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启动子克隆方法研究进展 被引量:20
1
作者 李姗姗 迟彦 +4 位作者 李凌飞 马玺 平文祥 于冲 周东坡 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期9-16,共8页
启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要组成部分。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,此后... 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要组成部分。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。启动子克隆的方法很多,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,此后相继问世的一些基于PCR法的克隆启动子技术,像I-PCR、P-PCR、SSP-PCR、YADE、TAIL-PCR等,为克隆启动子提供了更可靠,更合理的方法。对这几种方法进行了简要综述,比较了不同方法的优缺点,并展望了今后的研究前景。 展开更多
关键词 研究进展 克隆方法 启动子探针型载体 TAIL-pcr ssp-pcr 基因表达调控 基因工程载体 启动子克隆 pcr方法 顺式元件 组成部分 表达载体 目的蛋白 pcr 研究前景 优缺点
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家蚕微粒子病原虫(Nosema bombycis)小亚基核糖体RNA全基因的克隆及其二级结构的构建 被引量:15
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作者 王见杨 黄可威 陆长德 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期290-295,共6页
在用PCR技术扩增、克隆、测序了家蚕微粒子病原虫Nosemabombycis (镇江株 )小亚基核糖体RNA基因核心序列(5′ 端起 12 0 0bp)的基础上 ,用SSP PCR技术克隆了核心序列 3′ 端下游序列 ,从而获得了家蚕微粒子病原虫小亚基核糖体RNA基因的... 在用PCR技术扩增、克隆、测序了家蚕微粒子病原虫Nosemabombycis (镇江株 )小亚基核糖体RNA基因核心序列(5′ 端起 12 0 0bp)的基础上 ,用SSP PCR技术克隆了核心序列 3′ 端下游序列 ,从而获得了家蚕微粒子病原虫小亚基核糖体RNA基因的全序列共 12 33bp。用RnaViz、Forcon、DCSE等生物软件构建了家蚕微粒子病原虫小亚基核糖体RNA的二级结构 ,与其它微孢子虫及真核生物小亚基核糖体RNA的二级结构相比 ,该二级结构缺乏螺旋 10、E10 1、 11、 18、E2 3 n和43。 展开更多
关键词 家蚕微粒子病原虫 ssp-pcr 小亚基核糖体RNA SSUrRNA 全基因 二级结构 螺旋
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在中国人群中首次发现1例Rh血型弱D12型 被引量:16
3
作者 孙国栋 景海珍 +8 位作者 熊文 张彦平 尹志柱 牛小利 邵超鹏 李艳凤 段现民 赵有良 牛海江 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2006年第1期14-17,共4页
目的分析鉴定1名RhD抗原弱阳性个体的血型血清学表型及分子背景。方法采用常规血型血清学技术检测Rh D、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)方法同时检测RHD基因和RHCE基因,并测序分析RHD基因全长编码区序列... 目的分析鉴定1名RhD抗原弱阳性个体的血型血清学表型及分子背景。方法采用常规血型血清学技术检测Rh D、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)方法同时检测RHD基因和RHCE基因,并测序分析RHD基因全长编码区序列;同时通过特异性PCR技术测定RHD合子型或RHD基因数目。结果血型血清学试验证实该标本为D抗原弱阳性表型,与相应Rh抗血清反应为C-c+E+e+;SSP-PCR检测显示RhCcEe基因定型结果与血型血清学完全一致,且有完整的RHD基因;但RHD基因全长编码区序列分析发现该标本的RHD第6外显子存在1处碱基突变:830G>A,编码区序列其它部分与正常RHD序列相同;RHD杂合性试验鉴定显示为RHD+/RHD-杂合型,推测该个体基因型可能为DcE/dce。结论对照国内外文献报道和GenBank记录的基因序列,该个例为在中国人群中首次发现的弱D12型。 展开更多
关键词 RH血型 弱D型 RHD基因 RHCE基因 基因突变 序列分析 ssp-pcr
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应用SSP-PCR/SSO方法进行中国辽宁汉族人HLA-DRB1基因的遗传多态性研究 被引量:8
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作者 刘利民 梁健 +1 位作者 宋芳吉 贾静涛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期20-24,共5页
对159名中国辽宁汉族个体的基因组DNA进行分析,共检出42种等位基因,其中以DRB109012(12.8%)、0701(10.7%)、1501(10.4%)最为常见,其次为DRB11201(79%)、1... 对159名中国辽宁汉族个体的基因组DNA进行分析,共检出42种等位基因,其中以DRB109012(12.8%)、0701(10.7%)、1501(10.4%)最为常见,其次为DRB11201(79%)、1202(75%)、1101(66%)、0301(5.0%)。并发现辽宁汉族人DRB1等位基因频率与白种人间存在明显差异,揭示不同人种有其自己的主要等位基因。 展开更多
关键词 HLA-DRB1 基因分型 ssp-pcr 遗传多态性
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两步法分析RhD阴性及D变异体分子机制(附1例新等位基因的发现) 被引量:12
5
作者 陆松松 宋宁 +3 位作者 李宏 田力 姚志强 陈静娴 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期219-222,共4页
目的建立用于RhD阴性及RhD变异体大标本量的快速准确的筛查方法。方法采用血清学常规试管法初筛后,对初筛阴性标本以序列特异性引物多聚酶链反应(SSP—PCR)作两步法(第一步检测出阴性,D^el1227突变,以及其他变异体;第二步检定出... 目的建立用于RhD阴性及RhD变异体大标本量的快速准确的筛查方法。方法采用血清学常规试管法初筛后,对初筛阴性标本以序列特异性引物多聚酶链反应(SSP—PCR)作两步法(第一步检测出阴性,D^el1227突变,以及其他变异体;第二步检定出其他变异体的具体类型)基因检测分型,并用INNO—TRAIN试剂盒作检测结果的比较,对有突变位点的变异体进行基因测序。结果在235例初筛RhD阴性标本中,检测到1—10外显子全缺失137例,2~9外显子缺失20例,1227G〉A突变63例,845G〉A突变4例,3~6外显子缺失2例,3G〉A突变1例,8~9外显子缺失1例,首次发现1例3—10外显子缺失;INNO—TRAIN试剂检测及基因测序结果与之完全符合。结论所建立的两步法基因检测分型,方法经济实用、简洁可靠,适用于大标本量筛查RhD阴性及D变异体。 展开更多
关键词 RH血型 RHD阴性 D变异体 ssppcr 基因检测 试管法 血清学
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IL-10基因启动子区G-1082A及C-592A多态性与IgA肾病相关性研究 被引量:6
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作者 王牡丹 许菲菲 +2 位作者 章建娜 陈必成 董芍芍 《中国中西医结合肾病杂志》 2008年第9期782-784,共3页
目的:探讨IL-10基因启动子区域G-1082A、C-592A多态性与汉族人群IgA肾病(IgAN)发病间关系。方法:用SSP-PCR方法对180例IgA肾病(IgAN)患者和163例健康对照组IL-10基因启动子区域-1082、-592位点单核苷酸多态性进行分析。结果:-108... 目的:探讨IL-10基因启动子区域G-1082A、C-592A多态性与汉族人群IgA肾病(IgAN)发病间关系。方法:用SSP-PCR方法对180例IgA肾病(IgAN)患者和163例健康对照组IL-10基因启动子区域-1082、-592位点单核苷酸多态性进行分析。结果:-1082位点IgA肾病患者AG/GG基因型频率显著高于正常对照组(为21.0% vs 11.7%,P〈0.05);-1082位点G等位基因频率显著高于正常对照组(为11.0% vs 6.4%,P〈0.01);携带有G等位基因者患IgA肾病危险性是携带有A等位基因者1.8倍,95%CI为1.12-3.20。-592位点IgA肾病患者AA、CA、CC基因型与正常对照组相比,无统计学差异(11.11% vs 16.56%;46.67% vs 51.53%;42.22% vs 31.90%,P〉0.05);-592位点C等位基因频率与正常对照组相比,无统计学差异(32.21% vs 32.50%,P〉0.05)。结论:IL-10基因G-1082A是中国汉族人群IgA肾病患者的易感基因,携带G等位基因者患IgA肾病的危险性是携带A等位基因者的1.8倍。 展开更多
关键词 IGA肾病 白细胞介素-10 基因多态性 ssp-pcr
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广西壮族慢性乙型病毒性肝炎与HLA-DQA1基因相关性研究 被引量:3
7
作者 韦康来 陈智平 +1 位作者 秦雪 李山 《标记免疫分析与临床》 CAS 2009年第4期230-233,共4页
探讨人类白细胞抗原Ⅱ类分子HLA-DQA1基因与广西地区壮族人群乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(ssp-PCR)法检测30名壮族健康人和90例壮族慢性乙型病毒性肝炎患者HLA-DQA1等位点进行基因分析研究。结... 探讨人类白细胞抗原Ⅱ类分子HLA-DQA1基因与广西地区壮族人群乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性。采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(ssp-PCR)法检测30名壮族健康人和90例壮族慢性乙型病毒性肝炎患者HLA-DQA1等位点进行基因分析研究。结果显示,HLA-DQA1*0103等位基因的频率较正常对照组明显升高(P<0.05);而HLA-DQA1*0102等位基因的频率较正常对照组明显降低(P<0.01)。结论:DQA1*0103可能是广西壮族慢性乙型病毒性肝炎患者易感基因,DQA1*0102可能是保护基因。 展开更多
关键词 慢性乙型病毒性肝炎 人类白细胞抗原 ssp-pcr 壮族
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山西省部分地区汉族人群血小板特异性抗原基因多态性研究 被引量:4
8
作者 李超 周永安 +5 位作者 贾彩虹 刘志鹏 刘培贤 李敏 田树雄 侯霞 《中国优生与遗传杂志》 2017年第4期23-25,共3页
目的研究山西省汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,丰富血小板人类遗传学资料,同时为山西地区患者血小板配型提供参考依据。方法本研究使用序列特异性引物-聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西150例汉族成年人进行血小... 目的研究山西省汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,丰富血小板人类遗传学资料,同时为山西地区患者血小板配型提供参考依据。方法本研究使用序列特异性引物-聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西150例汉族成年人进行血小板特异性抗原基因分型检测。结果山西汉族人群血小板特异性抗原HPA 1-17位点中,HPA 1-6,157个位点呈现多态性,基因频率分别是1a 0.997、1b 0.003、2a 0.980、2b 0.020、3a 0.563、3b 0.437、4a0.997、4b 0.003、5a 0.960、5b 0.040、6a 0.970、6b 0.030、15a 0.490、15b 0.510。结论山西省汉族人群血小板特异性抗原有其特有的地域特点,人类血小板特异性抗原基因有明显的地域种族多态性分布规律。 展开更多
关键词 血小板特异性抗原 ssp-pcr 基因多态性
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118例汉族人群IAT检测RhD阴性个体RHD基因多态性分析 被引量:5
9
作者 孙国栋 尹志柱 +3 位作者 张彦平 牛小利 王晓平 王学刚 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2007年第4期292-294,共3页
目的观察汉族人群IAT检测RhD阴性个体RHD基因多态性。方法采用常规血清学技术检测RhD、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法同时检测RHD基因和RHCE基因。结果抗球蛋白试验(IAT)证实的118例RhD阴性个体中,P... 目的观察汉族人群IAT检测RhD阴性个体RHD基因多态性。方法采用常规血清学技术检测RhD、C、c、E、e抗原表型;采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法同时检测RHD基因和RHCE基因。结果抗球蛋白试验(IAT)证实的118例RhD阴性个体中,PCR-SSP方法检测RHD基因结果有28例Del表型个体(23.7%)。在余下的90份真正RhD阴性标本中,有69份标本(76.7%)RHD基因完全缺失;21份标本带有不表达RHD基因。Del表型个体均带有C抗原,带有不表达RHD基因的真正RhD阴性个体大多表现为RhC阳性。结论汉族人群IAT证实的RhD阴性个体呈现RHD基因结构多态性,不表达RHD基因主要以RHD-CE(2-9)-D2为主。 展开更多
关键词 RHD基因 RHCE基因 Del基因 不表达基因 ssp-pcr
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4个HLA等位基因在5个民族中分布的多样性研究 被引量:3
10
作者 肖文彦 褚嘉祐 +2 位作者 史磊 俞建昆 许绍斌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期518-522,共5页
应用ARMSSSP结合的方法调查与AIDS相关的HLA等位基因,即HLAA02,B35,B27,B57等4个基因在5个民族群体(云南汉族、彝族、傣族、新疆维吾尔族、广西壮族)中的分布情况,并进行了相应的遗传学分析。结果显示,HLAA02在壮族和汉族中检出的阳性... 应用ARMSSSP结合的方法调查与AIDS相关的HLA等位基因,即HLAA02,B35,B27,B57等4个基因在5个民族群体(云南汉族、彝族、傣族、新疆维吾尔族、广西壮族)中的分布情况,并进行了相应的遗传学分析。结果显示,HLAA02在壮族和汉族中检出的阳性样本频率非常高,在另外几个民族中的分布频率偏低;B35基因在各民族中分布差异不大;B27在傣族中的分布频率较高,汉族、彝族和壮族中分布的频率差异不大;B57则在各民族中的分布差异不大;保护性的等位基因即A02,B27,B57的基因型频率在5个民族中有极显著的差异。此课题增进了对我国部分AIDS流行地区AIDS相关HLA等位基因型遗传背景的了解,是对HLA与AIDS相关性研究资料的有益补充。 展开更多
关键词 HLA等位基因 民族 遗传多样性 AIDS艾滋病 ARMS ssp
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维、汉两民族脂联素基因+45位点和+349位点SNPs及其与肥胖关系的研究 被引量:3
11
作者 王延蛟 焦谊 +4 位作者 陈红 孙丽丽 张成 艾克拜尔·艾力 关亚群 《新疆医科大学学报》 CAS 2010年第6期609-611,共3页
目的探讨维、汉两民族脂联素基因(adipose most abundant gene transcript1)+45位点及+349位点单核苷酸多态性与肥胖的关系。方法采用优化的特异性引物PCR(SSP-PCR)技术确定脂联素基因+45位点和+349位点的基因型。结果肥胖组与对照组中... 目的探讨维、汉两民族脂联素基因(adipose most abundant gene transcript1)+45位点及+349位点单核苷酸多态性与肥胖的关系。方法采用优化的特异性引物PCR(SSP-PCR)技术确定脂联素基因+45位点和+349位点的基因型。结果肥胖组与对照组中汉族脂联素基因+45位点GT基因型频率均高于维吾尔族,2组维吾尔族TT基因型频率均高于汉族,但差异无统计学意义(P>0.05);维吾尔族人群肥胖组和对照组的脂联素基因+349位点A、G等位基因频率分布差异具统计学意义(P<0.05)。结论维、汉两民族脂联素基因的+45位点可能存在差异,维吾尔族人群脂联素基因+349位点A、G等位基因频率与肥胖有关。 展开更多
关键词 脂联素 单核苷酸多态性 肥胖 序列特异性引物pcr
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中国东部汉族人群原发性胆汁性肝硬化与HLA-DRB1相关性分析 被引量:3
12
作者 陈燕 周晔 +3 位作者 邓安梅 陈波 蒋天舒 仲人前 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1143-1145,共3页
目的:探讨组织相容性抗原Ⅱ类HLA-DRB1等位基因与原发性肝汁性肝硬化(Primarybiliarycirrhosis,PBC)患者人群的相关性。方法:采用序列特异性引物PCR(SSP-PCR)对105例确诊PBC患者,400例健康人群进行HLA-DRB1等位基因及相关亚型基因分析... 目的:探讨组织相容性抗原Ⅱ类HLA-DRB1等位基因与原发性肝汁性肝硬化(Primarybiliarycirrhosis,PBC)患者人群的相关性。方法:采用序列特异性引物PCR(SSP-PCR)对105例确诊PBC患者,400例健康人群进行HLA-DRB1等位基因及相关亚型基因分析。结果:PBC患者组DRB1*07的频率为37·26%,与正常人组的13·8%相比存在显著性差异(P<0·05,比数比为2·7),所有阳性患者经亚型分析均为DRB1*0701;其余DRB1的等位基因频率与正常对照组比较无显著性差异。DRB1*0701阳性与阴性患者群体的疾病进程、临床指征、实验室指征等无显著性差异。结论:中国人群PBC患者可能与DRB1*0701易感性相关,为临床治疗提供了一定线索。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化(PBC) HLA-DRB1 序列特异性引物聚合酶链反应
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山西省吕梁地区汉族人群血小板特异性抗原遗传多态性研究 被引量:1
13
作者 闫学莉 高明伟 +3 位作者 王志强 李建伟 李星星 李超 《智慧健康》 2021年第20期46-48,共3页
目的研究山西省吕梁地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,为该地区患者的血小板配型及输注提供理论依据。方法本研究使用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西省吕梁市400例汉族成年人进行血小板特异性... 目的研究山西省吕梁地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,为该地区患者的血小板配型及输注提供理论依据。方法本研究使用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西省吕梁市400例汉族成年人进行血小板特异性抗原基因分型检测。结果吕梁汉族人群血小板特异性抗原HPA 1-17位点中,HPA 1-6,15呈现多态性,基因频率分别是1a 0.990、1b 0.010、2a 0.965、2b 0.035、3a 0.583、3b 0.417、4a 0.983、4b 0.017、5a 0.963、5b 0.037、6a 0.985、6b 0.015、15a 0.575、15b 0.425。结论山西省吕梁市汉族人群HPA有其特有的地域特点,血小板特异性抗原基因具有明显的多态性分布规律。 展开更多
关键词 血小板特异性抗原 ssp-pcr 基因多态性
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应用环介导等温扩增法进行卡马西平安全用药监测 被引量:2
14
作者 王丽彬 孟玲 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2014年第5期574-577,共4页
目的建立环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测卡马西平引起严重皮肤损害的标志基因HLA-B*1502的技术平台。方法对所收集的病例,分别应用LAMP和金标准SSP-PCR进行标志基因HLA-B*1502的检测,验证LAMP方法... 目的建立环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测卡马西平引起严重皮肤损害的标志基因HLA-B*1502的技术平台。方法对所收集的病例,分别应用LAMP和金标准SSP-PCR进行标志基因HLA-B*1502的检测,验证LAMP方法的准确性。结果 LAMP和SSP-PCR检测38例对照组和2例药疹组患者基因型结果完全一致。结论 LAMP操作简单快捷,且准确可靠,可以在临床上广泛推广,提高卡马西平安全用药水平。 展开更多
关键词 卡马西平 SJS TEN HLA-B*1502 环介导等温扩增法 引物序列特异性pcr
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SSP-PCR方法中两种不同引物检测人类白细胞抗原B27的比较研究 被引量:1
15
作者 周华蓉 陈勇 《福建医药杂志》 CAS 2009年第6期97-98,共2页
目的用序列特异引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法检测人类白细胞抗原B27(HLA-B27)表达情况,探讨使用不同引物检测HLA-B27用于强直性脊柱炎鉴别诊断的敏感性及特异性。方法使用两种不同特异性引物测定强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27,比较其... 目的用序列特异引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法检测人类白细胞抗原B27(HLA-B27)表达情况,探讨使用不同引物检测HLA-B27用于强直性脊柱炎鉴别诊断的敏感性及特异性。方法使用两种不同特异性引物测定强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27,比较其检测的阳性率,结合临床诊断判断准确性。结果HLA-B27新引物应用检测的敏感性、特异性均高于原引物。结论新设计序列特异性引物的应用更适宜于临床检验和研究工作。 展开更多
关键词 HLA-B27 序列特异性聚合酶链反应 强直性脊柱炎
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改良型序列特异性引物PCR用于脂联素基因单核苷酸多态性的检测
16
作者 王延蛟 孙丽丽 +5 位作者 陈红 焦谊 刘晓宇 张成 艾克拜尔.艾力 关亚群 《地方病通报》 2010年第2期4-6,共3页
目的运用序列特异性引物PCR技术(SSP-PCR)研究基因单核苷酸多态性。方法根据GenBank中人脂联素基因(APM1)序列及SNP信息,利用Primer5.0设计引物,通过PCR技术检测APM1的SNPs。结果建立并优化了序列特异性引物PCR(SSP-PCR)技术,并可快速... 目的运用序列特异性引物PCR技术(SSP-PCR)研究基因单核苷酸多态性。方法根据GenBank中人脂联素基因(APM1)序列及SNP信息,利用Primer5.0设计引物,通过PCR技术检测APM1的SNPs。结果建立并优化了序列特异性引物PCR(SSP-PCR)技术,并可快速、直观、准确地进行基因分型。结论改良的SSP-PCR技术是一种特异性更高、操作简便的SNP检测方法。 展开更多
关键词 序列特异性引物pcr 单核苷酸多态性 脂联素
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自制HLA—B27基因检测试剂盒的应用
17
作者 郭华 张海祥 +5 位作者 孙丽君 王海芳 赵院利 梁导艳 刘杨 胡军 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第5期100-101,104,共3页
目的检验自制HLA-B27基因检测试剂盒的可靠性。方法根据序列特异性引物聚合酶链反应(SSP—PCR)原理,通过对HLA数据库上HLA—B位点基因序列的比对,分析选择出B27特异序列合成引物,进而对PCR反应体系和条件进行摸索优化,自制HLA-B2... 目的检验自制HLA-B27基因检测试剂盒的可靠性。方法根据序列特异性引物聚合酶链反应(SSP—PCR)原理,通过对HLA数据库上HLA—B位点基因序列的比对,分析选择出B27特异序列合成引物,进而对PCR反应体系和条件进行摸索优化,自制HLA-B27基因检测试剂盒,同时以北京思而成B27基因检测试剂盒为对照试剂盒,对254例疑似强直性脊椎炎、急性葡萄膜炎等患者EDTA抗凝血的B27基因进行检测,结果和对照试剂盒进行比较,分析其一致性。结果自制试剂盒疑似患者的HLA-B27阳性检出率为35.8%,对照试剂盒的检出率36.6%,经配对x^2检验,x^2=0.125,P=0.727〉0.05,两试剂盒阳性检出率差异无统计学意义。结论自制试剂盒的成本低,具有一定的实验室研究应用价值。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原-B27 序列特异性引物聚合酶链反应 试剂盒 强直性脊柱炎
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夫妇HLA-DR抗原相容性与习惯性流产的关系
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作者 周健红 吴帆 +3 位作者 成佳景 丘瑾 吕嘉 吴逸 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2010年第6期98-101,共4页
目的探讨夫妇HLA-DR抗原相容性和习惯性流产的关系。方法采集2007年8月—2009年8月在我院就诊的30对习惯性流产夫妇外周血,各5 ml,以同时期正常妊娠夫妇作为对照组,抽提样本基因组DNA,确定HLA-DR等位基因位点及其对应抗原,分析疾病组与... 目的探讨夫妇HLA-DR抗原相容性和习惯性流产的关系。方法采集2007年8月—2009年8月在我院就诊的30对习惯性流产夫妇外周血,各5 ml,以同时期正常妊娠夫妇作为对照组,抽提样本基因组DNA,确定HLA-DR等位基因位点及其对应抗原,分析疾病组与对照组中抗原相容性分布是否具有差异。结果在检出的DR抗原中,两组抗原频率差别无统计学意义(P>0.05)。疾病组中,有6对(20%)夫妇HLA-DR抗原零相容,18对(60%)夫妇一个抗原相容,6对(20%)夫妇两个抗原相容。对照组中,21对(70%)夫妇零相容,7对(23%)夫妇一个抗原相容,2对(7%)夫妇两个抗原相容。两组夫妇抗原相容性分布有显著性差异(P<0.01)。一个抗原相容对于零抗原相容的相对危险度(RR)为9,两个抗原相容相对于零抗原相容的相对危险度(RR)为10.5。结论习惯性流产的发生与免疫失衡有关,夫妇双方HLA-DR抗原相容性增加,致母体对异体抗原识别不足,不能产生足够的封闭性抗体,胚胎遭排斥而产生流产。 展开更多
关键词 习惯性流产 HLA-DR抗原 序列特异性引物聚合酶链式反应 相容性 移植排斥
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先天性脊柱骨骺发育不良的产前快速分子诊断 被引量:14
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作者 崔英霞 夏欣一 +6 位作者 杨滨 卢洪涌 史轶超 梁泉 姚兵 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2008年第10期1049-1052,共4页
目的:对先天性脊柱骨骺发育不良提供1种快速分子产前诊断技术。方法:对该患者于孕14周进行羊膜囊穿刺,获取羊水20 ml,提取羊水细胞基因组DNA。选用3个短串连重复(STR)序列位点,进行荧光PCR检测,以排除母源细胞污染。在此基础上,对COL2A... 目的:对先天性脊柱骨骺发育不良提供1种快速分子产前诊断技术。方法:对该患者于孕14周进行羊膜囊穿刺,获取羊水20 ml,提取羊水细胞基因组DNA。选用3个短串连重复(STR)序列位点,进行荧光PCR检测,以排除母源细胞污染。在此基础上,对COL2A1基因的第23外显子进行扩增,并以此为模板,针对COL2A1基因的第23外显子1510G→A的突变进行SSP-PCR。根据是否存在特异性的扩增条带进行判断,对初次扩增的产物测序,以证实巢式SSP-PCR的结果。结果:对D13S 317、D18S51和D21S11位点的STR检测结果排除母源细胞的污染。羊水样本仅在野生型反应管中有扩增产物,表明胎儿是COL2A1基因的第23外显子1510 G的纯合子,未带COL2A1基因的第23外显子1510G→A的突变。测序结果与SSP-PCR结果一致。结论:SSP-PCR技术快速简便、敏感特异,可作为该突变的快速分子诊断。其他已知点突变遗传病的快速分子诊断也可以考虑使用SSP-PCR技术进行。 展开更多
关键词 先天性脊柱骨骺发育不良 快速分子诊断 产前 COL2A1基因 巢式序列特异引物扩增 序列分析
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血清学方法联合SSP荧光PCR染料法在ABO疑难血型鉴定中的应用
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作者 冯婷婷 周志忠 《中文科技期刊数据库(全文版)医药卫生》 2024年第9期0152-0156,共5页
探讨血清学方法结合SSP荧光PCR染料法在临床上进行鉴定ABO疑难血型的可行性与应用价值。方法 本研究收集本院4例正反定型不符血液标本,选用PCR-SSP方法对血型基因的分型进行检测的同时,对血型抗原的检测采取血清学方法。结合上述两种方... 探讨血清学方法结合SSP荧光PCR染料法在临床上进行鉴定ABO疑难血型的可行性与应用价值。方法 本研究收集本院4例正反定型不符血液标本,选用PCR-SSP方法对血型基因的分型进行检测的同时,对血型抗原的检测采取血清学方法。结合上述两种方法,从而来制定输血策略。结果 4例标本中,通过血清学方法鉴定结果,A型1例,B型1例,O型1例,无法定型1例,基因型分别为AO、AO、BO、OO。结论 SSP荧光PCR染料法比血清学方法更可靠,并且可以为这些患者提供更相容的输血血液单位。 展开更多
关键词 ABO 血型 血型血清学 ssp荧光pcr染料法
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