植物激素和活性炭对新疆雪莲组培苗生根的影响 被引量：16

1

作者 徐春明 赵兵 +2 位作者 耿楠 王晓东 王玉春 《中国农学通报》 CSCD 2006年第2期41-43,共3页

研究了不同植物激素和活性炭对新疆雪莲组培苗生根的影响,测定了根长、根粗、根数和生根率4个生根指标,结果表明:添加生长素IAA、IBA和NAA均可以不同程度地促进生根,但0.2mg/L的IAA效果最佳,根长最长达5.5mm,根粗最小0.96mm,根数最多达9... 研究了不同植物激素和活性炭对新疆雪莲组培苗生根的影响,测定了根长、根粗、根数和生根率4个生根指标,结果表明:添加生长素IAA、IBA和NAA均可以不同程度地促进生根,但0.2mg/L的IAA效果最佳,根长最长达5.5mm,根粗最小0.96mm,根数最多达9.75条,生根率达100%;添加活性炭可以提高生根质量,最适添加量为1mg/mL。此时,根长最长达25.51mm,根粗最小为0.6mm,根数最多达13条,生根效果最佳。 展开更多

关键词 新疆雪莲 植物激素 活性炭 生根

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天山雪莲叶片全长cDNA文库的构建 被引量：12

2

作者 祝建波 刘海亮 +1 位作者 王重 周鹏 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期170-173,共4页

以天山雪莲(Saussurea involucrataKar.et Kir)幼嫩叶片为研究材料,利用CreatorTMSMARTTMcD-NA Library Construction技术构建了天山雪莲叶片全长cDNA文库,原始文库滴度达3.93×105cfu/mL,文库插入片段多在1 000 bp左右。随机挑取1... 以天山雪莲(Saussurea involucrataKar.et Kir)幼嫩叶片为研究材料,利用CreatorTMSMARTTMcD-NA Library Construction技术构建了天山雪莲叶片全长cDNA文库,原始文库滴度达3.93×105cfu/mL,文库插入片段多在1 000 bp左右。随机挑取10个克隆进行测序,通过生物信息学初步分析表明,100%为全长cDNA,大部分可以在GenBank中找到同源序列。天山雪莲叶片全长cDNA文库的构建为雪莲基因资源保存和植物抗寒机理的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 天山雪莲 试管苗 全长CDNA文库

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新疆雪莲体外直接器官发生的快繁研究 被引量：10

3

作者 傅晓春 王晓军 +3 位作者 赵民安 刘敏 赵海清 贾莉芳 《干旱区研究》 CSCD 北大核心 2008年第2期248-253,共6页

以新疆雪莲无菌苗的下胚轴、子叶、真叶和根为外植体,在MS基本培养基上培养,探索新疆雪莲体外直接器官发生的快繁途径。结果表明:新疆雪莲不同外植体直接再生不定芽的效果不同,以真叶为外植体,直接再生芽频率最高,在MS+6-BA1.0 mg/L(单... 以新疆雪莲无菌苗的下胚轴、子叶、真叶和根为外植体,在MS基本培养基上培养,探索新疆雪莲体外直接器官发生的快繁途径。结果表明:新疆雪莲不同外植体直接再生不定芽的效果不同,以真叶为外植体,直接再生芽频率最高,在MS+6-BA1.0 mg/L(单位下同)+NAA0.1+2,4-D0.1上,30 d芽诱导率可达66%;在MS+6-BA0.5+NAA0.05上,芽的增殖生长效果好;在1/2MS+NAA0.1上,25 d内生根率达84.7%;在珍珠岩∶腐叶土为1∶3的基质中炼苗,成活率达89.1%。 展开更多

关键词 新疆雪莲saussurea involucrata 直接器官发生 无菌苗 快速繁殖

原文传递

雪莲的抗疲劳抗缺氧效应以及对血红蛋白含量的影响 被引量：8

4

作者 黄明勤 赵国珍 《西北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 1996年第2期58-60,共3页

经动物实验证明，雪莲具有显著的抗疲劳（Ｐ＜０．０１）和抗缺氧效应（Ｐ＜Ｏ．０１），并能提高机体血红蛋白的含量（Ｐ＜Ｏ．０１）。

关键词 雪莲 抗疲劳 抗缺氧 血红蛋白 中草药

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HPLC法建立新疆雪莲指纹图谱研究 被引量：6

5

作者 苗爱东 孙殿甲 +3 位作者 彭燕 王本富 胡辉 朱国强 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期691-693,共3页

目的 :对 7种不同产地的新疆雪莲药材进行指纹谱比较研究。方法 :以乌鲁木齐南山产新疆雪莲药材为分析对象 ,选择适宜的色谱条件 ,建立了 7个不同产地的新疆雪莲药材样品的指纹图谱。结果 :方法学考察表明 ,本研究建立的分析方法有比较... 目的 :对 7种不同产地的新疆雪莲药材进行指纹谱比较研究。方法 :以乌鲁木齐南山产新疆雪莲药材为分析对象 ,选择适宜的色谱条件 ,建立了 7个不同产地的新疆雪莲药材样品的指纹图谱。结果 :方法学考察表明 ,本研究建立的分析方法有比较好的重现性 ;不同产地的新疆雪莲药材共有峰相对保留时间基本一致 ,但其相对面积存在一定的差异。结论 :指纹谱分析方法可简便、快速的鉴别和区分不同产地的新疆雪莲药材。 展开更多

关键词 新疆雪莲 HPLC-FPS HPLC

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新疆雪莲化学成分的分离与鉴定 被引量：10

6

作者 侯朋艺 黄健 +2 位作者 孙博航 吴立军 高慧媛 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期120-123,共4页

目的对新疆雪莲的化学成分进行研究。方法采用硅胶、凝胶柱色谱和重结晶等分离方法对体积分数为75%的新疆雪莲乙醇溶液提取物进行成分分离,通过谱学分析方法结合理化性质进行结构鉴定。结果共分离得到8个化合物,分别鉴定为大苞雪莲内酯(... 目的对新疆雪莲的化学成分进行研究。方法采用硅胶、凝胶柱色谱和重结晶等分离方法对体积分数为75%的新疆雪莲乙醇溶液提取物进行成分分离,通过谱学分析方法结合理化性质进行结构鉴定。结果共分离得到8个化合物,分别鉴定为大苞雪莲内酯(involucratolactone,1)、11α,13-dihydrozaluzanin-C(2)、dihydrozaluzanin-C(3)、7β-羟基谷甾醇(7β-hydroxysitosterol,4)、7β-羟基豆甾醇(stigmast-5,22-dien-3β,7β-diol,5)、山奈酚(kaempferol,6)、高车前素(hispidulin,7)、粗毛豚草素(jaceosidin,8)。结论化合物3、5为首次从风毛菊属植物中分离得到,化合物2、4为首次从新疆雪莲植物中分离得到。 展开更多

关键词 新疆雪莲 化学成分 结构鉴定

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新疆雪莲新的内切几丁质酶类冷诱导基因的分离、克隆和测序 被引量：6

7

作者 李璐 王晓军 赵安民 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2005年第6期731-736,共6页

通过RT-PCR技术,从经低温驯化的新疆雪莲的叶片中分离克隆了1个新的基因。实验证明,此基因的转录是由低温诱导激活,且随着雪莲低温驯化时间的推移,转录本的量明显增加。测序结果显示,此基因全长643bp,编码200个氨基酸。序列分析发现,此... 通过RT-PCR技术,从经低温驯化的新疆雪莲的叶片中分离克隆了1个新的基因。实验证明,此基因的转录是由低温诱导激活,且随着雪莲低温驯化时间的推移,转录本的量明显增加。测序结果显示,此基因全长643bp,编码200个氨基酸。序列分析发现,此基因属于Ⅱ类内切几丁质酶基因。初步预测此基因的编码产物可能具有抗冻活性。 展开更多

关键词 新疆雪莲 冷诱导基因 Ⅱ类内切几丁质酶类基因 抗冻活性

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秋水仙素诱导天山雪莲四倍体的研究 被引量：9

8

作者 康喜亮 郝秀英 +1 位作者 刘敏 王晓军 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期180-185,共6页

利用组织培养附加秋水仙素的方法对濒危药用植物天山雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kir.)进行多倍体诱导,结果表明:(1)与种子作材料相比,采用秋水仙素处理无菌苗是获得天山雪莲多倍体植株的最佳途径.(2)二倍体植株的叶片薄、平展... 利用组织培养附加秋水仙素的方法对濒危药用植物天山雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kir.)进行多倍体诱导,结果表明:(1)与种子作材料相比,采用秋水仙素处理无菌苗是获得天山雪莲多倍体植株的最佳途径.(2)二倍体植株的叶片薄、平展、较细长、色绿、尖齿不明显、根细长;经秋水仙素处理诱导得到的植株叶片变宽、变肥厚、叶色深绿,尖齿明显、根短粗.(3)染色体计数、气孔分析及流式细胞仪倍性综合检测表明,诱导得到的多倍体变异苗为纯合四倍体. 展开更多

关键词 天山雪莲 秋水仙素 四倍体

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天山雪莲PsbO基因的克隆、原核表达及其烟草中的遗传转化 被引量：9

9

作者 彭晓明 王重 +2 位作者 徐登献 陈尚珂 祝建波 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2008年第4期397-401,共5页

从已建立的天山雪莲抗寒cDNA文库中筛选克隆了雪莲的PsbO基因,发现该基因全长1145bp,编码329个氨基酸。通过构建原核表达载体在大肠杆菌中成功获得表达,同时构建了植物表达载体,转化烟草,并获得了部分转基因植株。

关键词 OEE1 PSBO 天山雪莲 载体

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利用Gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库 被引量：8

10

作者 李晨 沈海涛 +2 位作者 张煜星 王爱英 祝建波 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第5期534-536,共3页

以天山雪莲为材料,利用gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库。从经低温处理后的天山雪莲叶片中提取并分离mRNA,合成双链cDNA;cDNA经BP重组反应重组到入门载体pDONR222上,构建得到天山雪莲en-try cDNA文库;天山雪莲entry cDNA再经LR重... 以天山雪莲为材料,利用gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库。从经低温处理后的天山雪莲叶片中提取并分离mRNA,合成双链cDNA;cDNA经BP重组反应重组到入门载体pDONR222上,构建得到天山雪莲en-try cDNA文库;天山雪莲entry cDNA再经LR重组反应将雪莲cDNA重组到植物表达载体pLEELA上,从而构建了天山雪莲cDNA表达文库。结果表明:cDNA入门文库滴度达到1.2×107cfu/mL,文库总容量为4.8×107cfu。表达文库的滴度为6.9×106cfu/mL,文库总容量为2.76×107cfu,插入片段平均大小1000 bp。阳性克隆率100%。天山雪莲cDNA表达文库的建立为进一步高通量筛选天山雪莲抗寒基因奠定了基础。 展开更多

关键词 天山雪莲 cDNA入门文库 CDNA表达文库 GATEWAY技术

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新疆雪莲体细胞胚胎发生 被引量：8

11

作者 贾莉芳 王晓军 赵民安 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2008年第1期85-88,共4页

通过体细胞胚胎发生途径实现了新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.etKir.)的植株再生。选用新疆雪莲子叶为外植体,接种于MS+0.5mg.L-12,4-D+0.05-1mg.L-1BA的固体培养基上,进行愈伤组织的诱导。从第1次继代培养的愈伤组织中挑选出黄... 通过体细胞胚胎发生途径实现了新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.etKir.)的植株再生。选用新疆雪莲子叶为外植体,接种于MS+0.5mg.L-12,4-D+0.05-1mg.L-1BA的固体培养基上,进行愈伤组织的诱导。从第1次继代培养的愈伤组织中挑选出黄绿色、颗粒状、质地致密的胚性愈伤组织,转移到含0.05-0.1mg.L-12,4-D的MS液体培养基中进行悬浮培养,20天后可分化产生大量球形胚。继代过程中相继加入PEG和GA3,可以促进体细胞胚的分化和生长。体细胞胚在含有5mg.L-1GA3的MS固体培养基上,可发育成完整的植株。 展开更多

关键词 植株再生 新疆雪莲 体细胞胚胎发生 组织培养

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天山雪莲不同部位总黄酮含量及高效液相指纹图谱分析 被引量：7

12

作者 黄毅 周茜 +6 位作者 闫明 徐芳 康爱荣 严欢 洪立军 王新堂 仲婕 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期980-982,共3页

目的:测定天山雪莲不同部位的总黄酮和芦丁含量,以及高效液相指纹图谱分析,为雪莲叶进一步开发利用奠定基础。方法:用UV法测定总黄酮的含量;用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对不同部位的HPLC色谱图进行相似度计算。结果:叶的总黄酮... 目的:测定天山雪莲不同部位的总黄酮和芦丁含量,以及高效液相指纹图谱分析,为雪莲叶进一步开发利用奠定基础。方法:用UV法测定总黄酮的含量;用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对不同部位的HPLC色谱图进行相似度计算。结果:叶的总黄酮和芦丁的含量均较高,与全草的相似度为0.812。 展开更多

关键词 雪莲 不同部位 总黄酮 高效液相指纹图谱

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新疆雪莲全长cDNA文库构建及表达序列标签(ESTs)特性分析 被引量：7

13

作者 王博 艾秀莲 +2 位作者 王志方 李芳 罗明 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第1期56-60,共5页

以野生新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kit)为研究材料,利用Creator SMARTTMcDNA Library Construction技术构建了雪莲全长cDNA文库,从野生雪莲中提取总RNA和mRNA,用分离到的微量mRNA合成cDNA第1链。通过长距离PCR扩增得到足够... 以野生新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kit)为研究材料,利用Creator SMARTTMcDNA Library Construction技术构建了雪莲全长cDNA文库,从野生雪莲中提取总RNA和mRNA,用分离到的微量mRNA合成cDNA第1链。通过长距离PCR扩增得到足够量的双链cDNA。将SfiⅠ酶切后并纯化的cDNA片段连接到经SfiⅠ酶切的噬菌体λTripIEX2上,并对噬菌体进行包装,建成cDNA的全长库。经大肠杆菌XL1-Blue平板检测,原始文库滴度达4.03×107(pfu/mL)。随机挑选500个克隆进行序列测定,PCR鉴定结果显示多数插入片段均在500 bp以上。将所测序列经GenBank检索和生物信息学比较,共有56个序列为非冗余数据。其中有14个cDNA片段序列在GenBank上无明显的同源性,42个片段与已报道的基因有较高的同源性。这些EST数据为进一步筛选和克隆雪莲特异性表达基因提供了材料平台,为雪莲基因组数据增补了大量信息。 展开更多

关键词 新疆雪莲 CDNA文库 λTirpLEx2 表达序列标签

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新疆天山雪莲组培快繁技术的建立 被引量：7

14

作者 赵海清 王晓军 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第7期2743-2744,2746,共3页

[目的]探讨新疆天山雪莲组培快繁技术。[方法]以新疆雪莲切除根部的无菌苗,或无菌苗的真叶,或者直接采集野生的新疆雪莲幼嫩部位作外植体,进行愈伤组织诱导培养及丛生芽分化、丛生芽增殖继代培养、生根培养和组培苗移栽试验。[结果]新... [目的]探讨新疆天山雪莲组培快繁技术。[方法]以新疆雪莲切除根部的无菌苗,或无菌苗的真叶,或者直接采集野生的新疆雪莲幼嫩部位作外植体,进行愈伤组织诱导培养及丛生芽分化、丛生芽增殖继代培养、生根培养和组培苗移栽试验。[结果]新疆天山雪莲外植体在MS+NAA 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+6-BA 1.0+NAA 0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L培养基上可诱导产生大量的丛生芽;在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L和MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L培养基上交替培养,丛生芽继代快速增殖率达1.0∶3.5;组培苗在MS+NAA 0.2 mg/L培养基上诱导生根,生根率达83%;生根的雪莲组培苗经炼苗和移栽后成活,生长健壮。[结论]该研究建立的快繁技术为雪莲野生资源保护和产业化发展开拓了一条有效途径。 展开更多

关键词 新疆雪莲 组织培养 快速繁殖

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天山雪莲LEA14基因克隆及功能分析 被引量：6

15

作者 张林华 刘超 +3 位作者 邱红林 王爱英 邓福军 祝建波 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1071-1078,共8页

从天山雪莲叶片低温诱导的EST文库中获得了1个胚胎发育晚期丰富蛋白基因(LEA)cDNA全长序列。序列分析表明,该基因含有1个468bp编码155个氨基酸的开放阅读框。NCBI保守域预测此蛋白属于LEA_2家族,命名为SiLEA14。系统进化分析表明,该蛋... 从天山雪莲叶片低温诱导的EST文库中获得了1个胚胎发育晚期丰富蛋白基因(LEA)cDNA全长序列。序列分析表明,该基因含有1个468bp编码155个氨基酸的开放阅读框。NCBI保守域预测此蛋白属于LEA_2家族,命名为SiLEA14。系统进化分析表明,该蛋白与北柴胡的LEA-2蛋白亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,SiLEA14表达量在低温、盐和干旱胁迫条件下迅速升高。亚细胞定位结果表明,SiLEA14蛋白定位于细胞核中。利用农杆菌介导法将该基因导入烟草,测定并分析转基因植株在冷冻和盐胁迫处理下的生理指标,结果表明,SiLEA14基因在烟草中的过量表达提高了烟草的抗冻和耐盐能力。 展开更多

关键词 天山雪莲 SiLEA14 基因克隆 功能分析

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天山雪莲悬浮培养细胞总黄酮提取纯化工艺研究 被引量：3

16

作者 付婉艺 李厚华 +2 位作者 李玲 王亚杰 张存旭 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第8期175-181,共7页

【目的】分析天山雪莲悬浮培养细胞生长过程中生物量和总黄酮含量的变化,优化总黄酮的提取纯化方法。【方法】采用L9(34)正交设计优化天山雪莲悬浮培养细胞中总黄酮的超声提取工艺,比较聚酰胺层析法、碱提酸沉法和聚酰胺酸碱法对总黄酮... 【目的】分析天山雪莲悬浮培养细胞生长过程中生物量和总黄酮含量的变化,优化总黄酮的提取纯化方法。【方法】采用L9(34)正交设计优化天山雪莲悬浮培养细胞中总黄酮的超声提取工艺,比较聚酰胺层析法、碱提酸沉法和聚酰胺酸碱法对总黄酮含量、纯度及回收率的影响。【结果】在3～15d,随着培养时间的增加,天山雪莲悬浮培养细胞的生物量和总黄酮含量明显增加,在培养15d时均较高,分别为21.9g/L和66.5mg/g,表明天山雪莲悬浮培养细胞最适收获时间为培养15d;总黄酮提取最佳工艺为:70℃超声条件下,采用体积分数70%的乙醇连续提取3次,可以得到66.5mg/g总黄酮;总黄酮纯化的最佳方法为:聚酰胺层析法和碱提酸沉法联用,即聚酰胺酸碱法,获得的总黄酮纯度和回收率均较高,分别为6.86g/kg和47.6%。【结论】获得了天山雪莲悬浮培养细胞总黄酮提取和纯化的最佳方法,为天山雪莲药制品的工业化生产提供了参考。 展开更多

关键词 天山雪莲 愈伤组织 液体培养 聚酰胺层析法 碱提酸沉法

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天山雪莲组培苗生根培养体系的优化 被引量：2

17

作者 吕亚丽 郭顺星 孟志霞 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1291-1294,共4页

目的研究不同培养基、不同植物激素和活性炭对天山雪莲组培苗生根的影响。方法采用7种培养基,3种植物激素和不同添加量的活性炭,通过测定天山雪莲的根长、根数和生根率3个生根指标来筛选最适生根培养基。结果有4种培养基可以促进生根,其... 目的研究不同培养基、不同植物激素和活性炭对天山雪莲组培苗生根的影响。方法采用7种培养基,3种植物激素和不同添加量的活性炭,通过测定天山雪莲的根长、根数和生根率3个生根指标来筛选最适生根培养基。结果有4种培养基可以促进生根,其中White培养基的效果最佳,根长达3.431cm,根数2条,生根率达80%;添加生长素IAA(吲哚乙酸)、IBA(吲哚丁酸)和NAA(萘乙酸)均可以促进生根,其中0.2mg·L-1的IAA的效果最佳,根长达到1.294cm,平均根数达到8条,生根率为100%;添加活性炭可以提高生根质量,最适添加量为1g·L-1。此时,平均根长为1.620cm,平均根数为9条,生根效果最佳。结论天山雪莲组培苗最适生根培养基为White+0.2mg·L-1IAA+1g·L-1活性炭。 展开更多

关键词 天山雪莲 培养基 植物激素 活性炭 生根

原文传递

天山雪莲二倍体与四倍体总黄酮含量的测定与比较 被引量：3

18

作者 张蜀敏 王晓军 陈建业 《当代医学》 2009年第33期46-47,共2页

目的测定与比较天山雪莲二倍体与四倍体组培苗总黄酮含量。为四倍体天山雪莲进一步开发利用奠定基础。方法用紫外分光光度法测定天山雪莲二倍体与四倍体总黄酮的含量。结果天山雪莲组培苗中,四倍体总黄酮含量大于二倍体总黄酮含量,且相... 目的测定与比较天山雪莲二倍体与四倍体组培苗总黄酮含量。为四倍体天山雪莲进一步开发利用奠定基础。方法用紫外分光光度法测定天山雪莲二倍体与四倍体总黄酮的含量。结果天山雪莲组培苗中,四倍体总黄酮含量大于二倍体总黄酮含量,且相对于二倍体总黄酮含量增加23%。结论四倍体天山雪莲在总黄酮含量上增高,具有开发利用价值。 展开更多

关键词 天山雪莲 四倍体 总黄酮

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天山雪莲RAPD反应条件的优化及再生体系DNA多态性分析 被引量：2

19

作者 欧元 袁晓凡 +3 位作者 赵兵 王晓东 陈书安 王玉春 《中国现代中药》 CAS 2009年第2期16-19,共4页

目的:用RAPD法研究天山雪莲再生过程中DNA的变异。方法:优化RAPD反应体系中各影响因素,分别以天山雪莲种子苗、愈伤组织、丛生芽及再生植株的总DNA为模板,进行多态性分析。结果:优化反应体系为:Mg2+2.50mmol·L-1、Taq DNA聚合酶1.... 目的:用RAPD法研究天山雪莲再生过程中DNA的变异。方法:优化RAPD反应体系中各影响因素,分别以天山雪莲种子苗、愈伤组织、丛生芽及再生植株的总DNA为模板,进行多态性分析。结果:优化反应体系为:Mg2+2.50mmol·L-1、Taq DNA聚合酶1.00U、引物0.30μmol·L-1、模板DNA 20ng、dNTP0.20mmol·L-1,退火温度为37℃。20条随机引物共扩增出174条带,平均每条引物扩增8.7条带,其中多态性条带18条,多态性位点比率为10.3%。天山雪莲再生体系与种子苗之间相似性系数为0.75～0.80。结论:天山雪莲再生过程中在DNA水平上发生了一定程度的变异。 展开更多

关键词 天山雪莲 再生体系 RAPD

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天山雪莲rbcS基因启动子的克隆及序列分析 被引量：2

20

作者 张亚敏 杨晶 +1 位作者 王爱英 祝建波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期146-152,共7页

以天山雪莲(S.involucrata Kar.et Kir.)为材料,根据已获得的天山雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因组序列设计引物,采用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和高效TAIL-PCR(hiTAIL-PCR)扩增到rbcS基因5′上游启动子序列,长为1 668bp。... 以天山雪莲(S.involucrata Kar.et Kir.)为材料,根据已获得的天山雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因组序列设计引物,采用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)和高效TAIL-PCR(hiTAIL-PCR)扩增到rbcS基因5′上游启动子序列,长为1 668bp。用PlantCare和PLACE软件序列分析表明,该序列具有启动子的基本元件TATA-box、CA AT-box,包含多个胁迫诱导元件,如光诱导元件、赤霉素、低温诱导元件,昼夜节律调控元件等。构建pBI-PsikrbcS-GUS植物表达载体,并成功将其转化进入农杆菌。sikrbcS基因启动子的克隆与分析为进一步研究雪莲1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因的表达调控奠定了基础。 展开更多

关键词 天山雪莲 RBCS 热不对称交错PCR 高效TAIL-PCR 启动子 序列分析

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