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基于NOX4/ROS/p38信号通路探讨三焦祛湿方对膜性肾病小鼠的抗氧化应激作用 被引量：8
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作者 赵亚云 方敬 +3 位作者 刘海平 陈静洁 杨帆 陈志强 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1076-1083,共8页
目的研究三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)诱导的膜性肾病(membranous nephropathy,MN)小鼠的作用及其对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase... 目的研究三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)诱导的膜性肾病(membranous nephropathy,MN)小鼠的作用及其对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4)/活性氧(reactive oxygen species,ROS)/p38信号通路的影响,以阐明其抗氧化应激的作用机制。方法将60只小鼠随机分为对照组10只和造模组50只,造模组尾iv 6.5 mg/kg C-BSA建立MN小鼠模型,随机分为模型组及三焦祛湿方低、高剂量(3.71、7.42 g/kg)组和盐酸贝那普利(1.3 mg/kg)组,各给药组ig相应药物干预4周,检测各组小鼠24 h尿蛋白;腹主动脉取血,检测血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;取肾组织进行苏木素-伊红(HE)、Masson、过碘酸-六胺银(PASM)染色及透射电镜(TEM),观察肾组织病理形态变化,采用免疫荧光法检测肾组织免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)沉积和ROS表达情况;采用Western blotting法检测肾组织NOX4、p38和磷酸化p38(p-p38)蛋白表达情况。结果与对照组相比,模型组小鼠24 h尿蛋白显著升高(P<0.01);血清SOD活性显著降低,MDA水平显著升高(P<0.01);肾脏病理改变明显,可见肾小球体积增大,基底膜增厚,嗜复红蛋白沉积,“钉突”形成,上皮下可见电子致密物沉积,足突融合,IgG沿毛细血管襻颗粒状沉积;肾组织ROS表达显著增多(P<0.01),NOX4、p-p38蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组相比,各给药组小鼠24 h尿蛋白显著降低(P<0.01);血清SOD活性明显增强,MDA水平显著降低(P<0.05、0.01);肾组织病理损害明显改善;肾组织ROS表达显著减少(P<0.01),NOX4和p-p38蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论三焦祛湿方能够减少尿蛋白,减轻肾脏病理损伤,缓解肾组织氧化应激,其作用机制可能与调控NOX4/ROS/p38信号通路有关。 展开更多
关键词 三焦祛湿方 膜性肾病 氧化应激 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 活性氧 p38
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三焦祛湿方对C-BSA诱导膜性肾病小鼠肾脏保护作用及其对Nrf2/HO-1信号通路的影响 被引量：7
2
作者 赵亚云 方敬 +2 位作者 陈静洁 刘海平 陈志强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期58-65,共8页
目的:探索三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病(MN)小鼠肾脏保护作用及其对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路影响。方法:雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常组10只,模型组50只。模型组小鼠尾静脉注... 目的:探索三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病(MN)小鼠肾脏保护作用及其对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路影响。方法:雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常组10只,模型组50只。模型组小鼠尾静脉注射C-BSA(6.5 mg·kg^(-1)),造模成功小鼠按体质量随机分为模型组、三焦祛湿方低剂量(3.71 g·kg^(-1))组,三焦祛湿方高剂量(7.42 g·kg^(-1))组及盐酸贝那普利(1.3 mg·kg^(-1))组,分别给予各组相应剂量的药物灌胃,1次/d,连续4周。分别于造模前、造模后及治疗后检测24 h尿蛋白定量。给药后,腹主动脉取血检测血尿素氮(BUN),血清肌酐(SCr),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),总蛋白(TP),白蛋白(Alb)水平,肾组织行苏木素-伊红(HE),马松(Masson),过碘酸-六胺银(PASM)染色,光镜下观察小鼠肾组织病理形态变化,免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G(IgG)沉积情况,采用免疫荧光法检测肾组织中活性氧(ROS)表达情况。蛋白免疫印迹法(Western blot)观察肾组织Nrf2蛋白在细胞质和细胞核的表达情况,以及其下游因子血红素氧合酶-1(HO-1),醌还原型辅酶Ⅰ(NADH)脱氢酶1(NQO1)蛋白表达水平。结果:模型组小鼠24 h尿蛋白水平显著升高(P<0.01),血清TG,TC水平显著升高(P<0.01),TP,Alb水平显著降低(P<0.01);光镜下观察肾脏病理改变,可见肾小球体积增大,基底膜增厚,嗜复红蛋白沉积,"钉突"形成;荧光显微镜下可见IgG沿毛细血管襻弥漫性沉积;肾组织ROS表达水平显著升高(P<0.01);肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著升高(P<0.01),细胞质Nrf2蛋白表达显著降低(P<0.01),HO-1和NQO1蛋白表达显著升高(P<0.01);给药后,各治疗组小鼠24 h尿蛋白水平显著降低(P<0.01),血清TG,TC水平显著降低(P<0.01),TP,Alb水平明显升高(P<0.05,P<0.01);各治疗组肾组织病理损害明显改善;肾组织ROS表达水平显著降低(P<0.01);肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著降低( 展开更多
关键词 膜性肾病 核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路 三焦祛湿方
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