目的:分离纯化五谷虫的有效抗菌物质,同时研究五谷虫抗菌物质对大肠杆菌的杀伤作用,初步探讨其可能的抗菌机制。方法:将五谷虫与大肠杆菌共培养使五谷虫获得二次免疫。用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱和sephacryls-200HR凝胶...目的:分离纯化五谷虫的有效抗菌物质,同时研究五谷虫抗菌物质对大肠杆菌的杀伤作用,初步探讨其可能的抗菌机制。方法:将五谷虫与大肠杆菌共培养使五谷虫获得二次免疫。用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱和sephacryls-200HR凝胶过滤层析柱分离纯化,浊度法检测,获得五谷虫抗菌物质。用荧光探针、琼脂糖凝胶电泳技术分析五谷虫的抗菌机制。结果:五谷虫粗提物浓度>1.0 mg/mL时对大肠杆菌的抗菌效果较强,分子量在10KD左右。荧光探针技术示20 mg/mL的抗生素变化率为35.4%,50 mg/mL的抗生素变化率为40.0%,100 mg/mL的抗生素变化率为42.3%,2 mg/mL的粗提物变化率为1223.1%,80 mg/mL的粗提物变化率为1300.0%。琼脂糖凝胶电泳图示含2 mg/mL和80 mg/mL粗提物的泳道无质粒DNA条带。结论:用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱和sephacryls-200HR凝胶过滤层析柱可以纯化得到有效的五谷虫抗菌成分,呈单一蛋白条带。其抗菌机制可能是破坏了大肠杆菌的细胞膜以及影响了质粒DNA的复制。展开更多
