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高密度脂蛋白通过Akt信号通路对氧糖剥离小鼠心肌细胞的保护作用研究 被引量：2
1
作者 鄂璐莎 程颖 赵兴胜 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期795-799,共5页
目的 探讨高密度脂蛋白（HDL）对氧糖剥离（OGD）小鼠心肌细胞的保护作用.方法 通过蛋白酶消化及差速贴壁法获得原代清道夫受体B1基因敲除小鼠（SR-B1-/-）的心肌细胞与普通C57小鼠（SR-B1＋/＋）的心肌细胞.① 将两种细胞均分为正常对... 目的 探讨高密度脂蛋白（HDL）对氧糖剥离（OGD）小鼠心肌细胞的保护作用.方法 通过蛋白酶消化及差速贴壁法获得原代清道夫受体B1基因敲除小鼠（SR-B1-/-）的心肌细胞与普通C57小鼠（SR-B1＋/＋）的心肌细胞.① 将两种细胞均分为正常对照组（Con组）、OGD组、OGD＋HDL组3组,培养4 h后用碘化丙啶（PI）染色测定细胞坏死情况.② 将SR-B1＋/＋心肌细胞分为Con组、OGD组、OGD＋HDL组、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）抑制剂LY294002组4组,用PI染色测定细胞坏死情况;用原位末端缺刻标记法（TUNEL）测定细胞凋亡情况;按照试剂盒步骤测定细胞上清液中肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）含量;用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）测定SR-B1、Akt蛋白表达.结果 ① 在SR-B1＋/＋心肌细胞中,给予HDL可抑制OGD致细胞坏死;而HDL对OGD的SR-B1-/-心肌细胞无保护作用.② 对SR-B1＋/＋细胞研究显示：与Con组比较,OGD组坏死细胞显著增多,细胞活性显著下降,上清液中LDH、CK-MB含量升高,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、SR-B1表达显著下降.与OGD组比较,OGD＋HDL组坏死细胞显著减少〔PI阳性细胞率：（26.71±5.94）％比（64.24±18.34）％〕,细胞活性显著升高〔（63.84±6.95）％比（26.71±5.13）％〕,上清液中LDH、CK-MB含量显著下降〔LDH（U/L）：896.3±161.5比1568.3±243.5,CK-MB（U/L）：304.3±72.9比583.6±81.6〕,p-Akt、SR-B1表达显著升高（p-Akt/t-Akt：0.84±0.13比0.18±0.06,SR-B1/β-actin：1.23±0.19比0.09±0.02）,差异均有统计学意义（均P〈0.05）.与OGD＋HDL组比较,LY294002组坏死细胞增多,细胞活性下降,上清液中LDH、CK-MB含量升高,p-Akt、SR-B1表达下降,且各指标与OGD组比较差异均无统计学意义.4组间细胞凋亡情况差异无统计学意义.结论 HDL对OGD小鼠心肌细胞具有保护作用,其机制可能与激活PI3K/Akt通路后上调SR-B1蛋白表达相� 展开更多
关键词 高密度脂蛋白 氧糖剥离 心肌细胞 清道夫受体-b1
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