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三色散凝胶贴膏剂的基质处方优化及其对KOA大鼠滑膜炎症的干预效应观察 被引量：5
1
作者 杨楠 刘子修 +4 位作者 张力 廖太阳 茆军 王培民 张农山 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期32-39,共8页
目的优化三色散凝胶贴膏剂的基质处方工艺,研究其对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的干预效应。方法以综合感官、初黏力、持黏力、剥离强度为评价指标,以聚丙烯酸钠、甘羟铝、酒石酸、甘油为考察因素,采用正交实验筛选最优基质处方。随后... 目的优化三色散凝胶贴膏剂的基质处方工艺,研究其对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的干预效应。方法以综合感官、初黏力、持黏力、剥离强度为评价指标,以聚丙烯酸钠、甘羟铝、酒石酸、甘油为考察因素,采用正交实验筛选最优基质处方。随后,将大鼠随机分为空白组、模型组、三色散凝胶贴膏剂组、三色散传统制剂组、三色散凝胶贴膏剂(含促渗剂)组。采用改良的Hulth法构建KOA模型,造模成功后,各给药组外敷膏药28 d。末次给药后,提取各组大鼠滑膜组织。HE染色评估滑膜炎症,天狼星红染色评估滑膜胶原沉积情况,Krenn评分评价滑膜炎症情况。Western blot和qPCR检测滑膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白和mRNA表达。结果经过筛选得到三色散凝胶贴膏剂的最优基质处方为聚丙烯酸钠50 g,甘羟铝2.5 g,酒石酸3 g,甘油500 g,三色散150 g,纯水50 mL,卡波姆120 g,薄荷脑36 g。大鼠给药28 d后,HE及天狼星红染色结果显示,与模型组比较,三色散凝胶贴膏剂组和三色散传统制剂组炎性细胞浸润、胶原沉积减少,纤维化程度减轻,Krenn评分显著降低(P<0.01),炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白和mRNA表达降低(P<0.01);与三色散传统制剂组比较,三色散凝胶贴膏剂组Krenn评分,IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表达无显著差异,IL-1β、IL-6 mRNA表达显著降低(P<0.05),TNF-αmRNA表达无显著差异。与三色散凝胶贴膏剂组比较,三色散凝胶贴膏剂(含促渗剂)组Krenn评分显著降低(P<0.05),IL-1β蛋白表达显著下降(P<0.01),TNF-α和IL-6蛋白表达无显著差异,IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论优化的基质处方工艺稳定可行,操作方法简便,制备得到的三色散凝胶贴膏剂外观及黏附性良好,且能有效减轻KOA大鼠滑膜炎症,效果不亚于三色散传统制剂。加入促渗剂能增强三色散凝胶贴膏剂的抗炎效果,为进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 三色散 凝胶贴膏 处方优化 膝骨关节炎 滑膜炎症
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三色散凝胶贴膏原料药提取工艺的优化
2
作者 冯明庆 杨楠 +3 位作者 方媛 廖太阳 王培民 刘子修 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第23期2841-2847,共7页
目的对三色散凝胶贴膏原料药的提取工艺进行优化。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、传统工艺组、水提组和醇提组,每组5只,采用前交叉韧带横断术建立膝骨关节炎模型,考察不同提取方式所得凝胶贴膏对膝骨关节炎大鼠的药效学影响。分别以... 目的对三色散凝胶贴膏原料药的提取工艺进行优化。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、传统工艺组、水提组和醇提组,每组5只,采用前交叉韧带横断术建立膝骨关节炎模型,考察不同提取方式所得凝胶贴膏对膝骨关节炎大鼠的药效学影响。分别以冷、热痛阈值与疼痛介质降钙素基因相关肽(CGRP)、环氧合酶2(COX-2)、P物质(SP)、前列腺素E2(PGE2)含量为指标进行镇痛实验;对大鼠滑膜组织进行HE染色,观察大鼠滑膜细胞增殖、炎症细胞浸润、血管入侵程度,并以白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6蛋白与mRNA表达水平为指标进行抗炎实验,对比各组大鼠的抗炎镇痛效果差异。以加醇倍数、提取时间、提取次数作为正交试验考察因素,以蔓荆子黄素、士的宁和马钱子碱含量为评价指标并计算综合评分,优选出三色散凝胶贴膏原料药的提取工艺并进行验证实验。结果与模型组比较,各给药组大鼠的冷痛阈值和热痛阈值(除传统工艺组外)均显著升高(P<0.05),疼痛介质CGRP、COX-2、SP、PGE2含量均显著下降(P<0.05);滑膜组织炎症细胞浸润减少、纤维化程度减轻,胶原沉积减少,可见少量毛细血管增生;滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白与mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。与传统工艺组比较,醇提组大鼠的大部分检测指标显著降低(P<0.05),而水提组大鼠仅热痛阈值和滑膜组织中IL-6 mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。三色散凝胶贴膏原料药的最佳提取工艺为取适量三色散细粉,加8倍量55%乙醇,加热回流提取90 min,提取2次;3次验证实验结果显示,蔓荆子黄素、士的宁与马钱子碱含量平均值分别为0.007%、0.092%、0.214%,RSD均小于5%。结论优化的三色散凝胶贴膏原料药提取工艺稳定、可行,有利于提高该制剂药效。 展开更多
关键词 三色散 凝胶贴膏 提取工艺 药效学 含量测定
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基于NLRP3炎症小体活化探讨“三色散”挥发油减轻膝骨关节炎滑膜炎症的机制 被引量：3
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作者 廖太阳 张力 +3 位作者 张皞晟 李晓辰 吴鹏 王培民 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第19期2335-2341,共7页
目的:基于NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体的活化探讨"三色散"挥发油减轻膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法:采取水蒸气蒸馏法提取"三色散"挥发油,采用气质联用(GC-MS)技术分析其组成。提取雄性SD大鼠膝关节成纤... 目的:基于NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体的活化探讨"三色散"挥发油减轻膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法:采取水蒸气蒸馏法提取"三色散"挥发油,采用气质联用(GC-MS)技术分析其组成。提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLS),采用CCK-8法检测10、25、50、100、250、500、1000μg/mL"三色散"挥发油对FLS存活率的影响;以脂多糖诱导12 h建立KOA炎症细胞模型,检测10、250μg/m L"三色散"挥发油对炎症模型细胞中NLRP3、胱天蛋白酶1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白及其mRNA相对表达量的影响,检测炎症模型细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18水平。结果:提取得到黄色澄清且有独特芳香气味的"三色散"挥发油0.51~0.61 g,提取率为0.33%~0.41%(n=9)。从该挥发油中共分离得到化学成分41种,鉴定了其中的30种,其峰面积之和占总峰面积的90.0736%;相对含量较高的成分依次为芳姜黄酮(17.5739%)、δ-杜松烯(15.4345%)、姜黄酮(11.5095%)等。当"三色散"挥发油质量浓度为10~250μg/mL时,其对FLS存活率均无显著影响(P>0.05)。与空白组比较,模型组细胞中NLRP3、caspase-1、ASC的蛋白及其mRNA相对表达量以及细胞上清液中IL-1β、IL-18水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,"三色散"挥发油10、250μg/m L组细胞及上清液中上述指标的相对表达量或水平均显著降低(P<0.05)。结论:"三色散"挥发油可能通过抑制FLS中NLRP3炎症小体的活化而减少下游炎症级联反应,从而发挥其改善KOA滑膜炎症的作用。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 滑膜炎症 NOD样受体家族3炎症小体 三色散 挥发油 成纤维样滑膜细胞
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三色散凝胶贴膏剂的HPLC指纹图谱研究和多元成分含量测定 被引量：5
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作者 杨楠 刘子修 +4 位作者 茆军 张力 廖太阳 王培民 张农山 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期548-553,共6页
目的建立三色散凝胶贴膏剂的HPLC指纹图谱,同时对其多种成分进行含量测定,为其质量控制提供依据。方法采用Hypersil Gold C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测... 目的建立三色散凝胶贴膏剂的HPLC指纹图谱,同时对其多种成分进行含量测定,为其质量控制提供依据。方法采用Hypersil Gold C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为240 nm,进样量为20μL,建立三色散凝胶贴膏剂的HPLC指纹图谱,运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2012A版对其进行相似度评价;采用外标法,利用混合对照品测定12个成分的含量。结果在选定的色谱条件下建立了三色散凝胶贴膏剂的HPLC指纹图谱,共标定16个共有峰,与对照品比对出12个成分,10批三色散凝胶贴膏剂的相似度在0.943~0.994之间;12个成分在一定浓度范围内均成良好的线性,相关系数均大于0.9991,平均加样回收率在95.35%~99.43%之间,RSD均小于3.0%,12个成分在10个批次中的含量基本一致。结论建立的三色散凝胶贴膏剂指纹图谱及含量测定方法,准确可靠,重复性好,可为进一步完善三色散凝胶贴膏剂的质量控制提供参考。 展开更多
关键词 三色散凝胶贴膏剂 高效液相色谱 指纹图谱 含量测定
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