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铅暴露对N2a细胞SV2C表达的影响 被引量：1
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作者 祝高春 伍凤云 +5 位作者 叶薇薇 李桂林 林芬 李耀斌 林雪群 范广勤 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期41-43,共3页
目的本文旨在探讨铅暴露对小鼠成神经瘤细胞(N2a)中突触囊泡蛋白C(synaptic vesicle protein C,SV2C)表达的影响,进一步了解铅对神经递质作用有关机制。方法 N2a细胞分为正常组、染铅Ⅰ组(10-4 mol/L醋酸铅),染铅Ⅱ(10-3mol/L醋酸铅)。... 目的本文旨在探讨铅暴露对小鼠成神经瘤细胞(N2a)中突触囊泡蛋白C(synaptic vesicle protein C,SV2C)表达的影响,进一步了解铅对神经递质作用有关机制。方法 N2a细胞分为正常组、染铅Ⅰ组(10-4 mol/L醋酸铅),染铅Ⅱ(10-3mol/L醋酸铅)。分别在24和48 h进行RT-PCR和Western blot,观察不同组N2a细胞SV2C mRNA变化以及检测其蛋白表达水平。结果染铅Ⅰ、Ⅱ组N2a细胞中SV2C mRNA和蛋白表达水平均显著低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05),但两剂量组之间无差异(P>0.05)。各组24和48 h比较,SV2C mRNA表达水平无差异(P>0.05),但染铅Ⅱ组SV2C蛋白表达水平48 h均明显低于24 h,有显著性差异(P<0.05)。结论本研究发现铅下调囊泡运输蛋白SV2C基因,减低了其蛋白水平,从而可能影响神经递质的分泌。 展开更多
关键词 铅中毒 sv2c 神经递质 囊泡运输
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人突触囊泡蛋白2C单克隆抗体的制备及鉴定
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作者 邱语进 孙志杰 +6 位作者 赵鹏 付楚溪 霍江 熊向华 汪建华 万冬梅 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2018年第2期203-207,共5页
目的:制备人突触囊泡蛋白2C(SV2C)单克隆抗体。方法:纯化SV2C/L4蛋白,免疫BALB/c小鼠并制备杂交瘤细胞,筛选针对SV2C/L4的特异性抗体,鉴定亚型及测定效价;选取效价最高的抗体进行大量制备,并经SDSPAGE、Western印迹、间接ELISA和动物实... 目的:制备人突触囊泡蛋白2C(SV2C)单克隆抗体。方法:纯化SV2C/L4蛋白,免疫BALB/c小鼠并制备杂交瘤细胞,筛选针对SV2C/L4的特异性抗体,鉴定亚型及测定效价;选取效价最高的抗体进行大量制备,并经SDSPAGE、Western印迹、间接ELISA和动物实验对抗体纯度、特异性、亲和力及中和活性进行检测。结果:得到纯度大于95%的SV2C/L4蛋白,经2轮筛选共获得13株鼠单抗,抗体重链大多为IgG1、IgG2a型,轻链均为κ型;选取效价最高的30号抗体进行大量制备,纯化后抗体的纯度大于99%,亲和力为6.7 nmol/L,中和活性为100 LD50/mg。结论:筛得1株高亲和力、具有中和活性的特异性SV2C鼠单抗,为肉毒中毒的治疗提供了新的选择,也为阐明Bo NT/A受体间的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 人突触囊泡蛋白2c A型肉毒毒素 单克隆抗体
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