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诱导小鼠白色脂肪来源的SVF分化为米色脂肪细胞的方法初探
1
作者 蒋硕 陈思远 +2 位作者 孟轩羽 刘迪晖 梁小弟 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第10期1822-1828,共7页
目的:探究将小鼠白色脂肪来源的SVF细胞诱导为米色脂肪细胞的方法,为米色脂肪的研究提供细胞模型。方法:分离培养小鼠脂肪组织来源的SVF细胞,观察其细胞形态及生长特性,分别用鸡尾酒法和米色脂肪诱导法处理细胞,在诱导的第0、2、4、6、8... 目的:探究将小鼠白色脂肪来源的SVF细胞诱导为米色脂肪细胞的方法,为米色脂肪的研究提供细胞模型。方法:分离培养小鼠脂肪组织来源的SVF细胞,观察其细胞形态及生长特性,分别用鸡尾酒法和米色脂肪诱导法处理细胞,在诱导的第0、2、4、6、8、10天收取细胞样品进行Western blot和RT-qPCR实验,油红O染色观察不同时间点培养皿中的脂质生成情况,并对针对脂滴大小定量。结果:实验分离的SVF细胞随着接种时间的延长逐渐呈长梭形,在+接种120 h后有呈螺旋式生长的趋势。Western blot和RT-qPCR结果显示两种诱导方法皆使过氧化物酶体增殖物受体γ(Peroxisomeproliferator activated receptor γ,PPARγ)和CCAAT-增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteins α,C/EBPα)基因表达升高(P<0.05),油红O染色结果显示,在两种方法的诱导下,脂质生成水平无差异,但与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法的脂肪细胞脂滴面积明显减少(P<0.05),并且小体积脂滴所占百分比较高。Western blot和RT-qPCR结果显示,与鸡尾酒法相比,米色脂肪诱导法使解偶联蛋白1(Uncoupling protein 1,UCP1)和含PR结构域蛋白16(PRD1-BF1-RIZ1 homologous domain containing 16,PRDM16)基因表达升高(P<0.05)。结论:与鸡尾酒法相比,该方法能够成功诱导SVF细胞向米色脂肪细胞分化,脂滴具备米色脂肪特征,并表达米色脂肪标记基因。 展开更多
关键词 svf细胞 米色脂肪细胞 UCP1 PRDM16 鸡尾酒诱导法
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自体脂肪基质细胞组织-脱细胞骨基质-壳聚糖支架对兔胫骨骨缺损修复作用
2
作者 杨鹏 邵擎东 +4 位作者 李宇飞 严旭 江峰 吕峰霞 韦苏 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第1期29-34,共6页
目的:探究自体脂肪基质细胞组织(SVF)联合脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复兔胫骨缺损的效果。方法:取新西兰兔背部皮下脂肪制备获取SVF细胞、取股骨干制备获取脱细胞骨基质,将SVF细胞种植于脱细胞骨基质-壳聚糖支架上,于种植当日及种植第7... 目的:探究自体脂肪基质细胞组织(SVF)联合脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复兔胫骨缺损的效果。方法:取新西兰兔背部皮下脂肪制备获取SVF细胞、取股骨干制备获取脱细胞骨基质,将SVF细胞种植于脱细胞骨基质-壳聚糖支架上,于种植当日及种植第7天时,扫描电镜观察支架上SVF细胞生长情况,计算种植当日及种植第3天时的SVF细胞存活率;将20只兔胫骨缺损动物模型均分为研究组和对照组,研究组用SVF-脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复,对照组用脱细胞骨基质-壳聚糖支架修复;于术后6及12周时检测2组胫骨缺损部位的骨密度,并进行X线拍照,于术后12周时检测2组骨缺损部位最大弯曲度负荷、抗弯钢度及破坏扰度的力学特征,检测缺损骨骨膜中血管内皮细胞生长因子(VEGF)和表皮生长因子(EGF)水平。结果:电镜结果显示,SVF细胞种植第7天,支架上黏附大量的SVF细胞,并且SVF细胞在支架表面上生长、增殖;SVF种植当日的SVF细胞存活率为100.0%,种植第3天SVF细胞的存活率为(98.54±1.83)%,2者比较差异无统计学意义(P>0.05);术后第6及12周时,研究组新西兰兔骨缺损处的支架材料和周围骨组织之间的界限模糊,周围骨组织有骨茄形成;2组新西兰兔术后第12周时骨缺损部位骨密度均高于同组术后第6周,研究组术后同时点的骨缺损部位骨密度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后第12周时,研究组新西兰兔最大弯曲度负荷和抗弯钢度大于对照组,破坏扰度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后第12周时,研究组新西兰兔骨缺损部位骨膜中的VEGF和EGF蛋白水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SVF-脱细胞骨基质-壳聚糖支架可促进兔胫骨骨缺损修复,可能机制与SVF促进骨膜内的血管新生有关。 展开更多
关键词 svf细胞 脱细胞骨基质 壳聚糖 兔 胫骨缺损 血管内皮细胞生长因子类 表皮生长因子
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番石榴叶提取物调节白色脂肪组织棕色化作用机制研究 被引量：4
3
作者 代培 许光远 +5 位作者 刘铜华 高明 苏通 周静鑫 乔羽 郭翔宇 《陕西中医》 CAS 2021年第3期275-278,共4页
目的:探究番石榴叶提取物调节脂肪细胞分化的作用机制。方法:6周龄雄性SPF级db/db小鼠24只、同龄C57BL/6J正常组小鼠6只,将符合纳入标准的db/db小鼠根据体重、血糖随机分为模型组和番石榴叶提取物高剂量组、番石榴叶提取物中剂量组、番... 目的:探究番石榴叶提取物调节脂肪细胞分化的作用机制。方法:6周龄雄性SPF级db/db小鼠24只、同龄C57BL/6J正常组小鼠6只,将符合纳入标准的db/db小鼠根据体重、血糖随机分为模型组和番石榴叶提取物高剂量组、番石榴叶提取物中剂量组、番石榴叶提取物低剂量组,并将番石榴叶提取物按高、中、低剂量进行灌胃,于4周后空腹脱臼处死所有小鼠,分别取后腿腓肠肌组织、皮下脂肪组织进行原代成肌细胞、原代脂肪组织SVF细胞的培养、接种和传代。培养48 h后收集细胞并提取蛋白,Western blot法检测各组成肌细胞PGC-1α、FNDC5蛋白和各组脂肪组织SVF细胞Prdm16蛋白的表达。结果:第4周时,与模型组小鼠相比,番石榴叶提取物高剂量组小鼠体重、血糖、低密度脂蛋白降低(均P<0.05)。番石榴叶提取物高剂量组小鼠成肌细胞PGC-1α、FNDC5蛋白表达升高,脂肪组织SVF细胞Prdm16蛋白表达较模型组升高(均P<0.05)。结论:番石榴叶提取物高剂量可通过促进白色脂肪细胞向棕色脂肪细胞分化,提高棕色脂肪水平,从而通过增加机体的能量代谢来调节脂质代谢。 展开更多
关键词 番石榴叶提取物 糖尿病 骨骼肌成肌细胞 脂肪组织svf细胞 PGC-1α蛋白 FNDC5蛋白
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脂肪组织中血管基质部分细胞向内皮细胞诱导分化的实验研究 被引量：1
4
作者 刘波 朱金土 +6 位作者 曹毅 高寿松 余土根 尹烁 刘广鹏 崔磊 曹谊林 《组织工程与重建外科杂志》 2008年第1期6-8,共3页
目的探讨脂肪组织中血管基质部分(Stromal vascular fraction,SVF)细胞向内皮细胞诱导分化的方法。方法脂肪抽吸术获取人脂肪组织,消化法得到的细胞接种在FN包被的培养皿内,细胞培养,传至第2代,分诱导组和非诱导组进行培养。免疫细胞荧... 目的探讨脂肪组织中血管基质部分(Stromal vascular fraction,SVF)细胞向内皮细胞诱导分化的方法。方法脂肪抽吸术获取人脂肪组织,消化法得到的细胞接种在FN包被的培养皿内,细胞培养,传至第2代,分诱导组和非诱导组进行培养。免疫细胞荧光分别检测诱导组和非诱导组的vWF表达;流式细胞仪分别检测诱导组和非诱导组的CD34、CD45、CD133和PECAM-1表达率;荧光显微镜观察细胞摄取DiI-ac-LDL的功能。结果诱导组细胞12d后呈现内皮细胞典型的铺路石样形态;免疫细胞荧光显示诱导组vWF表达阳性;荧光显微镜观察显示诱导组细胞具有摄取DiI-ac-LDL的功能;流式细胞仪检测显示诱导组PECAM-1阳性率为(67.41±13.35)%,明显高于非诱导组的(6.73±2.21)%(p<0.01),非诱导组CD34阳性率(72.39±13.45)%,明显高于诱导组的(16.06±3.86)%阳性率(p<0.01)。结论脂肪组织中血管基质部分细胞能够诱导分化为成熟内皮细胞,有望为血管组织工程提供新的种子细胞来源。 展开更多
关键词 人脂肪组织 血管基质部分细胞 内皮细胞 组织工程
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