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SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达 被引量:2
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作者 李芳 陈永珍 +2 位作者 陈谦 朱旻 张苏 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期21-24,共4页
分离5~9周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,采用组织块法进行体外培养,免疫细胞化学染色法检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达,以证实利用组织块体外培养所获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。结果表明:组织块体... 分离5~9周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,采用组织块法进行体外培养,免疫细胞化学染色法检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达,以证实利用组织块体外培养所获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。结果表明:组织块体外培养得到的细胞或细胞集落均阳性表达SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT,说明组织块体外培养获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。 展开更多
关键词 人胚胎生殖细胞 ssea-1 ssea-3 OCT-4 HTERT 表达
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人脐带与人脂肪间充质干细胞中应激耐受多系分化细胞的分离鉴定及分化能力比较 被引量:2
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作者 张坤 李芳 +3 位作者 肖东杰 汪运山 黄国宝 刘华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第24期3802-3807,共6页
背景:多系分化应激耐受(multilineage-differentiating stress-enduring,Muse)细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能、可向3个胚层分化的细胞,并且具有非致瘤性和低端粒酶活性,是组织工程、细胞移植及基因治疗领域的理想种子细胞,为临... 背景:多系分化应激耐受(multilineage-differentiating stress-enduring,Muse)细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能、可向3个胚层分化的细胞,并且具有非致瘤性和低端粒酶活性,是组织工程、细胞移植及基因治疗领域的理想种子细胞,为临床上多种疾病的治疗提供了广阔的前景。目的:探讨脐带间充质干细胞与脂肪间充质干细胞分选获得的Muse细胞的生物学特性,为临床研究获得足量的Muse细胞提供实验数据。方法:胰酶长时间消化处理脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞,锥虫蓝染色及流式细胞仪检测比较不同消化时间下两种细胞的存活率与SSEA-3表达阳性率;通过悬浮贴壁法获取Muse细胞,碱性磷酸酯酶染色检测获取Muse细胞的多能干性,Muse细胞在不同诱导分化液作用下进行多系分化,油红O、茜素红、Von Kossa染色检测比较成脂、成骨诱导分化能力,RT-PCR检测多能干细胞标志基因Oct-3/4,Nanog,SSEA-3的表达及Muse细胞诱导分化后双皮质素、神经元特异性烯醇化酶、脂蛋白脂肪酶、骨桥蛋白、甲胎蛋白的表达变化。结果与结论:①随着胰酶消化时间的延长,脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞存活率下降,SSEA-3阳性率上升;②悬浮贴壁获得的Muse细胞碱性磷酸酯酶染色呈阳性反应,间充质干细胞碱性磷酸酯酶染色阴性;③Muse细胞SSEA-3、Nanog、Oct-3/4基因表达水平明显高于间充质干细胞,与脐带来源Muse细胞相比,脂肪来源Muse细胞Nanog、Oct-3/4基因表达增加;油红O、茜素红、Von Kossa染色结果显示Muse细胞成脂、成骨能力高于间充质干细胞;④间充质干细胞及Muse细胞在成脂、成骨诱导培养液、神经元细胞诱导液、肝细胞诱导液作用下分化效率不一样,但均高表达脂蛋白脂肪酶、骨桥蛋白、神经元特异性烯醇化酶、双皮质素及甲胎蛋白,Muse细胞相关基因表达高于间充质干细胞;⑤实验结果证 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 脂肪 多系分化应激耐受细胞 ssea-3
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Are globoseries glycosphingolipids SSEA-3 and-4 markers for stem cells derived from human umbilical cord blood?
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作者 Heli Suila Virve Pitka¨nen +9 位作者 Tia Hirvonen Annamari Heiskanen Heidi Anderson Anita Laitinen Suvi Natunen Halina Miller-Podraza Tero Satomaa Jari Natunen Saara Laitinen Leena Valmu 《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第2期99-107,共9页
Umbilical cord blood(UCB)is an efficient and valuable source of hematopoietic stem cells(HSCs)for transplantation.In addition to HSCs it harbours low amounts of mesenchymal stem cells(MSCs).No single marker to identif... Umbilical cord blood(UCB)is an efficient and valuable source of hematopoietic stem cells(HSCs)for transplantation.In addition to HSCs it harbours low amounts of mesenchymal stem cells(MSCs).No single marker to identify cord blood-derived stem cells,or to indicate their multipotent phenotype,has been characterized so far.SSEA-3 and-4 are cell surface globoseries glycosphingolipid epitopes that are commonly used as markers for human embryonic stem cells,where SSEA-3 rapidly disappears when the cells start to differentiate.Lately SSEA-3 and-4 have also been observed in MSCs.As there is an ongoing discussion and variation of stem-cell markers between laboratories,we have now comprehensively characterized the expression of these epitopes in both the multipotent stem-cell types derived from UCB.We have performed complementary analysis using gene expression analysis,mass spectrometry and immunochemical methods,including both flow cytometry and immunofluoresence microscopy.SSEA-4,but not SSEA-3,was expressed on MSCs but absent from HSCs.Our findings indicate that SSEA-3 and/or-4 may not be optimal markers for multipotency in the case of stem cells derived from cord blood,as their expression may be altered by cell-culture conditions. 展开更多
关键词 umbilical cord blood hematopoietic stem cells mesenchymal stem cells ssea-3 ssea-4
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