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用DNA短串联重复序列多态性诊断先天愚型患者中21号额外染色体的双亲起源 被引量:16
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作者 史庆华 张坚宣 +5 位作者 潘淑娟 单祥年 张锡然 陈宜峰 余龙 赵寿元 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期206-209,共4页
目的用短串联重复序列-D21S215和D21S120的多态性诊断21三体患者中21号额外染色体的双亲起源。方法PCR扩增上述两个短串联重复序列,对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色检测。根据患者及其父母基因型... 目的用短串联重复序列-D21S215和D21S120的多态性诊断21三体患者中21号额外染色体的双亲起源。方法PCR扩增上述两个短串联重复序列,对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色检测。根据患者及其父母基因型的比较来确定21号额外染色体的双亲起源。结果在24例21三体患者中,17例的21号额外染色体的双亲来源被检测出,其中来自母亲和父亲的分别为12例和5例。母亲来源组母亲的平均年龄明显高于父亲来源组母亲的年龄。结论根据这两个标记能确定21三体患者中21号额外染色体的双亲起源。 展开更多
关键词 先天愚型 21号染色体 基因多态性 诊断 dna
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国内建立的人肿瘤细胞系的身份认证问题及对策 被引量:2
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作者 卞晓翠 刘玉琴 +1 位作者 杨振丽 冯海凉 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-210,共10页
目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱... 目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱作为细胞系的DNA指纹,然后与原始组织或国际数据库中已有细胞的STR谱进行比对,通过匹配度的高低判断该细胞是否被其他细胞交叉污染。对怀疑He La细胞污染的肿瘤细胞,检测其基因组中是否有人乳头瘤病毒18型(HPV-18)病毒插入片段。对怀疑T细胞白血病细胞污染的,则检测T细胞的各种特性(表面标志),根据表面标志表达情况判断是否为错误细胞。结果本研究共收集了37种国内建立的肿瘤细胞系46个样品。本中心建立的6株细胞系均STR正确。其他单位建立的细胞系中有8株系正确,有23(62. 2%)株系认定为错误细胞,人宫颈癌细胞He La是主要污染源;另外发现有些国内自建的细胞系被人结直肠癌细胞HCT-8、宫颈鳞癌细胞Si Ha、T细胞白血病细胞CCRF-CEM及大鼠细胞污染。结论国内建立的肿瘤细胞很高比例地发生了细胞间的交叉污染,科研人员在实验前一定要首先进行细胞身份认定,或者从国家实验细胞资源共享服务平台选择细胞。另外,建立细胞系时保留原始组织用于后续细胞系的身份认证。 展开更多
关键词 短串联重复序列分型 交叉污染 特性鉴定 聚合酶链反应 肿瘤细胞 细胞培养
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高分辨电泳分离短串联重复序列DNA片段
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作者 郭大玮 郎海丽 +2 位作者 徐晓莉 J.C.J.EIKENBOOM R.M.BERTINA 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第6期547-550,共4页
采用多相缓冲系统,在成层胶T=5%,C=26%,分离胶T=8%,C=5%的条件下用聚丙烯酰胺凝胶电泳对人类短串联重复序列(STR)DNA片段进行分离.其中,成层胶内主要缓冲成分为2二羟乙基亚胺三羟甲基甲烷(Bi... 采用多相缓冲系统,在成层胶T=5%,C=26%,分离胶T=8%,C=5%的条件下用聚丙烯酰胺凝胶电泳对人类短串联重复序列(STR)DNA片段进行分离.其中,成层胶内主要缓冲成分为2二羟乙基亚胺三羟甲基甲烷(Bistris)、H2SO4及N、N2(羟乙基)甘氨酸(Bicine);而分离胶以Tris、H2SO4及2二羟乙基亚胺三羟甲基甲烷(Bistris)为主,构成多相缓冲系统.DNA片段在成层胶中被有效地压缩,在分离胶内又可完全解压缩,使其按片段大小分离; 展开更多
关键词 短串联重复序列 电泳 成层胶 分离胶
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