一株低温脂肪酶产生菌的筛选鉴定与产酶发酵初探 被引量：6

1

作者 蓝卉 蔡宇杰 +1 位作者 廖祥儒 庞建勋 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期550-554,共5页

从无锡惠山采集的土样中筛选得到一株产低温脂肪酶的细菌,经形态和16S rDNA序列鉴定,命名为Serratia marcescens SYBC Y-R。利用合成培养基初步确定摇瓶发酵产脂肪酶的最适碳源为乳糖(质量浓度2.5 g/L),最适氮源为氯化铵(质量浓度1.5 g/... 从无锡惠山采集的土样中筛选得到一株产低温脂肪酶的细菌,经形态和16S rDNA序列鉴定,命名为Serratia marcescens SYBC Y-R。利用合成培养基初步确定摇瓶发酵产脂肪酶的最适碳源为乳糖(质量浓度2.5 g/L),最适氮源为氯化铵(质量浓度1.5 g/L),钙离子明显地促进了该菌发酵产脂肪酶。 展开更多

关键词 低温脂肪酶 碳氮源 钙离子 发酵 SERRATIA marcescens sybc Y—R

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一株从腐烂蓝藻中分离的细菌的鉴定及其发酵产蛋白酶研究 被引量：3

2

作者 尹静 蔡宇杰 +4 位作者 廖祥儒 郝之奎 李婷婷 李桂英 张大兵 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期911-916,共6页

应用形态学、生理生化和16SrRNA基因序列分析方法,鉴定了从腐烂蓝藻中分离得到的一株细菌,利用液态发酵法探讨了碳、氮源等对其发酵产蛋白酶的影响并研究了其部分酶学性质。结果表明,该菌可归入沙雷氏菌属,定名为Serratia marcescens SY... 应用形态学、生理生化和16SrRNA基因序列分析方法,鉴定了从腐烂蓝藻中分离得到的一株细菌,利用液态发酵法探讨了碳、氮源等对其发酵产蛋白酶的影响并研究了其部分酶学性质。结果表明,该菌可归入沙雷氏菌属,定名为Serratia marcescens SYBC YH,其最适碳源为果糖、葡萄糖、羽毛粉或玉米粉,最适氮源为玉米浆粉、酵母膏和牛肉膏;该菌还可以蓝藻为唯一氮源发酵产耐有机溶剂蛋白酶。该酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。 展开更多

关键词 蛋白酶 细菌鉴定 发酵 Serratiamarcescens sybc YH

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毛栓菌产漆酶条件优化及该酶对合成染料脱色的特性 被引量：21

3

作者 刘文华 蔡宇杰 +1 位作者 范晶晶 廖祥儒 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期727-738,共12页

【目的】提高菌株Trametes hirsuta SYBC-L19漆酶产量,并研究该酶对合成染料脱色的性质。【方法】通过单因素和响应面设计,对产漆酶培养基进行优化。【结果】最优培养基为:玉米粉20.0 g/L、马铃薯淀粉32.4 g/L、酒石酸铵2.9 g/L、吐温80... 【目的】提高菌株Trametes hirsuta SYBC-L19漆酶产量,并研究该酶对合成染料脱色的性质。【方法】通过单因素和响应面设计,对产漆酶培养基进行优化。【结果】最优培养基为:玉米粉20.0 g/L、马铃薯淀粉32.4 g/L、酒石酸铵2.9 g/L、吐温80 0.5 g/L、CuSO4.5H2O 2.0 mmol/L、香兰素0.54 mmol/L、NaH2PO4.2H2O 2.0 g/L、MgSO4.7H2O0.5 g/L、MnSO4.H2O 0.1 g/L;最佳培养条件为:培养温度30°C,初始pH 6.0,装液量40 mL/250 mL,接种量8%。【结论】培养8 d酶活达35 U/mL,是优化前的39倍。对漆酶催化合成染料脱色进行了考察,发现该酶在60°C下对偶氮类染料AR1和RB5能迅速脱色,5 min内即可完成。 展开更多

关键词 TRAMETES hirsuta sybc-L19 漆酶 优化 响应面 脱色

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培养基及培养条件对Pycnoporus sp. SYBC-L1分泌漆酶的影响 被引量：10

4

作者 王志新 蔡宇杰 +3 位作者 李颜颜 廖祥儒 张峰 张大兵 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期832-839,共8页

从作者所在实验室保存的3株白腐真菌中筛选到一株液态发酵产漆酶的密孔菌Pycnop-orus sp. SYBC-L1,以漆酶活力为指标,采用正交试验法,优化了Pycnoporussp.SYBC-L1分泌漆酶的培养基:麸皮水煮液60 g/L,葡萄糖60 g/L,豆粕粉15 g/L,CuSO4.5H... 从作者所在实验室保存的3株白腐真菌中筛选到一株液态发酵产漆酶的密孔菌Pycnop-orus sp. SYBC-L1,以漆酶活力为指标,采用正交试验法,优化了Pycnoporussp.SYBC-L1分泌漆酶的培养基:麸皮水煮液60 g/L,葡萄糖60 g/L,豆粕粉15 g/L,CuSO4.5H2O 1.0 mmol/L;培养条件:初始pH 3.0,装液量50 mL/250 mL,30℃、200 r/min培养13 d,漆酶活力达24.95 U/mL,为优化前的36.16倍。 展开更多

关键词 密孔菌sybc-L1 漆酶 发酵 优化

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白腐菌Trametes hirsuta SYBC-L19液态发酵水葫芦产漆酶 被引量：7

5

作者 刘文华 蔡宇杰 +4 位作者 孙付宝 张峰 孙啸 范晶晶 廖祥儒 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1252-1261,共10页

利用单因素法和响应面法对白腐菌Trametes hirsuta SYBC-L19利用水葫芦液态发酵产漆酶的培养基和培养条件进行了优化,确定了最佳培养基:水葫芦41.0 g/L,玉米浆粉50.8 g/L,葡萄糖30.0 g/L,CuSO4.5H2O 0.6 g/L,吐温-80 0.5 g/L,香兰素0.5 ... 利用单因素法和响应面法对白腐菌Trametes hirsuta SYBC-L19利用水葫芦液态发酵产漆酶的培养基和培养条件进行了优化,确定了最佳培养基:水葫芦41.0 g/L,玉米浆粉50.8 g/L,葡萄糖30.0 g/L,CuSO4.5H2O 0.6 g/L,吐温-80 0.5 g/L,香兰素0.5 mmol/L,无机盐混合液50 mL/L。最佳培养条件为:培养温度30℃、初始pH值4.0、装液量80 mL/250 mL、接种体积分数8%,200r/min摇瓶培养8 d,酶活性达7 784 U/L,是优化之前的17.3倍。该研究为水葫芦等生物质资源的有效利用提供了参考。 展开更多

关键词 TRAMETES hirsuta sybc-L19 水葫芦 漆酶 优化 响应面

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白腐真菌SYBC-L2漆酶的分离纯化及其在毛纺染料脱色中的应用 被引量：7

6

作者 王志新 施晓燕 +1 位作者 蔡宇杰 廖祥儒 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期156-161,165,共7页

经过硫酸铵分级盐析、DEAE-cellulose离子交换层析、SephacrylTMS-200柱层析,从白腐菌株Phellinus sp.SYBC-L2所产的漆酶中纯化得到电泳纯漆酶Lac3,其纯化倍数为28.27,回收率为14.76%。Lac3为一种糖蛋白,糖含量29.66%,SDS-PAGE表观分子... 经过硫酸铵分级盐析、DEAE-cellulose离子交换层析、SephacrylTMS-200柱层析,从白腐菌株Phellinus sp.SYBC-L2所产的漆酶中纯化得到电泳纯漆酶Lac3,其纯化倍数为28.27,回收率为14.76%。Lac3为一种糖蛋白,糖含量29.66%,SDS-PAGE表观分子量约为64.3kD;其催化氧化DMP(2,6-Dimethoxyphenol)的表观Km值和Vmax分别为1.01mmol/L和186.2U/mg蛋白。Lac3的最适温度为60℃,最适pH为3.5;在30℃～50℃和pH4.5～9.0范围内稳定。Cu2+、SO42-、CO32-对Lac3具有一定促进作用,而Fe3+、Fe2+、NO3-则具有抑制作用。色素的最佳脱色条件为(Lac3终浓度为2U/ml):媒介元PV在温度50℃、pH值3.0的条件下反应2h,脱色率可达95.10%;弱酸蓝在温度40℃、pH值4.0的条件下作用3h,脱色率为75.09%。 展开更多

关键词 PHELLINUS sp sybc-L2 漆酶 分离纯化 酶学性质 脱色

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Pycnoporus sp. SYBC-L1 18S rDNA序列分析及其固态发酵水葫芦产漆酶的研究 被引量：6

7

作者 王志新 蔡宇杰 +2 位作者 廖祥儒 钱丽园 张大兵 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期5-10,共6页

从朽木上筛选到一株产漆酶的白腐真菌SYBC-L1,该菌株在PDA-Guaiacol培养基上显红色,通过18S rDNA序列测定和进化树聚类分析,表明其属于密孔菌属,命名为Pycnoporus sp. SYBC-L1。以水葫芦为基本培养基质,以漆酶活力为指标,对其产酶培养... 从朽木上筛选到一株产漆酶的白腐真菌SYBC-L1,该菌株在PDA-Guaiacol培养基上显红色,通过18S rDNA序列测定和进化树聚类分析,表明其属于密孔菌属,命名为Pycnoporus sp. SYBC-L1。以水葫芦为基本培养基质,以漆酶活力为指标,对其产酶培养基进行了初步优化,得其适宜的培养基为:水葫芦12.5%,可溶性淀粉与豆粕质量比1∶1,起始含水量65%,Cu2+浓度1.5mmol/L,没食子酸20μmol/L,30℃,培养9d,漆酶活力可达19.17U/g,为优化前的8.75倍。Pycnoporus sp. SYBC-L1漆酶提取的适宜条件为:20mmol/L,pH6.0的磷酸盐-柠檬酸缓冲液,浸提3h。 展开更多

关键词 Pycnoporus sp.sybc—L1 18S rDNA 漆酶 水葫芦 固态发酵

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一株几丁质酶产生菌的筛选及产酶条件优化 被引量：4

8

作者 郝之奎 杨美玲 +2 位作者 张自英 吴翰桂 廖祥儒 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1203-1211,共9页

从浙江省台州市剑门港海区采集海底淤泥样本,以几丁质作为惟一营养因子,筛选出5株几丁质酶产生菌,对其中一株产酶活性较高的菌株从形态学、生理生化、脂肪酸组成及含量、G+C含量、醌型及分子生物学特征进行了鉴定(gene Bank:HM136777)... 从浙江省台州市剑门港海区采集海底淤泥样本,以几丁质作为惟一营养因子,筛选出5株几丁质酶产生菌,对其中一株产酶活性较高的菌株从形态学、生理生化、脂肪酸组成及含量、G+C含量、醌型及分子生物学特征进行了鉴定(gene Bank:HM136777)。结果表明,该菌属于慢生根瘤菌科(Bradyrhizobiaceae),芽生杆菌属(Blastobacter)中的一种,命名为Bradyrhizobiaceae blastobacter SYBC-H2。P-B实验结果显示,几丁质、葡萄糖及玉米浆粉是该菌株产几丁质酶的关键营养因子,利用中心组合设计实验(Contral Composite Design)对该菌株的产酶培养基进行了成分优化,结果表明,当培养基主要成分几丁质、葡萄糖和玉米浆粉质量浓度分别为2.7、0.85、2.64 g/L时,几丁质酶活性最高,达到5.70 U/m L。 展开更多

关键词 sybc-H2 几丁质酶 分离 鉴定 发酵优化

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Pycnoporus sp.SYBC-L3漆酶催化偶氮染料脱色 被引量：1

9

作者 王琦 徐楚涵 +3 位作者 窦欣 管政兵 蔡宇杰 廖祥儒 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期53-60,共8页

为考察Pycnoporus sp.SYBC-L3漆酶Lac-L对偶氮染料的脱色、解毒效果,探究最佳的脱色反应条件,采用单因素分析方法研究了不同的反应条件对Lac-L催化3种偶氮染料(AR1、RB5、RV5R)脱色的影响,得到最佳处理条件,并通过比较被漆酶降解前后的... 为考察Pycnoporus sp.SYBC-L3漆酶Lac-L对偶氮染料的脱色、解毒效果,探究最佳的脱色反应条件,采用单因素分析方法研究了不同的反应条件对Lac-L催化3种偶氮染料(AR1、RB5、RV5R)脱色的影响,得到最佳处理条件,并通过比较被漆酶降解前后的染料对小麦和水稻发芽率及根、芽生长的影响,分析其毒性变化。结果表明:在以HBT为介体、反应温度50℃、pH分别为4.0(AR1,RV5R)和5.0(RB5)、漆酶用量1 U/mL、染料初始质量浓度分别为30 mg/L(AR1)和50 mg/L(RB5、RV5R)条件下,漆酶对3种偶氮染料的脱色效率最高,AR1和RV5R几乎完全降解,脱色率达到96.1%和97.8%,而RB5也有83.8%的脱色率。植物毒理实验表明,3种偶氮染料经漆酶降解后对小麦和水稻发芽率没有影响,对胚芽和根生长的抑制作用也有所降低。 展开更多

关键词 Pycnoporus sp.sybc-L3 漆酶 偶氮染料 漆酶脱色

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Chitinolyticbacter meiyuanensis SYBC-H1几丁质酶的性质及在虾皮水解中的作用

10

作者 郝之奎 蔡宇杰 +4 位作者 廖祥儒 胡明明 张海蓉 李娇阳 邢玉鹏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期705-710,共6页

以一株产几丁质酶细菌Chitinolyticbacter meiyuanensisSYBC-H1为材料,对几丁质酶进行了分离纯化及酶学性质研究。通过硫酸铵沉淀、DEAE-cellulose阴离子交换介质和SephadexG-100分子筛层析柱处理其所产几丁质酶,获取纯度为95%以上的几... 以一株产几丁质酶细菌Chitinolyticbacter meiyuanensisSYBC-H1为材料,对几丁质酶进行了分离纯化及酶学性质研究。通过硫酸铵沉淀、DEAE-cellulose阴离子交换介质和SephadexG-100分子筛层析柱处理其所产几丁质酶,获取纯度为95%以上的几丁质酶。酶学性质表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH值为6.5,在50℃以下较为稳定,在pH值为5.0时最稳定,β-巯基乙醇有利于防止半胱氨酸氧化而增加几丁质酶稳定性,EDTA可增加该酶稳定性,Na+,K+对几丁质酶有明显的激活作用,Zn2+,Mn2+,Fe2+,Fe3+对几丁质酶有较大的抑制作用。SYBC-H1几丁质酶可把虾皮水解为N-乙酰氨基葡萄糖,水解率为21.8%。 展开更多

关键词 几丁质酶 热稳定性 β-巯基乙醇 EDTA Chitinolyticbacter meiyuanensis sybc-H1

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Bacillus altitudinis SYBC hb4碱性β-葡萄糖苷酶基因的克隆表达及酶学性质的研究 被引量：3

11

作者 刘群 管政兵 +1 位作者 蔡宇杰 廖祥儒 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1203-1209,共7页

为获得耐碱性β-葡萄糖苷酶,进一步研究碱性β-葡萄糖苷酶的酶学性质。从实验室已有蜂蜜中筛选出一株耐碱性的高地芽孢杆菌Bacillus altitudinis SYBC hb4,根据Bacillus altitudinis SYBC hb4中β-葡萄糖苷酶(bglA)基因序列设计一对引物... 为获得耐碱性β-葡萄糖苷酶,进一步研究碱性β-葡萄糖苷酶的酶学性质。从实验室已有蜂蜜中筛选出一株耐碱性的高地芽孢杆菌Bacillus altitudinis SYBC hb4,根据Bacillus altitudinis SYBC hb4中β-葡萄糖苷酶(bglA)基因序列设计一对引物,通过PCR扩增技术,获得β-葡萄糖苷酶基因(bglA),将扩增后的bglA与质粒pColdII构建重组表达载体pColdII-bglA,并转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达。重组表达的β-葡萄糖苷酶酶活可达12.40 U/mL;该重组β-葡萄糖苷酶最适反应温度为60℃;最适反应pH值为pH 8.0;5 mmol/L的Mg^(2+)可使酶活提高50%左右。本实验所获得的碱性β-葡萄糖苷酶比已报道的重组酶在碱性条件下稳定性更好。 展开更多

关键词 碱性β-葡萄糖苷酶 大肠杆菌 基因克隆 酶学性质 高地芽孢杆菌

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沙雷氏菌发酵蓝藻生产蛋白酶 被引量：2

12

作者 李桂英 蔡宇杰 +1 位作者 廖祥儒 尹静 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期1043-1046,共4页

以富含蛋白质的蓝藻作有机氮源进行微生物发酵生产蛋白酶,为蓝藻的资源化利用提供一条新途径。采用单因素实验,研究了影响沙雷氏菌发酵蓝藻生产蛋白酶的培养基主要成分。结果发现,在实验范围内,沙雷氏菌发酵蓝藻生产蛋白酶的最佳碳源是... 以富含蛋白质的蓝藻作有机氮源进行微生物发酵生产蛋白酶,为蓝藻的资源化利用提供一条新途径。采用单因素实验,研究了影响沙雷氏菌发酵蓝藻生产蛋白酶的培养基主要成分。结果发现,在实验范围内,沙雷氏菌发酵蓝藻生产蛋白酶的最佳碳源是蔗糖,最佳速效氮源是尿素,最佳金属离子(盐)是ZnSO4,最佳产酶促进剂是吐温80。在单因素实验中,发酵上清液的蛋白酶活最高可达到941 U/mL,而且发酵周期短,发酵培养18 h即可达到最高酶(活)值。 展开更多

关键词 蛋白酶 蓝藻 沙雷氏菌 单因素实验

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微生物转化浮萍资源生产蛋白酶的条件 被引量：1

13

作者 李桂英 廖祥儒 蔡宇杰 《生物资源》 CAS 2018年第1期64-69,共6页

利用微生物转化富含蛋白质的浮萍生产蛋白酶,为浮萍的高值化利用开辟一条新途径。在摇瓶转化的基础上,探索在5L发酵罐上沙雷氏菌（Serratiasp.）SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳转化条件。通过对温度、通风量、搅拌转速、pH等参数的研究... 利用微生物转化富含蛋白质的浮萍生产蛋白酶,为浮萍的高值化利用开辟一条新途径。在摇瓶转化的基础上,探索在5L发酵罐上沙雷氏菌（Serratiasp.）SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳转化条件。通过对温度、通风量、搅拌转速、pH等参数的研究,发现在5L发酵罐上,沙雷氏菌SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳条件为通风量6vvm,搅拌转速400r/min,发酵温度30℃。转化过程中,采用全自动控制pH值（9.0）,蛋白酶的产量比不控制pH的对照组提高了23.3%。进一步研究发现,利用微生物沙雷氏菌SYBC H转化浮萍生产的蛋白酶具有耐有机溶剂的特性,在某些亲水性有机溶剂中保留90%以上的活性,是一种稀少珍贵的极端酶。 展开更多

关键词 蛋白酶生产 浮萍 沙雷氏菌 5L发酵罐

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Serratia sp. SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的研究

14

作者 李桂英 廖祥儒 蔡宇杰 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2018年第1期161-167,共7页

以富含蛋白质的浮萍作为有机氮源,接种一株通过自然筛选而得的新颖菌株Serratia sp.SYBC H,进行微生物发酵生产稀有的蛋白酶,为浮萍的高值化利用开创一条新途径。先采用单因素实验,研究影响Serratia sp.SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的发酵... 以富含蛋白质的浮萍作为有机氮源,接种一株通过自然筛选而得的新颖菌株Serratia sp.SYBC H,进行微生物发酵生产稀有的蛋白酶,为浮萍的高值化利用开创一条新途径。先采用单因素实验,研究影响Serratia sp.SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的发酵时间,碳源,C/N比,无机盐,产酶添加剂,结果发现:以小麦粉为碳源,小麦粉与浮萍比例为1:2,Na Cl,表面活性剂吐温80,显著促进Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶。接着采用正交试验,研究影响Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶的发酵培养基的主要组成及其使用量。结果显示,在实验范围内,影响Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶的发酵培养基组成及其最佳使用量为小麦粉15 g/L,浮萍30 g/L,吐温80,0.8%(V/V),Na Cl 0.05 mol/L。接种发酵18 h后,蛋白酶的生产值达到最大值,发酵液中最高蛋白酶活达到1459.94U/mL。 展开更多

关键词 蛋白酶生产 浮萍 沙雷氏菌 单因素试验 正交实验

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毛栓菌产漆酶

15

作者 邱并生 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2166-2166,共1页

漆酶是一种环境友好型酶类,其催化底物单电子氧化形成自由基,同时将分子氧还原形成水,产生的自由基则耦合成二聚体或低聚物。漆酶可催化氧化多种底物,如酚类及其衍生物、芳胺及其衍生物、羟酸及其衍生物、一些金属有机化合物和甾类激素... 漆酶是一种环境友好型酶类,其催化底物单电子氧化形成自由基,同时将分子氧还原形成水,产生的自由基则耦合成二聚体或低聚物。漆酶可催化氧化多种底物,如酚类及其衍生物、芳胺及其衍生物、羟酸及其衍生物、一些金属有机化合物和甾类激素、生物色素等,在环境保护与修复、造纸工业、有机合成、食品工业、生物监测等领域有着广泛的应用前景。例如在染料脱色方面,以白腐真菌为主的一组丝状真菌对染料的降解脱色在近二十年来成为染料生物脱色研究的热点和主流。 展开更多

关键词 TRAMETES hirsuta sybc-L19 漆酶 优化 响应面 脱色

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