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亚砷酸钠致SV-HUC-1细胞氧化应激作用的研究 被引量:4
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作者 薛鹏 席淑华 +5 位作者 张新玉 王惠惠 徐苑苑 李冰 李昕 孙贵范 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1053-1055,F0003,共4页
目的探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1的氧化应激作用。方法以不同浓度NaAsO(20、0.1、0.2、0.5、1、2、4、6、8、10、20μmol/L)对SV-HUC-1细胞进行染毒,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测细胞活力,利用2’,7’-二... 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1的氧化应激作用。方法以不同浓度NaAsO(20、0.1、0.2、0.5、1、2、4、6、8、10、20μmol/L)对SV-HUC-1细胞进行染毒,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测细胞活力,利用2’,7’-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)水平,分别应用DTNB比色法、硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化法检测细胞内谷胱甘肽(GSH)含量、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与空白对照组比较,全部染毒组细胞活力均下降(P<0.05);染毒24h后,全部染毒组ROS水平均显著升高(P<0.05);2、4μmol/LNaAsO2组细胞GSH含量显著升高(P<0.05);全部染毒组细胞MDA含量均无变化(P>0.05);全部染毒组细胞SOD活力均显著降低(P<0.05)。结论氧化应激可能是NaAsO2致SV-HUC-1细胞毒性作用的机制之一。 展开更多
关键词 砷中毒 亚砷酸钠 sv-huc-1细胞 氧化应激
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人尿道上皮细胞T7噬菌体展示cDNA文库的构建与鉴定 被引量:1
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作者 朱有葱 何军 +3 位作者 游晓星 朱翠明 李冉辉 曾焱华 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期151-154,共4页
[目的]构建人尿道上皮细胞(SV-HUC-1)T7噬菌体展示c DNA文库,为研究人尿道上皮细胞与生殖道感染病原体的相互作用奠定基础。[方法]用Trizol试剂提取SV-HUC-1细胞总RNA,分离纯化出mRNA,经反转录合成得到其双链c DNA,在双链c DNA末端加上... [目的]构建人尿道上皮细胞(SV-HUC-1)T7噬菌体展示c DNA文库,为研究人尿道上皮细胞与生殖道感染病原体的相互作用奠定基础。[方法]用Trizol试剂提取SV-HUC-1细胞总RNA,分离纯化出mRNA,经反转录合成得到其双链c DNA,在双链c DNA末端加上定向的EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端,然后收集并纯化200bp以上的双链c DNA片段,连接于T7噬菌体载体,经体外包装后转入BLT5403宿主菌,T7噬菌体展示c DNA文库构建成功。[结果]将文库扩增后,用噬斑试验检测其库容,结果为1.2×106pfu/cm3。用PCR鉴定随机挑取的噬菌斑,计算其重组率达93.75%,且插入片段都大于200bp。[结论]成功构建了SV-HUC-1细胞T7噬菌体展示c DNA文库,为下一步研究泌尿生殖道感染病原体与人尿道上皮细胞的相互作用奠定了前期实验基础。 展开更多
关键词 sv-huc-1细胞 CDNA T7噬菌体展示文库
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亚砷酸钠对SV-HUC-1细胞NRF2通路影响 被引量:1
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作者 王惠惠 陈锋 +2 位作者 朱佳玉 席淑华 孙贵范 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期95-97,共3页
目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_2)对人膀胱上皮细胞系SV-HUC-1细胞内核因子相关因子2(NRF2)活性的影响。方法时间效应实验以4μmol/L NaAsO_2分别处理SV-HUC-1细胞0(对照)、4、8、16、24 h;剂量效应实验设对照组和NaAsO_2处理组(1、2、4、8、1... 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_2)对人膀胱上皮细胞系SV-HUC-1细胞内核因子相关因子2(NRF2)活性的影响。方法时间效应实验以4μmol/L NaAsO_2分别处理SV-HUC-1细胞0(对照)、4、8、16、24 h;剂量效应实验设对照组和NaAsO_2处理组(1、2、4、8、10μmol/L);Western blot免疫印迹试验检测NRF2通路相关蛋白(NRF2、NQO1和HO1)表达水平。结果 4μmol/L NaAsO_2处理SV-HUC-1细胞4、8、16、24 h后,与对照组(0.68±0.03)比较,细胞内NRF2蛋白表达水平明显升高,16 h处理组NRF2蛋白表达最高(1.17±0.10),差异有统计学意义(P<0.05);随着染砷剂量增加,NRF2、NQO1和HO1蛋白表达水平增强,与对照组NRF2(0.86±0.05)、NQO1(0.68±0.02)、HO1(0.09±0.01)比较,4和8μmol/L NaAsO_2处理组细胞内NRF2、NQO1、HO1蛋白表达水平分别为(1.12±0.01)和(1.16±0.11)、(0.93±0.01)和(1.15±0.19)、(1.28±0.01)和(1.30±0.02),均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 NaAsO_2急性暴露能够活化NRF2通路,引起膀胱上皮细胞适应性抗氧化反应增强。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 sv-huc-1细胞 核因子相关因子2(NRF2) 适应性抗氧化反应
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二氯乙酸对人尿路上皮细胞膀胱癌相关基因甲基化、转录和蛋白表达的影响
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作者 齐慧颖 郭新彪 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期350-357,共8页
目的探讨二氯乙酸对人尿路上皮SV-HUC-1细胞膀胱癌相关癌基因c-myc和抑癌基因APC、SFRP1、SFRP5甲基化、转录水平以及蛋白表达量的影响,为阐明其毒性机制提供科学依据。方法采用CCK-8法检测二氯乙酸对SV-HUC-1细胞的细胞毒性,确定不显... 目的探讨二氯乙酸对人尿路上皮SV-HUC-1细胞膀胱癌相关癌基因c-myc和抑癌基因APC、SFRP1、SFRP5甲基化、转录水平以及蛋白表达量的影响,为阐明其毒性机制提供科学依据。方法采用CCK-8法检测二氯乙酸对SV-HUC-1细胞的细胞毒性,确定不显著影响细胞存活率的浓度及处理时间。以1和2 mmol/L浓度二氯乙酸分别对SV-HUC-1细胞染毒24、48和72 h,采用甲基化特异性PCR(MSP)和real-time PCR对细胞中c-myc、APC、SFRP1和SFRP5基因的甲基化状态和mRNA表达量进行检测。以2 mmol/L浓度二氯乙酸对SV-HUC-1细胞染毒72 h,采用Western blot对c-myc蛋白进行蛋白表达量检测。结果二氯乙酸可使SV-HUC-1细胞中c-myc基因非甲基化程度升高,mRNA和蛋白表达量上升;可使APC、SFRP1和SFRP5基因甲基化程度升高,mRNA表达量下降。结论二氯乙酸可影响SV-HUC-1细胞癌基因c-myc和抑癌基因APC、SFRP1、SFRP5的甲基化和表达,提示其可能有一定的表观遗传毒性。 展开更多
关键词 二氯乙酸 甲基化 C-MYC APC SFRP1 SFRP5 sv-huc-1细胞
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长时间低浓度暴露亚砷酸钠促进人正常膀胱上皮细胞增殖 被引量:1
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作者 王晨 王菲 +2 位作者 刘盛男 曹思奇 席淑华 《中国工业医学杂志》 CAS 2015年第3期195-196,共2页
以不同浓度亚砷酸钠(Na As O2)(0、0.1、0.5、1.0μmol/L)对人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)进行长期染毒,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测细胞活力。未经砷染毒的SV-HUC-1进行长期传代培养,细胞增殖活力没有发生任何改变;0.1、0.5μmol/... 以不同浓度亚砷酸钠(Na As O2)(0、0.1、0.5、1.0μmol/L)对人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)进行长期染毒,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测细胞活力。未经砷染毒的SV-HUC-1进行长期传代培养,细胞增殖活力没有发生任何改变;0.1、0.5μmol/L Na As O2处理20代后,细胞增殖活性显著增高,并呈剂量-反应增高趋势(r=0.632、P<0.01,r=0.939、P<0.01),而1.0μmol/L Na As O2处理的细胞其增殖活力未随染毒时间而发生变化(P>0.05)。提示长时间低浓度暴露Na As O2可以促进SV-HUC-1增殖。 展开更多
关键词 NaAsO2 sv-huc-1细胞 增殖
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Piezo1激活对尿路上皮细胞系Notch配体表达的影响
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作者 李志鹏 邓博浪 +4 位作者 林东旭 危鹏宇 李康 程朗晴 陈忠 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2023年第6期356-359,362,共5页
目的探究膀胱出口梗阻之后,机械敏感性离子通道Piezo1激活对尿路上皮细胞系Notch配体表达的影响。方法分别使用高静水压或Piezo1通道激动剂Yoda1,对SV-HUC-1尿路上皮细胞系进行处理;使用Western blot实验检测Notch配体蛋白的表达水平。... 目的探究膀胱出口梗阻之后,机械敏感性离子通道Piezo1激活对尿路上皮细胞系Notch配体表达的影响。方法分别使用高静水压或Piezo1通道激动剂Yoda1,对SV-HUC-1尿路上皮细胞系进行处理;使用Western blot实验检测Notch配体蛋白的表达水平。结果在使用高静水压或Yoda1处理之后,SV-HUC-1细胞系Notch配体蛋白的表达水平均有不同程度的上升;Piezo1拮抗剂Dooku1能部分抑制高静水压激活Piezo1通道导致的Notch配体蛋白表达增加。结论激活Piezo1通道可导致SV-HUC-1细胞系中Notch配体蛋白表达上升,这可能参与了膀胱出口梗阻后膀胱结构重塑以及膀胱功能受损的进程。 展开更多
关键词 Piezo1 NOTCH通路 sv-huc-1细胞 膀胱出口梗阻 高静水压
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