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钠钾泵Scr复合体调控幼年哮喘大鼠气道重塑的机制
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作者 黄河清 白燕 《空军航空医学》 2022年第6期302-306,323,共6页
目的探究钠钾泵琥珀酸-细胞色素c氧化还原酶(succinate-cytochrome c oxidoreductase,Scr)复合体调控幼年哮喘大鼠气道重塑的机制。方法筛选30只SD大鼠,随机分为对照组、卵白蛋白(ovalbumin,OVA)组和钠钾泵Scr复合体组,每组10只。对照组... 目的探究钠钾泵琥珀酸-细胞色素c氧化还原酶(succinate-cytochrome c oxidoreductase,Scr)复合体调控幼年哮喘大鼠气道重塑的机制。方法筛选30只SD大鼠,随机分为对照组、卵白蛋白(ovalbumin,OVA)组和钠钾泵Scr复合体组,每组10只。对照组:经盐水处理并经雾化盐水激发的大鼠;OVA组:在OVA激发之前接受过盐水治疗的OVA致敏大鼠;钠钾泵Scr复合体组:将钠钾泵Scr复合体药物溶解在二甲亚砜中并用磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline,PBS)稀释,按照0.3 mg/kg体质量,腹膜给药。使用连接到呼吸机和雾化装置的气管插管,使用Buxco肺功能仪测量大鼠的气道反应性。肺组织石蜡切片用苏木精-伊红(HE)和高碘酸-席夫(PAS)染色以进行光学显微镜检查。通过蛋白质免疫印迹检测磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)磷酸化。通过RT-qPCR检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达水平。通过细胞计数试剂8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖。结果与对照组相比,OVA组PC100值降低,气道反应性升高(P<0.05);与OVA组相比,钠钾泵Scr复合体组PC100值升高,气道反应性降低(P<0.05)。HE和PAS染色结果显示,与对照组相比,OVA组的肺组织显示出广泛的支气管周围和血管周围炎性细胞浸润,PAS阳性染色的上皮杯状细胞的百分比增加(P<0.05);与OVA组相比,钠钾泵Scr复合体组炎症细胞浸润减少,PAS阳性染色的上皮杯状细胞的百分比降低(P<0.05)。与对照组相比,OVA组PI3K和PKB磷酸化水平升高(P<0.05);与OVA组相比,钠钾泵Scr复合体组PI3K和PKB磷酸化水平降低(P<0.05)。与对照组相比,OVA组mTOR、HIF-1α和VEGF mRNA水平升高(P<0.05);与OVA组相比,钠钾泵Scr复合体组mTOR、HIF-1α和VEGF mRNA水平降低(P<0 展开更多
关键词 哮喘 气道重塑 钠钾泵 scr复合体 磷脂酰肌醇3-激酶 PKB蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 缺氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子
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钠钾泵Scr复合体对幼年哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响及其机制研究 被引量:2
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作者 黄河清 白燕 《实用心脑肺血管病杂志》 2021年第3期75-80,共6页
背景研究表明,Na+-K+-ATP酶活性药物具有抑制哮喘的作用,但具体机制尚不清楚。目的探究钠钾泵Scr复合体对幼年哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响及其机制。方法本实验时间为2019年7月—2020年8月。将120只8周龄SD雄性大鼠分为对照组(腹... 背景研究表明,Na+-K+-ATP酶活性药物具有抑制哮喘的作用,但具体机制尚不清楚。目的探究钠钾泵Scr复合体对幼年哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响及其机制。方法本实验时间为2019年7月—2020年8月。将120只8周龄SD雄性大鼠分为对照组(腹腔注射5%磷酸盐缓冲液)、哮喘组〔腹膜注射乳化的卵清蛋白(OVA,Ⅴ级)致敏,造模成功后腹膜注射二甲亚砜〕及治疗组(腹膜注射乳化的OVA致敏,造模成功后腹膜注射钠钾泵Scr复合体药物),每组40只。采用实用荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测肺组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶相对表达量,采用蛋白质免疫印迹法检测肺组织Scr、层粘连蛋白α4(LAMα4)相对表达量,通过苏木素-伊红(HE)染色检测气道炎性细胞浸润情况,通过高碘酸-席夫(PAS)染色检测杯状细胞,采用免疫组织化学法(IHC)检测转化生长因子β1(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)表达量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织白介素13(IL-13)和内皮素1(ET-1)含量。结果哮喘组和治疗组大鼠肺组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Scr相对表达量低于对照组,LAMα4相对表达量高于对照组(P<0.05);治疗组大鼠肺组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Scr相对表达量高于哮喘组,肺组织LAMα4相对表达量低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和治疗组大鼠肺组织炎症评分高于对照组,PAS阳性面积占比大于对照组(P<0.05);治疗组大鼠肺组织炎症评分低于哮喘组,PAS阳性面积占比小于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和治疗组大鼠肺组织TGF-β1和VEGF表达高于对照组,治疗组大鼠肺组织TGF-β1和VEGF表达低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和治疗组大鼠肺组织IL-13和ET-1高于对照组,治疗组大鼠肺组织IL-13和ET-1低于哮喘组(P<0.05)。结论钠钾泵Scr复合体可抑制幼年哮喘大鼠气道炎症及气道重塑,其机制可能与调控LAMα4表达及抑制TGF-β1、VEGF、IL-13和ET-1的释放有关。 展开更多
关键词 哮喘 钠钾泵scr复合体 层粘连蛋白α4 气道重塑 炎症
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钠钾泵Scr复合体通过调控自噬影响幼年哮喘大鼠气道重塑的机制研究
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作者 黄河清 白燕 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第1期1-6,共6页
目的制备哮喘幼年大鼠模型,观察钠钾泵Scr复合体对哮喘幼年大鼠炎性因子及自噬的影响,探讨钠钾泵Scr复合体调控自噬改善幼年哮喘大鼠气道炎症、气道重塑的机制。方法幼年SD大鼠100只随机分为空白对照组、模型组及钠钾泵Scr复合体低、中... 目的制备哮喘幼年大鼠模型,观察钠钾泵Scr复合体对哮喘幼年大鼠炎性因子及自噬的影响,探讨钠钾泵Scr复合体调控自噬改善幼年哮喘大鼠气道炎症、气道重塑的机制。方法幼年SD大鼠100只随机分为空白对照组、模型组及钠钾泵Scr复合体低、中、高剂量组各20只。模型组及钠钾泵Scr复合体低、中、高剂量组制备哮喘模型。造模成功后,模型组不作任何干预;钠钾泵Scr复合体低、中、高剂量组分别尾静脉注射钠钾泵Scr复合体5、10、20 mL/(kg·d),连续14 d。空白对照组不制备模型,不作任何干预。药物处理后,5组大鼠行支气管肺泡灌洗检查,采集肺泡灌洗液检测白细胞总数及嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞比率和白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-6水平;采集尾静脉血检测血清IL-4、IL-6水平;之后处死大鼠取肺组织,行HE染色,测定并计算支气管管壁面积/支气管内周长(WA/Pi)、支气管平滑肌面积/支气管内周长(S/Pi)、支气管平滑肌细胞核数目/支气管内周长(N/Pi),采用Western blot法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、微管相关蛋白轻链3(microtubule associated protein light chain 3,LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白相对表达量,采用实时荧光定量PCR法检测凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)、结节性硬化症因子1(tuberous sclerosis complex 1,TSC1)、caspase-8 mRNA相对表达量。结果模型组及钠钾泵Scr复合体低、中、高剂量组支气管肺泡灌洗液白细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞比率,血清及肺泡灌洗液中IL-4、IL-6水平和肺组织W/Pi、S/Pi和N/Pi均高于空白对照组(P<0.05),模型组高于钠钾泵Scr复合体低、中、高剂量组(P<0.05),钠钾泵Scr复合体低、中、高剂量组依次降低(P<0.05)。模型组及钠钾泵Scr复合体低、中剂、高剂量� 展开更多
关键词 哮喘 钠钾泵scr复合体 自噬 大鼠 气道炎症 气道重塑
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