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题名Slfn5基因条件性敲除小鼠模型的构建
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作者
李婧铱
吕昌莲
贾迪
顾雪锋
万国庆
赵炜明
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机构
齐齐哈尔医学院医学技术学院
上海健康医学院分子影像学重点实验室
黑龙江中医药大学基础医学院
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出处
《哈尔滨医科大学学报》
CAS
2022年第6期551-556,共6页
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基金
国家自然科学基金资助项目(81772829)
中央支持地方高校发展改革资金人才培养支持计划项目
黑龙江省普通高等学校青年创新人才培养计划项目(UNPYSCT-2020084)
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文摘
目的应用CRISPR/Cas9技术构建Slfn5基因条件性敲除小鼠模型并进行初步表型鉴定,为Slfn5功能及机制研究提供动物模型。方法根据Slfn5的基因结构,选择外显子3作为敲除区域(flox区域)。采用受精卵同源重组的方式,将针对Slfn5基因设计的gRNA(guide RNA)、Cas9 mRNA以及含有flox区域的同源重组质粒显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中并获得F0代小鼠。PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J野生型小鼠交配,获得F1代Slfn5 flox/+杂合子小鼠。此杂合子小鼠自交,得到F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠。最后,将F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠与Dppa3-Cre鼠杂交,得到flox纯合且Cre阳性小鼠即Slfn5敲除小鼠。结果获得Slfn5敲除小鼠模型,PCR及测序鉴定为Slfn5基因条件性敲除小鼠。与野生型小鼠相比,Slfn5基因敲除的小鼠血常规中淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞数量明显增多(P<0.05)。结论应用CRISPR/Cas9技术成功建立Slfn5基因敲除小鼠动物模型,为研究Slfn5在乳腺癌和免疫系统的生物学功能及作用机制奠定实验基础。
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关键词
基因敲除
CRISPR/Cas9技术
schlafen家族成员-5
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Keywords
gene knockout
CRISPR/Cas9 technology
schlafen family member-5
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分类号
R-332
[医药卫生]
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