一定的剂量依赖性；当LPS刺激浓度为0．5μg／ml，上述作用下降；而当LPS刺激浓度到达1．0μg/ml时，抑制正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达，促进胶原酶mRNA表达。结论在一定浓度范围内LPS促进皮肤成纤维细胞增殖和胶原合成，而过高浓度LPS则呈现抑制效应。 展开更多
关键词 脂多糖类/药理学 皮肤/细胞学/药物作用/代谢 成纤维细胞/代谢/病理学/药物 作用 细胞增殖 胶原Ⅰ型/代谢 胶原Ⅲ型/代谢
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脂多糖对人皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响
4
作者 李凤玉 王舒琦 +2 位作者 贾国洪 万立 杨红明 《中国医师杂志》 CAS 2012年第1期1-4,共4页
目的探讨脂多糖（1ipopolysaccharide，LPS）对人皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响，以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法取正常皮肤行成纤维细胞培养后，分为1个对照组及6个实验组。实验组分别与终浓度为0．005、0．010、0．05... 目的探讨脂多糖（1ipopolysaccharide，LPS）对人皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响，以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法取正常皮肤行成纤维细胞培养后，分为1个对照组及6个实验组。实验组分别与终浓度为0．005、0．010、0．050、0．100、0．500和1．000μg／ml大肠杆菌LPS（Ecoli055：B5）培养，对照组DMEM培养。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及胶原酶mRNA的表达，并以同一个体相同代数的瘢痕组织成纤维细胞做对照。结果与对照组比较，LPS刺激浓度在0．005-0．1μg／ml时，促进正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达（0．323±0．041，0．303±0．063，0．391±0．071，0．344±0．086，0．488±0．059，0．401±0．087，0．616±0．107，0．434±0．084，0．823±0．092，0．542±0．082），抑制胶原酶mR-NA表达（0．598±0．068，0．556±0．049，0．441±0．043，0．372±0．083，0．260±0．027），且呈一定的剂量依赖性；当LPS刺激浓度为0．5μ／ml，上述作用下降（0．451±0．063，0．374±0．072，0．360±0．062）；而当LPS刺激浓度到达1．0μg/ml时，抑制正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达（0．162±0．025，0．171±0．061），促进胶原酶mRNA表达（0．444±0．114）。LPS刺激浓度在0．1μg／ml时，成纤维细胞（0．823±0．092，0．542±0．082，0．260±0．027）Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达与同一个体增生性瘢痕组织成纤维细胞（0．829±0．049，0．569±0．038，0．277±0．059）近似。结论LPS对人皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA的表达，其直接调节可能是参与增生性瘢痕形成的重要机制。 展开更多
关键词 脂多糖类/药理学 胶原/代谢 皮肤/细胞学/药物作用 成纤维细胞/代谢/药物作用
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