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Fc段受体结合蛋白(SPA-SPG)基因克隆表达及其在IgG纯化中的应用 被引量:6
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作者 孟照辉 林兵 +1 位作者 谢月辉 张克勤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期146-149,共4页
利用生物信息学 ,遴选编码SPA及SPG蛋白的基因 ,进行密码子优化 ,将目的基因分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链 ,采用一步升温后T4DNA连接酶连接的方法 ,合成了编码SPA及SPG蛋白的融合基因 .将其克隆到pSK质粒进行扩增 ,经测序、修正... 利用生物信息学 ,遴选编码SPA及SPG蛋白的基因 ,进行密码子优化 ,将目的基因分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链 ,采用一步升温后T4DNA连接酶连接的方法 ,合成了编码SPA及SPG蛋白的融合基因 .将其克隆到pSK质粒进行扩增 ,经测序、修正后再克隆到表达载体 ,高效表达了带His6的融合蛋白———蛋白AG .将蛋白AG共价结合到表面带羧基的磁粒上 ,形成蛋白AG磁粒复合物 ,用此复合物可在 1h内从大鼠、小鼠、人、猕猴、马、羊及猪等常用实验动物血清中纯化IgG . 展开更多
关键词 Fc段受体结合蛋白 spa-spg 融合基因合成 蛋白AG磁粒 IGG 纯化 受体结合蛋白 基因克隆 基因表达
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SPA/SPG融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达
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作者 孙书华 《动物检疫》 1994年第2期3-5,共3页
葡萄球菌A蛋白(SPA)和链球菌G蛋白(SPG)的IgG结合区编码基因融合后,克隆到大肠杆菌表达载体PGEX,SPA/SPG融合蛋白(SPAG)得到高效表达。可溶性SPAG~GST产物可被谷胱甘肽亲和柱一次性纯化。用琼扩和ELISA试验测定了表达产物与... 葡萄球菌A蛋白(SPA)和链球菌G蛋白(SPG)的IgG结合区编码基因融合后,克隆到大肠杆菌表达载体PGEX,SPA/SPG融合蛋白(SPAG)得到高效表达。可溶性SPAG~GST产物可被谷胱甘肽亲和柱一次性纯化。用琼扩和ELISA试验测定了表达产物与不同种属动物血清反应的性能。SPAG—GST与所有SPA、SPG各自反应的动物IgG结合,对小鼠IgG的反应优于SPA或SPG。在所测试的23种动物血清中,融合蛋白与大部分哺乳动物Ig反应。 展开更多
关键词 spa/spg 融合蛋白 大肠杆菌 免疫
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