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猪源致病性沙门氏菌耐药基因的分析 被引量：65
1
作者 马孟根 王红宁 +4 位作者 余勇 李成忠 张东 羊云飞 刘世贵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期65-70,共6页
采用平板稀释法,选用氨基糖苷类、四环素类、磺胺类和氯霉素类4大类抗生素的11种药物,对30株猪源致病性沙门氏菌进行了药敏试验,结果有28株菌(93.3%)至少对一种药物有耐药性;对四环素、强力霉素、磺胺甲基异口恶唑、复方新诺明、链霉素... 采用平板稀释法,选用氨基糖苷类、四环素类、磺胺类和氯霉素类4大类抗生素的11种药物,对30株猪源致病性沙门氏菌进行了药敏试验,结果有28株菌(93.3%)至少对一种药物有耐药性;对四环素、强力霉素、磺胺甲基异口恶唑、复方新诺明、链霉素、卡那霉素和氯霉素有耐药性的菌株较普遍,在所有菌株中占比例分别为83.3%、80%、80%、76.7%、60%、56.7%和56.7%。设计了25对引物,对耐药基因进行了扩增及序列测定,结果扩增到13种耐药基因,与GenBank中的相应基因有很高的同源性(≥98.1%)。30株猪源致病性沙门氏菌中至少含有一种耐药基因的菌株有28株(93.3%),sulⅠ、aph(3′)-Ⅱat、etC、Cat1t、etA和aadA1耐药基因较为普遍,检出率分别为76.7%、60%、60%、43.3%、40%和36.7%。药敏试验结果与耐药基因检测结果有很高的一致性(≥88%)。 展开更多
关键词 沙门氏菌 耐药基因 检测
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应用聚合酶链反应快速检测沙门氏菌 被引量：64
2
作者 黄金林 焦新安 +4 位作者 文其乙 潘志明 张小荣 张如宽 刘秀梵 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2002年第3期4-7,11,共5页
根据沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列设计引物 ,对沙门氏菌属 A～F各群中共 1 5株沙门氏菌标准菌株、2 7株沙门氏菌现场分离菌株和其他 1 0株非沙门氏菌菌株进行聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,结果沙门氏菌均出现 495 bp特异性 DNA扩增条... 根据沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因序列设计引物 ,对沙门氏菌属 A～F各群中共 1 5株沙门氏菌标准菌株、2 7株沙门氏菌现场分离菌株和其他 1 0株非沙门氏菌菌株进行聚合酶链反应 (PCR)扩增 ,结果沙门氏菌均出现 495 bp特异性 DNA扩增条带 ,所有对照均未出现特异条带 ,提示这对引物具有很强的沙门氏菌属特异性。PCR敏感性试验显示 ,该体系能检出 1 4pg以上的沙门氏菌 DNA。通过对 5种不同的 DNA模板提取方法的比较 ,选择操作简便、快速、成本低廉的热裂解法。采用该方法 ,对生鲜奶样进行检测 ,经与国家标准卫生检验方法相比较 ,两者符合率达 1 0 0 %。 展开更多
关键词 应用 聚合酶 链反应 沙门氏菌 人畜共患病
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沙门氏菌的检测技术与方法 被引量：64
3
作者 王毳 闫磊 曾庆祝 《现代食品科技》 EI CAS 2007年第5期82-85,75,共5页
本文从食品安全的角度出发,系统回顾各种检测沙门氏菌的方法,综述其在食品检测中的应用及进展。分子生物学技术与免疫学技术近年来以其敏感、快速、特异性等特点在沙门氏菌检测中得到广泛应用,尤其是PCR与ELISA技术已应用于实际检测中... 本文从食品安全的角度出发,系统回顾各种检测沙门氏菌的方法,综述其在食品检测中的应用及进展。分子生物学技术与免疫学技术近年来以其敏感、快速、特异性等特点在沙门氏菌检测中得到广泛应用,尤其是PCR与ELISA技术已应用于实际检测中。此外,本文还展望了今后沙门氏菌检测方法的发展方向及实际应用前景。 展开更多
关键词 沙门氏菌 食品微生物 检测技术
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沙门氏菌的invA基因序列分析与分子检测 被引量：58
4
作者 陈金顶 索青利 +1 位作者 廖明 辛朝安 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期868-871,共4页
目的采用聚合酶链反应和DNA序列分析,了解沙门氏菌侵袭蛋白A(invasionproteinA,invA)基因核苷酸序列有何差异,建立沙门氏菌的分子快速检测方法。方法根据沙门氏菌的invA基因核苷酸序列设计一对引物,应用聚合酶链反应技术,分别对3种沙门... 目的采用聚合酶链反应和DNA序列分析,了解沙门氏菌侵袭蛋白A(invasionproteinA,invA)基因核苷酸序列有何差异,建立沙门氏菌的分子快速检测方法。方法根据沙门氏菌的invA基因核苷酸序列设计一对引物,应用聚合酶链反应技术,分别对3种沙门氏菌标准菌株的invA基因及6种非沙门氏菌株进行PCR扩增,并将扩增的片段进行克隆及序列分析。结果3种沙门氏菌标准菌株PCR均扩增出283bp的特异条带,非沙门氏菌皆无特异带扩增;DNA序列分析证实,沙门氏菌的invA基因核苷酸序列比较保守。结论本研究建立的检测沙门氏菌方法具有较高的特异性与灵敏性,invA基因的序列分析为进一步研究沙门氏菌不同分离株的流行病学、遗传学与分子致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 沙门氏菌 invA基因 DNA序列分析 分子检测
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直接ELISA检测沙门氏菌方法的建立及其应用研究 被引量：44
5
作者 文其乙 焦新安 +2 位作者 刘秀梵 张如宽 杨静 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1995年第2期105-111,共7页
从已获得的４株沙门氏菌属特异杂交瘤单克隆抗体中，筛选出ＣＢ８和ｄｅ７两株单抗组合成酶标检测试剂，并建立了检测沙门氏菌的直接ＥＬＩＳＡ方法。它能检出沙门氏菌属９９％的菌株，而不与其他肠道杆菌反应（包括大肠杆菌、阴沟杆菌... 从已获得的４株沙门氏菌属特异杂交瘤单克隆抗体中，筛选出ＣＢ８和ｄｅ７两株单抗组合成酶标检测试剂，并建立了检测沙门氏菌的直接ＥＬＩＳＡ方法。它能检出沙门氏菌属９９％的菌株，而不与其他肠道杆菌反应（包括大肠杆菌、阴沟杆菌、产气杆菌、志贺氏菌、枸椽酸杆菌、克雷伯氏菌、变形杆菌和沙雷氏菌）。应用本方法检测粪样、鱼粉、奶样，其敏感性和特异性分别高达１００％和９７．６％，仅出现２．４％的假阳性率。该法不受各种样品成分的影响，而且在２～３ｄ即可完成样品筛选。直接ＥＬＩＳＡ具有快速简便、易于推广的优点，有重要实用价值。 展开更多
关键词 沙门氏菌 单克隆抗体 ELISA 检测
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食源性沙门氏菌检测方法的研究进展 被引量：51
6
作者 黄文宇 柳陈坚 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期95-97,F0004,共4页
沙门氏菌(Salmonella)是一百多年前发现的一种病原体,是一种常见的重要人畜共患病原菌,它不仅可以引起胃肠炎,还会引起伤寒、败血症及肠外灶性感染等多种症候群。在世界各地的食物中毒中,沙门氏菌引起的中毒病例占首位或第二位,因而受... 沙门氏菌(Salmonella)是一百多年前发现的一种病原体,是一种常见的重要人畜共患病原菌,它不仅可以引起胃肠炎,还会引起伤寒、败血症及肠外灶性感染等多种症候群。在世界各地的食物中毒中,沙门氏菌引起的中毒病例占首位或第二位,因而受到了人们强烈的关注,而沙门氏菌的检测方法正是人们关注的焦点之一。近年来,沙门氏菌检测技术有了很大的进展,由十分困难的传统分离培养法到免疫学检测方法发展成为今天的分子生物学检测技术。毫无疑问,检测方法的进展在便利沙门氏菌检测的同时,也将为更好地了解沙门氏菌奠定基础。综述了食源性沙门氏菌的概况以及其检测方法的研究进展。 展开更多
关键词 沙门氏菌 检测方法 进展
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荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌方法的建立及初步应用 被引量：48
7
作者 钟伟军 赵明秋 +2 位作者 邓中平 陈金顶 徐艳芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期220-224,共5页
根据编码鼠伤寒沙门氏菌肠毒素stn基因的核苷酸序列设计1对引物和荧光探针,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测沙门氏菌的核酸荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示,该方法检测沙门氏菌结果均为阳... 根据编码鼠伤寒沙门氏菌肠毒素stn基因的核苷酸序列设计1对引物和荧光探针,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测沙门氏菌的核酸荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示,该方法检测沙门氏菌结果均为阳性,而非沙门氏菌均为阴性;对带有沙门氏菌肠毒素stn基因的阳性质粒的检测敏感性为4个/μL。用该方法对人工污染沙门氏菌的鲜猪肉和鲜鸡蛋进行检测,当检样中沙门氏菌初始含菌量分别为1 CFU/g(鲜猪肉)和1 CFU/g(鲜鸡蛋),经过12 h的增菌后,检测结果均为阳性。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。此研究为食品中沙门氏菌快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。 展开更多
关键词 沙门氏菌 荧光定量PCR 快速检测
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PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用 被引量：37
8
作者 刘华伟 郭蔼光 +1 位作者 马立农 邱立 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期55-58,共4页
PCR是一种体外核酸扩增技术 ,具有敏感性强、特异性高、快速、简便等优点 ,在医学、生物学等领域中得到了广泛应用。文章系统地阐述了PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用 ,并对引物基因设计、PCR扩增过程中的技术参数和常见疑难问题做... PCR是一种体外核酸扩增技术 ,具有敏感性强、特异性高、快速、简便等优点 ,在医学、生物学等领域中得到了广泛应用。文章系统地阐述了PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用 ,并对引物基因设计、PCR扩增过程中的技术参数和常见疑难问题做了归纳总结。同时简要介绍了PCR技术的研究进展 。 展开更多
关键词 PCR技术 沙门氏菌 检测技术 聚合酶链式反应
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沙门氏菌的检测技术和方法的研究进展 被引量：47
9
作者 张萍 冯芳 《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第5期1834-1841,共8页
沙门氏菌是威胁公众卫生安全的一种重要的致病菌,食用了被沙门氏菌污染的食品或者药品后,能引起人和动物中毒并引起多种严重的疾病。因此建立快速、准确的沙门氏菌的检测方法是预防和控制沙门氏菌疾病的关键。本文主要对目前用于沙门氏... 沙门氏菌是威胁公众卫生安全的一种重要的致病菌,食用了被沙门氏菌污染的食品或者药品后,能引起人和动物中毒并引起多种严重的疾病。因此建立快速、准确的沙门氏菌的检测方法是预防和控制沙门氏菌疾病的关键。本文主要对目前用于沙门氏菌检测的技术和方法进行了综述,介绍了几种高效、准确的快速检测方法。通过对大量国内外文献的检索,在文中对快速检测技术和方法的原理、应用情况以及各自的优势和缺点进行了分类和总结,尤其是对纳米技术在沙门氏菌检测中的应用作了重点描述,希望能为沙门氏菌的检测方法研究提供参考。 展开更多
关键词 沙门氏菌 检测技术 研究进展
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沙门氏菌的检测技术进展 被引量：47
10
作者 刘喆 张书萧 +5 位作者 王少辉 陈晓平 马志永 郭欢欢 田明尧 金宁一 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第2期81-86,共6页
沙门氏菌是影响食品公共安全的重要因素之一。目前沙门氏菌的检测方法主要包括传统方法、以分子生物学为基础的方法、以免疫学为基础的方法、电阻抗法、生物传感器法、噬菌体法以及联合检测方法。本文主要对目前各种检测方法的原理、优... 沙门氏菌是影响食品公共安全的重要因素之一。目前沙门氏菌的检测方法主要包括传统方法、以分子生物学为基础的方法、以免疫学为基础的方法、电阻抗法、生物传感器法、噬菌体法以及联合检测方法。本文主要对目前各种检测方法的原理、优缺点、应用情况以及发展前景进行了概述。 展开更多
关键词 沙门氏菌 检测 食源致病菌
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沙门氏菌生物学研究进展 被引量：46
11
作者 朱奇 陆斌兴 +1 位作者 覃有泉 樊秋云 《疾病监测与控制》 2015年第7期474-478,共5页
1885年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌,故定名为沙门氏菌属。沙门氏菌为常见的肠道病原菌之一,在自然界分布广泛,种类繁多,目前已检测出沙门氏菌血清型2 500余种,我国已有292个血清型的报道,所致疾病统称沙门氏菌感染。沙门... 1885年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌,故定名为沙门氏菌属。沙门氏菌为常见的肠道病原菌之一,在自然界分布广泛,种类繁多,目前已检测出沙门氏菌血清型2 500余种,我国已有292个血清型的报道,所致疾病统称沙门氏菌感染。沙门氏菌不但能引起家畜家禽及其他动物发生急性、慢性或隐性感染,而且还能通过污染食物导致人的食物中毒,对人类造成很大的威胁。在世界各国的各类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常居榜首。在英国,就以沙门氏菌为首位,美国则为第二位。我国内陆地区以沙门氏菌为首位。文章将对沙门氏菌的生物学研究进展作简要综述。 展开更多
关键词 沙门氏菌 发展 特征 致病性 检测
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多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌 被引量：40
12
作者 石晓路 扈庆华 +6 位作者 张佳峰 李庆阁 王冰 林一曼 庄志雄 刘小立 张顺祥 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1053-1056,共4页
目的建立改良分子信标-多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法,应用于食源性致病菌的快速诊断。方法根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因,分别设计一对引物和改良分子信标探针,用同色荧光标记,用于同体系检测沙门... 目的建立改良分子信标-多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法,应用于食源性致病菌的快速诊断。方法根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因,分别设计一对引物和改良分子信标探针,用同色荧光标记,用于同体系检测沙门菌。志贺菌根据ipaH基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,加入沙门菌检测体系中,建立三重实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于同时对沙门菌、志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果改良分子信标-多重实时PCR反应体系DNA灵敏度为69-93 fg／μl,菌液灵敏度为32-64 CFU／ml或1-2 CFU／PCR反应体系,无交叉反应。该反应体系同时检测134株沙门菌和67株志贺菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对细菌性食物中毒样本等共1100份同时进行沙门菌和志贺菌检测,569份沙门菌实时PCR阳性,其中551份沙门菌培养阳性;42份志贺菌实时PCR阳性,其中41份志贺菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需时间2 h至1 d。结论改良分子信标-多重实时PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于沙门菌和志贺菌食物中毒的快速诊断,伤寒、痢疾等肠道传染病的初筛及预防医学门诊的健康人群体检,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。 展开更多
关键词 沙门菌 志贺菌 多重实时聚合酶链反应 同步检测
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PCR扩增invA基因特异性检测沙门氏菌 被引量：30
13
作者 卢强 陈贵连 林万明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1994年第3期251-256,共6页
建立了扩增ｉｎｖＡ基因检测沙门氏菌的ＰＣＲ方法，对收集的５０个血清型１２３株沙门氏菌及７种２７株非沙门菌进行ＰＣＲ，２％琼脂糖电泳检查，结果所有沙门氏菌都扩增出了３００ｂｐ的特异性产物，非沙门氏菌都未扩增出此目的条带... 建立了扩增ｉｎｖＡ基因检测沙门氏菌的ＰＣＲ方法，对收集的５０个血清型１２３株沙门氏菌及７种２７株非沙门菌进行ＰＣＲ，２％琼脂糖电泳检查，结果所有沙门氏菌都扩增出了３００ｂｐ的特异性产物，非沙门氏菌都未扩增出此目的条带。产物的特性由ｓｌｏｔｂｌｏｔ杂交进一步证实。通过电泳判定结果，该法可检出扩增体系中１０ｐｇ染色体ＤＮＡ及１０＾２ｃｆｕ的纽波特沙门氏菌５００２９。 展开更多
关键词 invA基因 沙门氏菌 聚合酶链反应
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沙门氏菌多重PCR检测方法的建立 被引量：33
14
作者 邵碧英 陈彬 +2 位作者 汤敏英 吴谦 张体银 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期489-492,共4页
采用CTAB/NaCl法提取沙门氏菌及对照菌株的基因组DNA。对引物浓度、TaqDNA聚合酶用量进行优化,建立了沙门氏菌属特异基因-hut基因(495bp)、hilA基因(490bp)、invA基因(284bp)和hns基因(152bp)间的多重PCR检测方法,并进行了灵敏度测试。... 采用CTAB/NaCl法提取沙门氏菌及对照菌株的基因组DNA。对引物浓度、TaqDNA聚合酶用量进行优化,建立了沙门氏菌属特异基因-hut基因(495bp)、hilA基因(490bp)、invA基因(284bp)和hns基因(152bp)间的多重PCR检测方法,并进行了灵敏度测试。结果表明,建立的多重PCR检测结果与预期一致,二重PCR的检测灵敏度与单一PCR的一致,三重PCR检测灵敏度有所下降。 展开更多
关键词 沙门氏菌 基因组DNA 多重PCR 检测灵敏度
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沙门氏菌检测技术研究进展 被引量：40
15
作者 李杰 丁承超 +7 位作者 翟续昭 王广彬 刘武康 曾海娟 王淑娟 孙静娟 董庆利 刘箐 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第4期126-132,共7页
沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的人畜共患病原菌,不仅能引起动物伤寒、霍乱,还会导致人类胃肠炎、败血症等疾病,严重威胁人、畜的生命健康,由其引起的食品安全事件高居所有食源性致病菌之首。食品中沙门氏菌的快速、准确检测是预防与... 沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的人畜共患病原菌,不仅能引起动物伤寒、霍乱,还会导致人类胃肠炎、败血症等疾病,严重威胁人、畜的生命健康,由其引起的食品安全事件高居所有食源性致病菌之首。食品中沙门氏菌的快速、准确检测是预防与控制沙门氏菌传播蔓延的重要手段。随着生物学、化学、物理等学科的快速发展,沙门氏菌的检测技术已从传统的分离培养和生化鉴定,发展到免疫学、分子生物学、电化学、传感器、生物芯片等快速、高通量检测,尤其是近年来与纳米技术、光谱学、质谱学以及代谢组学等的结合使用,为沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测方法提供了新的发展方向。本文在参阅国内外最新研究报道的基础上,对各种方法进行总结阐述,并对沙门氏菌未来检测技术的发展动向予以分析。 展开更多
关键词 沙门氏菌 人畜致病菌 食品安全 检测技术 研究进展
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食源性沙门氏菌的研究进展 被引量：36
16
作者 杨怀珍 牟亚 罗薇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第4期69-71,75,共4页
沙门氏菌是一种全球性重要的人畜共患病原菌,不仅能引起家畜、鼠类和禽类等动物的疾病,还可以通过食物传播感染人类,引起人类食物中毒。我国细菌性食物中毒中有70%~80%是由沙门氏菌引起的,而且大多数来源于动物源性食品。因此,沙门氏菌... 沙门氏菌是一种全球性重要的人畜共患病原菌,不仅能引起家畜、鼠类和禽类等动物的疾病,还可以通过食物传播感染人类,引起人类食物中毒。我国细菌性食物中毒中有70%~80%是由沙门氏菌引起的,而且大多数来源于动物源性食品。因此,沙门氏菌是重要的食源性致病菌,是引起食品污染及食物中毒的主要病原菌,具有重要的公共卫生意义。文章就食源性沙门氏菌的食品污染状况及引发的食品安全事件、检测方法和耐药性等研究成果进行了综述。 展开更多
关键词 食源性 沙门氏菌 食品污染状况 检测方法 耐药性 防治
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环介导等温扩增技术快速检测沙门菌 被引量：34
17
作者 朱胜梅 吴佳佳 +3 位作者 徐驰 屈炯 成炜 陈福生 《现代食品科技》 EI CAS 2008年第7期725-730,共6页
环介导等温扩增(1oop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种在等温条件下高特异、高效、快速地扩增靶序列的DNA扩增新技术。以沙门菌(Salmonellaspp.)为研究对象,根据其特异性的invA基因,设计了一套特异性引物对该基因进行了L... 环介导等温扩增(1oop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种在等温条件下高特异、高效、快速地扩增靶序列的DNA扩增新技术。以沙门菌(Salmonellaspp.)为研究对象,根据其特异性的invA基因,设计了一套特异性引物对该基因进行了LAMP,同时优化了其反应条件,建立了沙门菌的LAMP快速检测技术。结果表明,LAMP的最佳反应条件为外引物浓度5pmol/L、内引物浓度40pmol/L,Mg2+浓度6mmol/L,dNTP浓度0.8mmol/L,甜菜碱浓度0.8mmol/L,BstDNA聚合酶8U,反应温度63℃,反应时间1h。在此条件下,LAMP检测沙门菌DNA的敏感度达10fg/反应,且与其他常见的细菌无交叉反应。其对牛奶样品的检出量为102cfu/mL,适合于食品中污染沙门菌的快速检测。 展开更多
关键词 环介导等温DNA扩增 LAMP 沙门菌 快速检测
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直接ELISA和PCR相结合快速检测样品中的沙门氏菌 被引量：32
18
作者 黄金林 焦新安 +4 位作者 文其乙 潘志明 张小荣 张如宽 刘秀梵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期321-323,327,共4页
目的　通过样品试验 ,得到优化的沙门氏菌检测方法。方法　在单抗直接ELISA和PCR法检测沙门氏菌的基础上 ,将PCR法和单抗直接ELISA两种快速检测方法进行比较研究。结果　直接ELISA方法结合PCR方法对城区 14 1份水样、2 0 0 2年春季饮食... 目的　通过样品试验 ,得到优化的沙门氏菌检测方法。方法　在单抗直接ELISA和PCR法检测沙门氏菌的基础上 ,将PCR法和单抗直接ELISA两种快速检测方法进行比较研究。结果　直接ELISA方法结合PCR方法对城区 14 1份水样、2 0 0 2年春季饮食行业工作人员健康检查的 14 2 6份人粪便样品 ,并与常规国标方法对比 ,直接ELISA法的敏感性和特异性达 10 0 %和 97 2 % ,PCR法的敏感性和特异性均为 10 0 %。通过对鲜牛奶样、龙虾、虾仁、熟食制品、水样、人粪样测试 ,最终确定较优化的沙门氏菌检测程序。结论　PCR法的敏感性优于直接ELISA法。对大量样品采用直接ELISA筛检 ,除去大量阴性样品 ,阳性样品用PCR法作进一步鉴定 ;需要确定血清型时则用国标方法。 展开更多
关键词 ELISA PCR 快速检测 样品 沙门氏菌
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沙门氏菌PCR检测方法的建立 被引量：33
19
作者 许会会 雷连成 +2 位作者 谢芳 杜涛峰 韩文瑜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期94-97,共4页
根据GenBank沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因序列设计引物,扩增特异的202 bp核苷酸片段,经过优化PCR扩增条件,建立了沙门氏菌特异、敏感和快速的PCR检测方法。特异性试验结果表明,从沙门氏菌参考菌株中均能扩增出特异性的核苷酸片段,大肠... 根据GenBank沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因序列设计引物,扩增特异的202 bp核苷酸片段,经过优化PCR扩增条件,建立了沙门氏菌特异、敏感和快速的PCR检测方法。特异性试验结果表明,从沙门氏菌参考菌株中均能扩增出特异性的核苷酸片段,大肠杆菌、巴氏杆菌、金黄色葡萄菌、志贺氏菌、蜡样芽孢杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,采用简便的直接煮沸裂解法制备样品DNA,该方法的敏感性可达2.43×103CFU/mL。 展开更多
关键词 沙门氏菌 PCR 检测
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三重LAMP法检测食品中沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌 被引量：35
20
作者 姜侃 吕沁风 +3 位作者 汪新 夏琳 张峥 陈小珍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第24期182-187,共6页
为能一步快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌3种食源性致病菌,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对沙门氏菌的侵袭蛋白(invA)基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、单增李斯特菌(hly)基因3个高度保守的基... 为能一步快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌3种食源性致病菌,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对沙门氏菌的侵袭蛋白(invA)基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、单增李斯特菌(hly)基因3个高度保守的基因,设计出3套LAMP引物。以8株代表目标菌株,三重LAMP反应体系中Mg2+浓度4.6mmol/L、扩增温度61℃。通过电泳检测、离心观察沉淀和荧光检测证明该方法能够在90min内一次性检出以上3种致病菌。3种菌的检测灵敏度均约为10fg/μL,是PCR检测灵敏度(10pg/μL)的1000倍。以无害李斯特菌等常见的20株非目标菌株为对照,证明了此方法的特异性。LAMP产物DNA测序结果与预期一致,证明了该方法的正确性。该三重LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏度高的优点,适用于食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的快速检测。 展开更多
关键词 LAMP 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 快速检测
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