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绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白与Hyal-2蛋白的结合域研究
被引量：
3
1
作者
张月梅
赵世华
+1 位作者
么宏强
马学恩
《动物医学进展》
北大核心
2016年第4期49-53,共5页
试验证明绵羊的Hyal-2不仅可以与绵羊肺腺瘤病毒的囊膜蛋白Env结合,也可以单独与绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白亚基结合。为了进一步研究绵羊Hyal-2与SU蛋白可能结合的区域,应用在线生物学软件预测了SU蛋白的膜外区(对应编码基因序列238bp^867bp...
试验证明绵羊的Hyal-2不仅可以与绵羊肺腺瘤病毒的囊膜蛋白Env结合,也可以单独与绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白亚基结合。为了进一步研究绵羊Hyal-2与SU蛋白可能结合的区域,应用在线生物学软件预测了SU蛋白的膜外区(对应编码基因序列238bp^867bp)将之前已经构建的缺失型SU蛋白真核表达载体pEGFP-C1-(su1-su5)与pDsRed-monomer-N1-hyal-2共转染293T细胞,运用激光共聚焦方法结合免疫共沉淀方法确定SU蛋白和Hyal-2蛋白可能结合区域。激光共聚焦显微镜观察结果表明,SU1-SU5与Hyal-2均存在细胞内共定位。免疫共沉淀方法检测缺失型蛋白SU1-SU5与绵羊Hyal-2均不存在相互作用。su基因所缺失区域238bp^867bp对于SU蛋白与受体的结合都是必不可少的。
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关键词
绵羊肺腺瘤病毒
su
蛋白
Hyal-2
蛋白
结合区域
下载PDF
职称材料
山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
被引量：
2
2
作者
何亚鹏
张琪
+3 位作者
王景
周曼
付明哲
许信刚
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1563-1567,共5页
为获得纯化的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV)表面蛋白(surface protein,SU protein)和抗SU蛋白的多克隆抗体,根据Gen Bank已登录的ENTV Shaanxi株SU基因序列,设计合成1对特异性引物,PCR扩增SU基因...
为获得纯化的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV)表面蛋白(surface protein,SU protein)和抗SU蛋白的多克隆抗体,根据Gen Bank已登录的ENTV Shaanxi株SU基因序列,设计合成1对特异性引物,PCR扩增SU基因并将其连接于原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组质粒p ET-28a-SU,经鉴定正确后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)株进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。重组菌经IPTG诱导后成功表达出分子质量为43 ku的重组蛋白。将诱导表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化、复性后免疫小鼠制备多克隆抗体。Western-blot分析结果表明,原核表达纯化的SU蛋白能够与制得的小鼠抗SU蛋白多克隆抗体特异性结合。上述结果表明,本试验成功获得了纯化的ENTV SU蛋白和小鼠抗ENTV SU蛋白的多克隆抗体,为进一步研究SU蛋白在ENTV感染过程中的作用和建立诊断方法提供了材料。
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关键词
山羊地方性鼻内肿瘤病毒
su
蛋白
原核表达
纯化
多克隆抗体
原文传递
题名
绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白与Hyal-2蛋白的结合域研究
被引量：
3
1
作者
张月梅
赵世华
么宏强
马学恩
机构
内蒙古农业大学兽医学院
内蒙古农牧业科学院兽医研究所
出处
《动物医学进展》
北大核心
2016年第4期49-53,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31101788)
文摘
试验证明绵羊的Hyal-2不仅可以与绵羊肺腺瘤病毒的囊膜蛋白Env结合,也可以单独与绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白亚基结合。为了进一步研究绵羊Hyal-2与SU蛋白可能结合的区域,应用在线生物学软件预测了SU蛋白的膜外区(对应编码基因序列238bp^867bp)将之前已经构建的缺失型SU蛋白真核表达载体pEGFP-C1-(su1-su5)与pDsRed-monomer-N1-hyal-2共转染293T细胞,运用激光共聚焦方法结合免疫共沉淀方法确定SU蛋白和Hyal-2蛋白可能结合区域。激光共聚焦显微镜观察结果表明,SU1-SU5与Hyal-2均存在细胞内共定位。免疫共沉淀方法检测缺失型蛋白SU1-SU5与绵羊Hyal-2均不存在相互作用。su基因所缺失区域238bp^867bp对于SU蛋白与受体的结合都是必不可少的。
关键词
绵羊肺腺瘤病毒
su
蛋白
Hyal-2
蛋白
结合区域
Keywords
ovine pulmonary adenomatosis virus
su
protein
Hyal-2 protein
binding region
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q789 [农业科学—兽医学]
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职称材料
题名
山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
被引量：
2
2
作者
何亚鹏
张琪
王景
周曼
付明哲
许信刚
机构
西北农林科技大学动物医学院
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1563-1567,共5页
基金
陕西省农业科技创新与攻关项目(2016NY-092)
陕西省重点产业创新链项目(2016KTZDNY02-06)
西北农林科技大学大学生创新创业训练计划项目(201610712019)
文摘
为获得纯化的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV)表面蛋白(surface protein,SU protein)和抗SU蛋白的多克隆抗体,根据Gen Bank已登录的ENTV Shaanxi株SU基因序列,设计合成1对特异性引物,PCR扩增SU基因并将其连接于原核表达载体p ET-28a(+)中,构建重组质粒p ET-28a-SU,经鉴定正确后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)株进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。重组菌经IPTG诱导后成功表达出分子质量为43 ku的重组蛋白。将诱导表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化、复性后免疫小鼠制备多克隆抗体。Western-blot分析结果表明,原核表达纯化的SU蛋白能够与制得的小鼠抗SU蛋白多克隆抗体特异性结合。上述结果表明,本试验成功获得了纯化的ENTV SU蛋白和小鼠抗ENTV SU蛋白的多克隆抗体,为进一步研究SU蛋白在ENTV感染过程中的作用和建立诊断方法提供了材料。
关键词
山羊地方性鼻内肿瘤病毒
su
蛋白
原核表达
纯化
多克隆抗体
Keywords
enzootic nasal tumor virus of goat
su
protein
prokaryotic expression
purification
polyclonal antibody
分类号
S855.1 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白与Hyal-2蛋白的结合域研究
张月梅
赵世华
么宏强
马学恩
《动物医学进展》
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
2
山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
何亚鹏
张琪
王景
周曼
付明哲
许信刚
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
原文传递
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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