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题名Salsolinol合成酶的克隆和表达
被引量：1
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作者
冯程程
陈薛钗
刘可夫
曾凡
庆宏
邓玉林
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机构
北京理工大学生命学院
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出处
《科技导报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期73-76,共4页
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基金
国家重大科学仪器设备开发专项(2012YQ040140)
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文摘
Salsolinol合成酶是一种催化多巴胺和乙醛生成Salsolinol的酶,与帕金森病发病机制密切相关。研究发现Salsolinol合成酶与泛素的氨基酸序列高度相似,只有4个氨基酸位点有差异。本研究以泛素基因为模板,采用聚合酶链式反应技术对4个位点进行定点突变,将突变基因片段克隆到载体p ET30a-GST上,构建p ET30a-GST-Sal synthase重组载体,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达融合蛋白,经亲和层析柱纯化。结果表明,实现目的位点的定点突变,获得Sal合成酶基因,成功构建了GST-Sal synthase原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高纯度的GST-Sal synthase融合蛋白。
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关键词
salsolinol合成酶
定点突变
克隆表达
蛋白纯化
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Keywords
salsolinol synthase
site-directed mutagenesis
cloning and expression
protein purification
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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