异源双链分析和单链构象多态性分析在基因突变检测中的作用 被引量：1

1

作者 刘晓军 郭辰虹 +3 位作者 邹雅群 卢勇 陈丙玺 龚瑶琴 《山东医科大学学报》 2001年第2期167-168,共2页

目的 :评价异源双链分析 (HET)和单链构象多态性分析 (SSCP)在基因突变检测中的作用。方法 :同时应用两种方法检测 2 3例肺腺癌标本中 p53基因和 p16基因突变情况。 结果 :用HET法检出 6例p53基因突变和 5例 p16基因突变 ,用SSCP法检出 ... 目的 :评价异源双链分析 (HET)和单链构象多态性分析 (SSCP)在基因突变检测中的作用。方法 :同时应用两种方法检测 2 3例肺腺癌标本中 p53基因和 p16基因突变情况。 结果 :用HET法检出 6例p53基因突变和 5例 p16基因突变 ,用SSCP法检出 3例 p53基因突变和 1例 p16基因突变 ,联合应用HET和SSCP方法检出 7例 p53基因突变和 5例 p16基因突变。 结论 :检测基因突变HET优于SSCP ,联合应用HET和SSCP能提高基因突变检出率。 展开更多

关键词 异源双链分析 单链构象多态性分析 基因P53 基因突变 基因P16 DNA突变分析

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广东地区汉族人MBL基因GGC54GAC点突变的初步筛查 被引量：8

2

作者 王方勇 陈政良 +2 位作者 吕成伟 张丽芸 卢晓 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第B06期1-3,6,共4页

目的　对广东地区汉族人群的甘露聚糖结合凝集素结构基因第一外显子第 5 4位密码点突变 (GGC5 4GAC)进行初步筛查。方法　提取外周血白细胞DNA进行相应片段的PCR扩增 ,再对产物进行单链构象多态性分析。结果　在 16 6人中查出野生型纯合... 目的　对广东地区汉族人群的甘露聚糖结合凝集素结构基因第一外显子第 5 4位密码点突变 (GGC5 4GAC)进行初步筛查。方法　提取外周血白细胞DNA进行相应片段的PCR扩增 ,再对产物进行单链构象多态性分析。结果　在 16 6人中查出野生型纯合子 14 7例 ,占 88.5 5 % ,GGC5 4GAC突变杂合子 19例 ,占 11.4 5 % ,未发现GGC5 4GAC突变纯合子。结论　广东地区汉族人群MBL基因GGC5 4GAC突变频率为 0 .0 5 7。 展开更多

关键词 广东地区 汉族人 MBL基因 GGC54GAC点突变 甘露聚糖结合凝集素 单链构象多态性分析

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妊娠期肝内胆汁淤积症MDR3基因突变的研究 被引量：3

3

作者 刘玉凌 乔福元 +2 位作者 刘海意 唐红菊 秦惠芬 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2006年第4期283-285,共3页

目的:了解妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者MDR3基因外显子突变的分布,探讨此基因在ICP发病机制中的作用。方法:收集30例ICP孕妇,检测其肝功能、血清总胆汁酸(TBA)、γ-谷胺酰转肽酶(γ-GT)水平,同时用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SS... 目的:了解妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者MDR3基因外显子突变的分布,探讨此基因在ICP发病机制中的作用。方法:收集30例ICP孕妇,检测其肝功能、血清总胆汁酸(TBA)、γ-谷胺酰转肽酶(γ-GT)水平,同时用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析ICP患者MDR3基因5个外显子的突变情况。结果:4例ICP孕妇血清γ-GT升高。所有ICP患者及60例正常妊娠妇女PCR均扩增出目的片段,但SSCP分析没有发现异常迁移条带。结论:在MDR3基因突变频率较高的5个外显子中,本地区ICP孕妇未发现有突变。MDR3基因突变可能不是本地区ICP患者发病的主要原因。 展开更多

关键词 妊娠期肝内胆汁淤积症 基因 MDR3 Γ-谷氨酰转肽酶 聚合酶链反应 单链构象多态分析

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胆盐输出泵基因多态性与特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积的关系 被引量：3

4

作者 邓亚楠 王琳琳 +4 位作者 陈秀奇 唐清 高国鹏 单庆文 云翔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期1497-1499,1505,共4页

目的探讨特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积患儿胆盐输出泵(BSEP)基因的突变情况。方法收集2008年10月-2010年2月就诊于广西医科大学第一附属医院儿科的婴儿胆汁瘀积性肝炎患儿81例(病例组),48例无肝内胆汁瘀积、肝功能正常的婴儿为对照组。... 目的探讨特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积患儿胆盐输出泵(BSEP)基因的突变情况。方法收集2008年10月-2010年2月就诊于广西医科大学第一附属医院儿科的婴儿胆汁瘀积性肝炎患儿81例(病例组),48例无肝内胆汁瘀积、肝功能正常的婴儿为对照组。提取病例组和对照组儿童外周血DNA,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和DNA测序技术检测BSEP基因上2、3、4、5、6、9、10、16、17、23、24外显子基因多态性,分析BSEP基因多态性与特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积之间的关系。结果在外显子24上检测到BSEP A1028A同义突变,编码的氨基酸未改变,均为丙氨酸;其他10个外显子均未发现异常突变。A1028A基因型在病例组,CC型53例(占65.4%),TC型28例(占34.6%),C等位基因频率为82.7%;对照组中CC型32例(占66.7%),TC型16例(占33.3%),C等位基因频率为83.3%。二组基因型差异经Fisher's精确概率法检验,差异无统计学意义(P>0.05);等位基因频率经Fisher's精确概率法检验,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论尚不能认为BSEP A1028A是特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积的一个危险因素。BSEP A1028A与特发性婴儿肝炎肝内胆汁瘀积发生的易感性无关。 展开更多

关键词 胆盐输出泵基因 肝内胆汁瘀积 单链构象多态性分析 婴儿

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散发性大肠癌中hMSH2基因突变研究 被引量：3

5

作者 赵昌 唐卫中 +1 位作者 高枫 李卫 《广西医科大学学报》 CAS 2010年第1期11-14,共4页

目的:探讨错配修复基因hMSH2在散发性大肠癌发生中的作用。方法:应用酚/氯仿法提取44例结直肠癌组织及其相应正常黏膜组织的DNA,用聚合酶链反应和单链构象多态性分析(SSCP)、DNA测序等方法对基因hMSH2外显子5、6、13、15进行突变情况检... 目的:探讨错配修复基因hMSH2在散发性大肠癌发生中的作用。方法:应用酚/氯仿法提取44例结直肠癌组织及其相应正常黏膜组织的DNA,用聚合酶链反应和单链构象多态性分析(SSCP)、DNA测序等方法对基因hMSH2外显子5、6、13、15进行突变情况检测,并结合临床病理资料进行分析。结果:44例散发性大肠癌患者中,2例发生hMSH2基因突变,突变率为4.54%。不同临床病理分期的hMSH2基因突变率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:hMSH2基因可能在散发性大肠癌发生过程中起到一定作用,hMSH2基因突变与散发性大肠癌的临床病理分期无关。 展开更多

关键词 散发性大肠癌 HMSH2 聚合酶链反应 单链构象多态性分析

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生长激素相关基因突变与原发闭经的关系 被引量：2

6

作者 刘学飞 杨真荣 +3 位作者 王慧 周波 陈燕 唐艳平 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期472-474,共3页

目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系。方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测。结果有33例原发... 目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系。方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测。结果有33例原发闭经患者出现染色体核型异常,1例出现GHRHR基因点突变,且该突变位点在第7个外显子中。结论GHRHR基因第7个外显子的点突变可能是原发闭经的病因之一。 展开更多

关键词 原发闭经 单链构象多态性分析 生长激素 生长激素释放激素受体

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急性淋巴细胞白血病患儿T细胞受体γ基因重排的检测及临床意义 被引量：1

7

作者 何云燕 罗建明 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期1151-1152,1189,共3页

目的探讨儿童ALL患者初诊时T细胞受体γ(TCRγ)基因的重排方式,病程中是否发生了克隆演化,并探讨其临床意义。方法选择2004年9月-2007年9月在广西医科大学第一附属医院儿科确诊的ALL患儿70例。男51例,女19例;平均年龄8.5(2～14)岁。采用... 目的探讨儿童ALL患者初诊时T细胞受体γ(TCRγ)基因的重排方式,病程中是否发生了克隆演化,并探讨其临床意义。方法选择2004年9月-2007年9月在广西医科大学第一附属医院儿科确诊的ALL患儿70例。男51例,女19例;平均年龄8.5(2～14)岁。采用酚/酚-异戊醇-氯仿/异戊醇法从骨髓细胞或静脉血细胞中提取DNA。通过多聚酶链反应及单链构象多态性分析,确定ALLTCRγ基因的重排方式。结果70例中23例初诊时检测出TCRγ基因重排。23例中10例完全缓解时仍可检出TCRγ基因重排,且对化疗药物敏感性差。23例中4例存在寡/亚克隆重排。23例中2例存在克隆演化,预后欠佳。结论病程中TCRγ基因的重排方式反映了白血病细胞的不断演化。发生演化的寡/亚克隆在缓解期持续存在,并进一步增殖从而导致临床复发。通过TCRγ基因的检测对ALL患儿的预后、复发的判断及制定相应的个体化治疗方案有重要的指导意义,可使患儿最大程度的达到长期无病生存,减少化疗导致的远期不良反应。 展开更多

关键词 淋巴细胞白血病 急性 单链构象多态性分析 单克隆 寡克隆 克隆演化 儿童

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遗传性对称性色素异常症一家系基因突变分析

8

作者 邱宇芬 李敏 +1 位作者 易恒安 叶冬晴 《齐齐哈尔医学院学报》 2013年第23期3499-3500,共2页

目的研究发现一家系遗传性对称性色素异常症的致病基因突变情况。方法收集临床患者家系成员血样并抽提基因组DNA,通过PCR及突变检测致病基因的方法,分析基因的突变位点。结果该家系患者DSRAD基因12号外显子发生基因突变,表现为第2887位... 目的研究发现一家系遗传性对称性色素异常症的致病基因突变情况。方法收集临床患者家系成员血样并抽提基因组DNA,通过PCR及突变检测致病基因的方法,分析基因的突变位点。结果该家系患者DSRAD基因12号外显子发生基因突变,表现为第2887位G缺失。结论该遗传性对称性色素异常症家系患者中存在致病基因突变,表现为碱基缺失。 展开更多

关键词 遗传性对称性色素异常症 DSRAD基因突变 单链构象多态性分析

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毛细管电泳-单链构象多态性分析技术

9

作者 刘春江 夏涵 +1 位作者 黄君富 府伟灵 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期576-580,共5页

毛细管电泳-单链构象多态性分析技术(CE-SSCP)是进行基因突变分析、细菌鉴定、抗菌活性分析、单核苷酸多态性(SNP)分型和mRNA定量的强有力工具。近些年来,随着分子生物学技术的不断发展,其应用也愈加广泛。本文就该技术的基本原理及影... 毛细管电泳-单链构象多态性分析技术(CE-SSCP)是进行基因突变分析、细菌鉴定、抗菌活性分析、单核苷酸多态性(SNP)分型和mRNA定量的强有力工具。近些年来,随着分子生物学技术的不断发展,其应用也愈加广泛。本文就该技术的基本原理及影响参数,如筛分介质、检测器、温度、缓冲液组成及pH值等进行了综述,并对其应用作了简要介绍。 展开更多

关键词 毛细管电泳 单链构象多态性分析 基因突变分析 细菌鉴定

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p53基因第7、8外显子突变与广西肝癌家族聚集遗传易感性的关系 被引量：5

10

作者 于冰雪 吴健林 +3 位作者 吴继周 龚婷婷 王尊付 钟彬 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第38期23-25,共3页

目的探讨p53基因第7、8外显子突变(exon7/exon8)与广西肝癌高发区肝癌家族聚集遗传易感性的关系。方法依配对方法选择广西肝癌高发区肝癌高发家族、肝癌单发家族和无癌家族中未发生肝癌的家族成员各123例为家族组,同时选择广西肝癌高发... 目的探讨p53基因第7、8外显子突变(exon7/exon8)与广西肝癌高发区肝癌家族聚集遗传易感性的关系。方法依配对方法选择广西肝癌高发区肝癌高发家族、肝癌单发家族和无癌家族中未发生肝癌的家族成员各123例为家族组,同时选择广西肝癌高发区内30例肝癌患者作为肝癌组。控制HBV、HCV感染及环境因素后,应用聚合酶链式反应-单链构象多态性分析结合基因测序的方法筛查p53基因exon7/exon8突变情况。结果肝癌组p53基因exon7/exon8总突变率为13.3%(4/30),家族组exon7/exon8总突变率为0,P<0.05。结果 p53基因exon7/exon8突变可能不是广西肝癌高发区肝癌家族聚集的遗传易感因素。 展开更多

关键词 原发性肝癌 家族聚集性 P53基因 基因突变 聚合酶链式反应-单链构象多态性分析 广西

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河北省家族性和散发性乳腺癌易感基因1/2突变的研究 被引量：5

11

作者 陈丽芬 耿翠芝 +1 位作者 王桂兰 李军改 《中华乳腺病杂志（电子版）》 CAS 2010年第4期35-39,共5页

目的探讨河北省家族性和散发性乳腺癌患者乳腺癌易感基因(BRCA)1/2的突变位点及携带情况。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析和基因测序技术对18例家族性乳腺癌患者、50例散发性乳腺癌患者、23例乳腺良性疾病患者及20例健康对照... 目的探讨河北省家族性和散发性乳腺癌患者乳腺癌易感基因(BRCA)1/2的突变位点及携带情况。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析和基因测序技术对18例家族性乳腺癌患者、50例散发性乳腺癌患者、23例乳腺良性疾病患者及20例健康对照组血样标本的基因组DNA进行BRCA1/2基因突变的检测。定性资料采用χ2检验和Fisher's确切概率法进行分析,定量资料采用t检验进行分析。结果 68例乳腺癌患者基因突变率为7.35%(5/68),均发生在BRCA1基因(162ATT>TTT;4142GTT>GTG;4196CAA>CAT;4196delA,4142GTT>GTG;5379GAA>AAA),无BRCA2基因突变,BRCA1基因的突变率高于BRCA2基因(χ2=4.829,P=0.028);其中,18例家族性乳腺癌基因突变3例,50例散发性乳腺癌突变2例,二者间差异无统计学意义(χ2=3.117,P=0.111)。乳腺良性疾病患者未见BRCA1/2基因突变。健康对照组未见BRCA1基因突变,但有1例BRCA2基因突变[TTTCAGA-TGTCAA(6291insG,6294delG)]。家族性乳腺癌患者、散发性乳腺癌患者、乳腺良性疾病患者和健康对照组的BRCA1基因突变率差异有统计学意义(χ2=8.248,P=0.041)。在1例家族性乳腺癌标本中发现1个核苷酸多态性位点,位于BRCA1第20外显子下游第35个碱基处G>A(IVS20+35G>A)。结论本研究丰富了中国人群BRCA1/2基因的突变谱,并为将来乳腺癌的普查和临床基因检测提供了筛查模式。 展开更多

关键词 聚合酶链反应-单链构象多态性分析 基因测序 BRCA1/2基因 突变 乳腺肿瘤

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早发性乳腺癌/卵巢癌BRCA1基因突变分析 被引量：3

12

作者 许奕 贾婵维 王树玉 《中国优生与遗传杂志》 2005年第3期21-22,26,共3页

目的　探讨中国北方地区汉族人群早发性乳腺癌和卵巢癌与BRCA1基因的关系。方法　应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析和DNA直接测序法检测BRCA1基因外显子 2和外显子 1 1部分序列。结果　对 1 2例早发性乳腺癌 /卵巢癌患者PCR -SSCP... 目的　探讨中国北方地区汉族人群早发性乳腺癌和卵巢癌与BRCA1基因的关系。方法　应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析和DNA直接测序法检测BRCA1基因外显子 2和外显子 1 1部分序列。结果　对 1 2例早发性乳腺癌 /卵巢癌患者PCR -SSCP的检测中 ,在外显子 2发现 1例突变 ,经DNA测序证实突变为第 1 6 6碱基插入碱基“C”。结论　BRCA1基因突变可能与北方地区汉族人群早发性乳腺癌有关。 展开更多

关键词 BRCA1基因 乳腺癌 早发 卵巢癌 突变分析 DNA直接测序 汉族人群 碱基 DNA测序 构象

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临床分离铜绿假单胞菌喹诺酮耐药株gyrA基因突变及其对β-内酰胺类药物敏感性研究 被引量：2

13

作者 李学如 朱雯 +3 位作者 贾文祥 刘莉 张再容 马巨辉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期726-729,762,共5页

利用 PCR、限制性片段多态性分析 (RFL P)、DNA单链构像多态性分析 (SSCP)和 DNA测序等方法 ,对 10株成都地区临床分离耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A基因进行研究。结果表明 ,成都地区耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A的喹诺酮耐... 利用 PCR、限制性片段多态性分析 (RFL P)、DNA单链构像多态性分析 (SSCP)和 DNA测序等方法 ,对 10株成都地区临床分离耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A基因进行研究。结果表明 ,成都地区耐喹诺酮类药物铜绿假单胞菌 gyr A的喹诺酮耐药决定区编码第 83位氨基酸密码子表现出高频单点突变 (10株中有 8株 ) ,其突变方式为 ACC→ATC。gyr A的 PCR扩增产物 Sac II酶切片段与测序结果一致。SSCP的带谱与测序结果比较 ,除 1株 (PSA2 )的 SSCP带谱与标准株相同 ,但测序结果有点突变外 ,其余菌株与测序结果一致。因此 ,利用 PCR- SSCP- RFL P系统 ,可快速、准确的检测耐喹诺酮类药物的铜绿假单胞菌 gyr A中至少一个碱基的差异。用二倍稀释法测定喹诺酮和 β-内酰胺类药物对耐药突变株体外抗菌活性 ,结果表明 ,铜绿假单胞菌 gyr A基因突变株对诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、亚胺培南和哌拉西林表现出不同的敏感性。试验所用 8株突变株对诺氟沙星和环丙沙星表现出高水平抗性 ;3株对左氧氟沙星敏感 ;3株对头孢他啶和哌拉西林表现出耐药 ,2株对亚胺培南耐药。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 喹诺酮 耐药株 gyrA 基因突变 Β-内酰胺类药物 敏感性

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鼻咽癌转化基因的 2.8kb EcoRI 片段在鼻咽癌中不存在点突变 被引量：1

14

作者 邓锡云 曹亚 +2 位作者 胡维新 顾焕华 姚开泰 《湖南医科大学学报》 CSCD 1997年第2期102-104,共3页

用改进的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术对鼻咽癌活检组织进行筛查，以检测Ｔｘ基因中与转化有关的序列在鼻咽癌中是否存在突变。在被检测的１１例配对的鼻咽癌标本中均未检测到泳动速率的改变。提示在多数鼻咽癌中基因突变不是Ｔｘ基因的活... 用改进的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术对鼻咽癌活检组织进行筛查，以检测Ｔｘ基因中与转化有关的序列在鼻咽癌中是否存在突变。在被检测的１１例配对的鼻咽癌标本中均未检测到泳动速率的改变。提示在多数鼻咽癌中基因突变不是Ｔｘ基因的活化方式。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 基因突变 PCR-SSCP

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应用PCR-SSCP检测转化细胞中p53基因突变 被引量：1

15

作者 谭明家 王莉娥 +2 位作者 谢大英 李玉瑞 方福德 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期159-161,共3页

利用化学致突变物甲基丙烯酸环氧丙酯体外诱导人胚肺成纤维细胞，使之发生转化，分离转化细胞克隆。经ＰＣＲ特异性扩增ｐ５３基因外显子第５和第８，银染单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析，结果表明转化细胞中ｐ５３基因外显子第８发生... 利用化学致突变物甲基丙烯酸环氧丙酯体外诱导人胚肺成纤维细胞，使之发生转化，分离转化细胞克隆。经ＰＣＲ特异性扩增ｐ５３基因外显子第５和第８，银染单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析，结果表明转化细胞中ｐ５３基因外显子第８发生突变，揭示出ｐ５３基因在化学致突变物诱导细胞转化中起着重要作用。 展开更多

关键词 化学致突变物 细胞转化 P53基因 PCR

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肺癌p53基因突变的临床意义

16

作者 周伯年 郑颂国 +2 位作者 张容轩 罗建民 沈兆忠 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1998年第10期576-578,共3页

目的：研究肺癌ｐ５３基因突变的临床意义。方法：运用聚合酶链反应（ＰＣＲ）—单链构象多态性分析方法（ＳＳＣＰ），检测原发性肺癌的ｐ５３基因的第５～８外显子点突变。结果：８例肺良性疾病均无点突变发生，４０例肺癌中１９例（... 目的：研究肺癌ｐ５３基因突变的临床意义。方法：运用聚合酶链反应（ＰＣＲ）—单链构象多态性分析方法（ＳＳＣＰ），检测原发性肺癌的ｐ５３基因的第５～８外显子点突变。结果：８例肺良性疾病均无点突变发生，４０例肺癌中１９例（４７．５％）有点突变发生，点突变发生与临床分期和淋巴结累及状态相关（Ｐ＜０．０２）。 展开更多

关键词 肺癌 P53基因 点突变 基因多态性

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临床分离耐喹诺酮类铜绿假单胞菌gyrA基因单点突变研究 被引量：4

17

作者 刘莉 朱雯 +4 位作者 贾文祥 李学如 曾蔚 张再容 马巨辉 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期439-442,共4页

目的　研究临床分离铜绿假单胞菌耐喹诺酮类药物的分子机制 ,对PCR RFLP SSCP分析铜绿假单胞菌gyrA基因突变的可行性评价。方法　以铜绿假单胞菌gyrA基因序列为靶序列 ,用PCR、PCR SSCP、PCR RFLP、DNA测序、OMIGA软件分析等方法 ,对铜... 目的　研究临床分离铜绿假单胞菌耐喹诺酮类药物的分子机制 ,对PCR RFLP SSCP分析铜绿假单胞菌gyrA基因突变的可行性评价。方法　以铜绿假单胞菌gyrA基因序列为靶序列 ,用PCR、PCR SSCP、PCR RFLP、DNA测序、OMIGA软件分析等方法 ,对铜绿假单胞菌gyrA基因突变进行研究。结果　在铜绿假单胞菌 10株耐药突变株中 ,有 8株的gyrA基因的 83位表现出高频的单点突变 ,其突变方式全为ACC→ATC。gyrA的PCR扩增产物SacⅡ酶切片段与测序结果一致。SSCP带谱与测序结果比较 ,除 1株 (PSA2 )其SSCP带谱与标准株相同 ,但测序结果有点突变外 ,其余菌株与测序结果一致。结论　临床分离的铜绿假单胞菌耐喹诺酮类药物分子机制主要表现为gyrA基因 83位氨基酸密码子突变 (Thr 83→Ile) ,利用PCR SSCP RFLP系统 ,可快速、准确地检测耐喹诺酮类药物的铜绿假单胞菌gyrA中至少 1个碱基的差异。 展开更多

关键词 GYRA基因 铜绿假单胞菌 限制性片段多态性分析 RFLP DNA单链构象多态性分析 SSCP 喹诺酮类药 基因突变 耐药性

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上皮性卵巢癌中P^（53）基因点突变的初步研究

18

作者 陈波洁 黄光琦 +1 位作者 王世阆 王靖华 《现代妇产科进展》 CSCD 1995年第4期309-311,共3页

为研究肿瘤抑制基因Ｐ５３与卵巢癌的关系，用多聚酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测了３０例上皮性卵巢癌中Ｐ５３基因第５～８外显子的点突变。结果；ＳＳＣＰ阳性１２例，阳性率为４０％，第５、６、７外显子... 为研究肿瘤抑制基因Ｐ５３与卵巢癌的关系，用多聚酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测了３０例上皮性卵巢癌中Ｐ５３基因第５～８外显子的点突变。结果；ＳＳＣＰ阳性１２例，阳性率为４０％，第５、６、７外显子分别为１、２、９例。Ｐ５３基因点突变率在各临床分期、组织学分级、组织学类型之间未发现明显差异，说明Ｐ５３基因是突变在卵巢癌的发展过程中可能一直起着重要作用。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 P^53基因 点突变

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用聚合酶链反应单链构象多态性分析技术检测结核分枝杆菌L型的rpoB基因突变

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作者 陆军 李卫鹏 叶松 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第3期420-421,453,共3页

目的:探索结核分枝杆菌L型的耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系,以及聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术的临床应用价值。方法:收集结核分枝杆菌L型菌株52株,采用PCR-SSCP方法检测rpoB基因,与采用常规药敏试验法检测利... 目的:探索结核分枝杆菌L型的耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系,以及聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术的临床应用价值。方法:收集结核分枝杆菌L型菌株52株,采用PCR-SSCP方法检测rpoB基因,与采用常规药敏试验法检测利福平耐药的结果进行对比分析。结果:采用常规法检测,52株临床分离株中有38株利福平耐药,耐药率为73.08%(38/52);PCR-SSCP方法对52株临床耐药株rpoB基因突变的检出率为65.38%(32/52),两种方法检测耐利福平的符合率为84.21%。结论:PCR-SSCP对利福平耐药的结核分枝杆菌L型菌株检出率较高,将其与常规药敏试验联合应用,是一种指导临床用药的好方法。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌L型 RPOB基因 聚合酶链反应单链构象多态性分析

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光滑假丝酵母菌ITSⅠ区PCR-SSCP分子流行病学分析

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作者 王菡 于仁涛 +2 位作者 刘建玲 纪蕾 韩黎 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第3期152-156,共5页

目的建立基于聚合酶链反应的单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术,对引起常见医院感染的光滑假丝酵母菌进行基因多态性分析,并探讨改善其灵敏度和分辨率的优化条件。方法采用PCR-SSCP技术对临床分离的19株光滑假丝酵母菌以及1株标准株ATCC... 目的建立基于聚合酶链反应的单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术,对引起常见医院感染的光滑假丝酵母菌进行基因多态性分析,并探讨改善其灵敏度和分辨率的优化条件。方法采用PCR-SSCP技术对临床分离的19株光滑假丝酵母菌以及1株标准株ATCC90030的rDNA的ITSⅠ区(引物ITS1/ITS2)和ITSⅡ区(引物ITS3/ITS4)多态性进行分析,并对PCR-SSCP的条件进行优化。结果ITSⅠ区较ITSⅡ区保守性低,变异性较强,较为适合SSCP分型。针对ITSⅠ区,SSCP电泳在无甘油时,4℃和15℃均将菌株分为6型,但各型所含菌株不同;存在5%甘油时,SSCP电泳分辨率明显增高。结论在15℃及5%甘油存在的条件下,针对ITSI区的PCR-SSCP分型是一种快速、简便的适合于致医院感染光滑假丝酵母菌分型的新流行病学研究手段。 展开更多

关键词 光滑假丝酵母菌 PCR-SSCP 流行病学研究 真菌

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