水稻条叶枯病毒(RSV)的SP蛋白在介体灰飞虱内的亚细胞定位 被引量：10

1

作者 吴爱忠 赵艳 +3 位作者 曲志才 沈大棱 潘重光 苏德明 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第14期1183-1186,共4页

介体灰飞虱的亚显微结构及水稻条叶枯病毒（ＲＳＶ）病害特异性蛋白ＳＰ的免疫定位显示：带毒虫卵巢内的成熟卵含大量内共生菌，证实了它的经卵传递特征．同时在卵的外周、卵内以及中肠的肠腔和肠上皮细胞内均有胶体金颗粒分布．说明Ｒ... 介体灰飞虱的亚显微结构及水稻条叶枯病毒（ＲＳＶ）病害特异性蛋白ＳＰ的免疫定位显示：带毒虫卵巢内的成熟卵含大量内共生菌，证实了它的经卵传递特征．同时在卵的外周、卵内以及中肠的肠腔和肠上皮细胞内均有胶体金颗粒分布．说明ＲＳＶ在介体内的循回途径和经卵传递的特征．对照组的雌虫则仅含内共生菌，而无胶体金颗粒分布；雄虫则不论带毒与否，其精子均不含内共生菌，也无胶体金颗粒标记．这为灰飞虱经卵传毒给后代的生物测试提供了直观的实验证据，也为传毒机理研究和探讨ＲＳＶ蛋白的功能奠定了必要的科学基础． 展开更多

关键词 灰飞虱 水稻条叶枯病毒 中肠 卵巢 sp蛋白 传毒机理 亚细胞定位

原文传递

胎儿肺Ⅱ型肺泡细胞发育中相关活性物质的表达及其意义 被引量：5

2

作者 熊轶 黄中新 +1 位作者 覃莉 夏潮涌 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期190-195,共6页

目的　探讨诸细胞因子对肺泡Ⅱ型细胞发育、分化和成熟的调控作用。　方法　12～35周胎儿肺组 织共13例,常规石蜡包埋、切片,用免疫组织化学技术检测FGFR、Ras p21蛋白、BMP 4、SP B和TTF 1的表达特征。 结果　FGFR率先在发育早期... 目的　探讨诸细胞因子对肺泡Ⅱ型细胞发育、分化和成熟的调控作用。　方法　12～35周胎儿肺组 织共13例,常规石蜡包埋、切片,用免疫组织化学技术检测FGFR、Ras p21蛋白、BMP 4、SP B和TTF 1的表达特征。 结果　FGFR率先在发育早期近端支气管上皮表达。Ras蛋白于16周在近端和远端的支气管上皮有较弱表达,18 周时与FGFR一样达到表达的高峰。随着FGFR表达的增强,BMP 4开始表达。发育后期,这三者均不表达。TTF 1 因子自16周起定位于上皮细胞核内,远端支气管的反应总是较近端者强。SP B蛋白在18周胎儿肺Ⅱ型肺泡细胞 内出现,伴随着TTF 1的表达,其反应由呼吸道近端逐渐往远端迁移。发育末期至成肺中,TTF 1和SP B阳性反应 均在肺泡Ⅱ型细胞中稳定表达。　结论　FGF 10、Ras蛋白和BMP 4对Ⅱ型肺泡细胞的作用,是通过细胞外间质的 途径促使Ⅱ型肺泡细胞正常增殖分化和达到形态结构的成熟;而TTF 1因子和SP B的表达,则为Ⅱ型肺泡细胞在 胎肺发育晚期已逐渐达到功能成熟的标志,与胎儿一出生即具有自主呼吸的功能相适应。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子-10 RAS基因 骨形态发生蛋白-4 sp蛋白 甲状腺转录因子-1 免疫组织化学 胎儿肺

下载PDF 职称材料

四神丸治疗腹泻的实验研究 被引量：2

3

作者 郑立运 《中国处方药》 2014年第6期44-45,共2页

目的通过观察腹泻小鼠胃肠运动和腹泻大鼠结肠中胃肠肽蛋白表达的变化,探讨四神丸对腹泻的影响。方法采用大黄泻下法复制模型,以稀便级、腹泻率、稀便率、腹泻指数、碳末推进法观测小肠碳末推进率代表胃肠运动情况,将造模成功实验大鼠... 目的通过观察腹泻小鼠胃肠运动和腹泻大鼠结肠中胃肠肽蛋白表达的变化,探讨四神丸对腹泻的影响。方法采用大黄泻下法复制模型,以稀便级、腹泻率、稀便率、腹泻指数、碳末推进法观测小肠碳末推进率代表胃肠运动情况,将造模成功实验大鼠分为空白对照组、模型对照组、西药对照组、四神丸组,给药后对大鼠结肠通过免疫组织化学方法检测5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)蛋白表达的情况,观察四神丸对其干预作用。结果经大黄泻下法复制模型后,生大黄使小鼠的胃肠运动加快,大鼠结肠中5-HT和SP蛋白表达明显升高。四神丸可以减慢腹泻小鼠胃肠运动,降低腹泻大鼠结肠中5-HT和SP蛋白表达。结论四神丸有止泻作用,可明显抑制胃肠运动,可能是通过干预5-HT、SP蛋白表达而起作用。 展开更多

关键词 四神丸 腹泻 5-羟色胺 sp蛋白

下载PDF 职称材料

吕氏泰勒虫TlSP重组亚单位疫苗免疫保护效果的评估

4

作者 韩元 郭鹏飞 +9 位作者 李禤 刘军龙 刘爱红 王锦明 关贵全 刘志杰 刘光远 李有全 罗建勋 殷宏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期939-945,共7页

为了评价吕氏泰勒虫表面蛋白Tl SP（Theileria luwenshuni surface protein）的免疫保护效果,分别用150 g/只和300 g/只乳化后的Tl SP蛋白免疫试验Ⅰ组和Ⅱ组绵羊,对照组为等量PBS,每组5只。二免后第14天,每只绵羊用50只青海血蜱饥饿成... 为了评价吕氏泰勒虫表面蛋白Tl SP（Theileria luwenshuni surface protein）的免疫保护效果,分别用150 g/只和300 g/只乳化后的Tl SP蛋白免疫试验Ⅰ组和Ⅱ组绵羊,对照组为等量PBS,每组5只。二免后第14天,每只绵羊用50只青海血蜱饥饿成蜱进行攻蜱试验。结果显示,对照组绵羊攻蜱后出现跛行、体温2次升高和淋巴结肿大等症状,发病率为100%,死亡率为40%,染虫率在2.23%~3.50%之间;试验Ⅰ组和Ⅱ组绵羊免疫后产生的最高抗体效价分别为1∶102 400和1∶25 600,发病率均为60%,表现轻度临床症状而未发生死亡,染虫率在1.23%~1.89%之间。上述结果证实,制备的Tl SP重组亚单位疫苗在抗泰勒虫感染上具有良好的免疫保护效果,为进一步开展羊泰勒虫病亚单位疫苗的研制奠定了实验基础。 展开更多

关键词 吕氏泰勒虫 TL sp蛋白 染虫率 抗体水平 免疫保护效果

原文传递

乌司他丁联合常规疗法对慢阻肺并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清SP蛋白、肺部活化调节趋化因子的影响 被引量：11

5

作者 罗明 《临床肺科杂志》 2017年第12期2194-2198,共5页

目的对乌司他丁联合常规疗法对慢阻肺并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清SP蛋白、肺部活化调节趋化因子水平的影响进行分析。方法随机选取2014年3月至2016年3月于我院诊断并进行治疗的慢阻肺并发Ⅱ型呼吸衰竭患者共90例,采用数字随机表法分为研... 目的对乌司他丁联合常规疗法对慢阻肺并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清SP蛋白、肺部活化调节趋化因子水平的影响进行分析。方法随机选取2014年3月至2016年3月于我院诊断并进行治疗的慢阻肺并发Ⅱ型呼吸衰竭患者共90例,采用数字随机表法分为研究组和对照组,对照组患者进行常规治疗,研究组患者在治疗组基础上联合乌司他丁进行治疗,对两组患者治疗前后的血气指数、肺表面活性物相关蛋白D(SP-D)和肺部和活化控制趋因子(PARC/CCL18)水平进行检测,并统计治疗后的总有效率。结果研究组患者的治疗总有效率明显高于对照组(χ~2=9.834,P=0.000);两组患者治疗前各项血气指数无明显差异,治疗后各项指数均有显著改善,其中治疗后研究组患者的PaO_2、SaO_2、pH水平明显高于对照组(t=2.533,P=0.012;t=3.030,P=0.003;t=2.577,P=0.012),PaCO_2的值明显低于对照组(t=4.734,P=0.004);治疗后的肺功能指标也得到明显改善,并且治疗后研究组PEF和FEV_1的值明显高于对照组(t=4.830,P=0.000;t=3.630,P=0.002);并且治疗后两组患者PARC/CCL18和SP-D水平均显著降低,其中研究组两项指标的值均明显低于对照组(t=3.823,P=0.008;t=4.693,P=0.000)。结论乌司他丁联合常规疗法可更有效的提高慢阻肺并发Ⅱ型呼吸衰竭患者的血气指标、肺功能和PARC/CCL18、SP-D指标并且具有更好的临床效果,值得在临床上推广。 展开更多

关键词 乌司他丁 呼吸衰竭 血清sp蛋白 肺部活化调节趋化因子

下载PDF 职称材料

不同浓度胺碘酮对肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D表达的影响 被引量：5

6

作者 王瑶函 吴蕊 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期71-74,75,共5页

目的观察不同浓度胺碘酮对小鼠肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D(SP-D)表达的影响。方法取生长状态良好的3~5代小鼠肺成纤维细胞,用10%小牛血清培养制成细胞悬液加入96孔板中培养。分别给予不同浓度(0.5、1.0、2.0和4.0μmol/L)胺碘酮处... 目的观察不同浓度胺碘酮对小鼠肺成纤维细胞增殖及表面活性蛋白D(SP-D)表达的影响。方法取生长状态良好的3~5代小鼠肺成纤维细胞,用10%小牛血清培养制成细胞悬液加入96孔板中培养。分别给予不同浓度(0.5、1.0、2.0和4.0μmol/L)胺碘酮处理,于给药12、24和48 h后采用MTT法检测细胞增殖;蛋白免疫印迹法检测SP-D蛋白的表达。结果 0.5~4.0μmol/L胺碘酮作用于肺成纤维细胞12、24和48 h后对细胞增殖有明显促进作用,且增殖率与浓度和时间成正相关(r=0.834,r=0.881,P<0.05)。与对照组相比,胺碘酮能明显增加细胞SP-D蛋白的表达(P<0.05)。胺碘酮A^D组细胞SP-D、a-SMA、I和III型胶原蛋白表达高于对照组细胞(P<0.05),胺碘酮A^D组细胞SP-D、a-SMA、I和III型胶原蛋白表达水平随胺碘酮浓度增加升高(F=10.215,P<0.01),细胞SP-D、a-SMA、I和III型胶原蛋白表达量与胺碘酮的浓度呈正相关(r=0.786,P<0.01)。结论胺碘酮可刺激小鼠肺成纤维细胞增殖,并且增加肺成纤维细胞SP-D蛋白的表达。 展开更多

关键词 胺碘酮 小鼠肺成纤维细胞 细胞增殖 sp-D蛋白

原文传递

术前分流术治疗脑肿瘤合并脑积水临床分析 被引量：4

7

作者 刘永生 申明峰 《中国实用神经疾病杂志》 2019年第2期176-182,共7页

目的分析术前分流术治疗脑肿瘤合并脑积水的临床效果。方法将80例脑部肿瘤合并脑积水患者随机分为对照组(38例)和实验组(42例),对照组应用反复腰椎穿刺放液,实验组根据病情行脑室-腹腔分流术。观察2组颅内压、脑脊液SP100蛋白浓度、疗... 目的分析术前分流术治疗脑肿瘤合并脑积水的临床效果。方法将80例脑部肿瘤合并脑积水患者随机分为对照组(38例)和实验组(42例),对照组应用反复腰椎穿刺放液,实验组根据病情行脑室-腹腔分流术。观察2组颅内压、脑脊液SP100蛋白浓度、疗效、住院时间及并发症发生情况。结果实验组总有效率显著高于对照组,并发症发生率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);分流术后7 d、14 d颅内压、脑脊液SP100蛋白浓度较术前明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);2组住院时间差异无统计学意义(P>0.05)。结论术前分流术可提高脑肿瘤合并脑积水患者耐受性,缓解颅内高压,有效改善临床症状,降低围手术期并发症发生率。 展开更多

关键词 脑肿瘤 脑积水 脑室-腹腔分流术 颅内高压 sp100蛋白 围手术期

下载PDF 职称材料

结直肠癌中SP1的瘤内异质性表达及其临床意义

8

作者 魏闫若雪 李梓绮 +3 位作者 刘春铖 刘晓晗 赵然 刘玉昆 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2024年第5期89-94,共6页

目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中特异蛋白1(specificity protein 1,SP1)表达的瘤内异质性(intratumor heterogeneity,ITH)及其临床意义。方法收集CRC临床标本,采用免疫组化EnVision法检测SP1蛋白的表达水平及模式,明确SP1蛋... 目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中特异蛋白1(specificity protein 1,SP1)表达的瘤内异质性(intratumor heterogeneity,ITH)及其临床意义。方法收集CRC临床标本,采用免疫组化EnVision法检测SP1蛋白的表达水平及模式,明确SP1蛋白表达的ITH特征,定义SP1蛋白的ITH水平,并分析SP1蛋白ITH水平与CRC患者临床病理特征及预后的关系。结果在CRC中SP1蛋白呈典型的ITH表达特征,其ITH水平与淋巴结转移(P<0.001)和TNM分期(P<0.001)相关。生存分析表明,SP1蛋白高ITH患者的总生存期(overall survival,OS)显著低于SP1蛋白低ITH患者(61.25%vs 81.82%),差异有统计学意义(P=0.004)。单因素和多因素Cox回归分析显示,SP1蛋白高ITH是CRC患者不良OS(HR=2.680,P=0.017)的独立预测因子。结论CRC中SP1蛋白的表达具有显著的ITH特征,并首次定义了SP1 ITH水平的量化标准,证实SP1蛋白高ITH与CRC进展及不良预后显著相关。 展开更多

关键词 结直肠癌 sp1蛋白 瘤内异质性 免疫组织化学 预后

原文传递

人转录因子sp1在大肠杆菌中的表达与体外纯化 被引量：3

9

作者 王琪炜 陈宝俊 +1 位作者 强倩 李淑锋 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2014年第1期1-4,共4页

目的:在大肠杆菌中表达人源转录因子sp1蛋白,并进行体外纯化。方法:首先将人源sp1真核表达质粒pCMV-sp1中的sp1 cDNA用限制性内切酶切开,连入原核表达质粒pET28b,构建原核表达重组质粒pET28b-sp1-699c;然后将重组质粒转化入大肠杆菌BL21... 目的:在大肠杆菌中表达人源转录因子sp1蛋白,并进行体外纯化。方法:首先将人源sp1真核表达质粒pCMV-sp1中的sp1 cDNA用限制性内切酶切开,连入原核表达质粒pET28b,构建原核表达重组质粒pET28b-sp1-699c;然后将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达带His-Tag的融合蛋白His-sp1(88-786aa),通过包涵体的变复性和Ni-IDA亲和层析纯化后,SDS-PAGE鉴定纯化后的蛋白。结果:融合蛋白His-sp1在大肠杆菌内得到高效表达,纯化后可得到较高纯度的蛋白。结论:本研究获得了较高纯度的融合蛋白His-sp1,为进一步研究sp1蛋白对靶基因的转录调控奠定了基础。 展开更多

关键词 sp1蛋白 转录因子 大肠杆菌 蛋白表达与纯化

下载PDF 职称材料

核体蛋白Sp110及其生物学功能 被引量：4

10

作者 周丹 李革 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期271-274,共4页

Sp110是最近发现的可能与结核易感性相关的新基因,是核体蛋白Sp100/Sp140家族中的一员,包含了Sp100区,SAND区,核定位序列(NLS)以及细胞核激素受体结合域(NRB)等多种功能结构区。在基因转录,激素受体信号传递,细胞凋亡,病毒复制等方面都... Sp110是最近发现的可能与结核易感性相关的新基因,是核体蛋白Sp100/Sp140家族中的一员,包含了Sp100区,SAND区,核定位序列(NLS)以及细胞核激素受体结合域(NRB)等多种功能结构区。在基因转录,激素受体信号传递,细胞凋亡,病毒复制等方面都有重要作用。 展开更多

关键词 sp110核体蛋白 病毒感染 结核

原文传递

益气活血化痰法对急性呼吸衰竭模型大鼠肺功能、细胞生长因子及肺SP-B蛋白表达的影响 被引量：3

11

作者 马艳芳 刘锋 王苗 《中国中医急症》 2019年第12期2115-2117,2133,共4页

目的观察益气活血化痰法对急性呼吸衰竭模型大鼠肺功能、细胞生长因子及肺表面活性蛋白B(SP-B)表达的影响。方法将60只雄性SD大鼠分为对照组、模型组、中药组及阳性组,每组15只,除对照组外各组均采用毒素脂多糖建立急性呼吸衰竭大鼠模... 目的观察益气活血化痰法对急性呼吸衰竭模型大鼠肺功能、细胞生长因子及肺表面活性蛋白B(SP-B)表达的影响。方法将60只雄性SD大鼠分为对照组、模型组、中药组及阳性组,每组15只,除对照组外各组均采用毒素脂多糖建立急性呼吸衰竭大鼠模型。对照组和模型组给予3 mL/kg的生理盐水灌胃,中药组给予3 mL/kg的益气活血化痰方灌胃,阳性组给予5 mg/kg地塞米松灌胃。干预12 d后评价肺功能,比较肺组织病理学改变,血清血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平,肺组织表面活性蛋白B(SP-B)表达。结果与对照组比较,模型组FEV0.3/FVC值显著降低,呼气阻力显著升高(P <0.05)。与模型组比较,中药组和阳性组FEV0.3/FVC值显著高于模型组,呼气阻力显著低于模型组(P <0.05)。对照组肺组织未见明显异常;模型组结构被破坏,明显损伤,间质水肿,大量炎性细胞浸润,组织间充满渗出液;中药组和阳性组结构相对完整,水肿较轻,渗出较少,少量炎性细胞浸润。与对照组比较,模型组VEGF和bFGF水平显著升高;与模型组比较,中药组和阳性组VEGF和bFGF水平显著降低(P <0.05)。与对照组比较,模型组肺湿重/干重(W/D)比值显著升高,SP-B表达水平显著降低;与模型组比较,中药组和阳性组W/D比值显著降低,SP-B表达水平显著升高(P <0.05)。结论益气活血化痰方可改善急性呼吸衰竭模型大鼠肺功能,可能与降低细胞生长因子及肺SP-B蛋白表达有关。 展开更多

关键词 急性呼吸衰竭 益气活血化痰法 肺功能 细胞生长因子 肺sp-B蛋白 大鼠

下载PDF 职称材料

卵巢癌组织中Ezrin、SP1蛋白的表达及与肿瘤发生发展的关系 被引量：1

12

作者 刘晓英 甘露 +2 位作者 张静 姚蕾 邓卓 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第10期1659-1662,共4页

目的探讨卵巢癌组织中的埃兹蛋白(Ezrin)、转录因子SP1蛋白的表达及其临床意义。方法选取2016年6月至2017年10月我院收集的术后卵巢癌组织标本90例作为病例组、卵巢良性肿瘤组织90例作为对照组,采用免疫组化染色检测两组标本中的Ezrin... 目的探讨卵巢癌组织中的埃兹蛋白(Ezrin)、转录因子SP1蛋白的表达及其临床意义。方法选取2016年6月至2017年10月我院收集的术后卵巢癌组织标本90例作为病例组、卵巢良性肿瘤组织90例作为对照组,采用免疫组化染色检测两组标本中的Ezrin蛋白、SP1蛋白表达,并分析国际妇产联盟不同分期(FIGO)、组织学分级、淋巴结转移、病理学类型卵巢癌组织中的Ezrin蛋白、SP1蛋白表达差异。结果病例组的Ezrin蛋白、SP1蛋白阳性表达率分别为74.44%、62.22%,均显著高于对照组的18.89%、21.11%,差异具有统计学意义(P<0.05);在不同FIGO分期、是否发生淋巴结转移的患者中的Ezrin蛋白阳性表达率组间比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);在不同FIGO分期、是否发生淋巴结转移、不同病理学分级的患者中的SP1蛋白阳性表达率组间比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢癌组织中Ezrin蛋白、SP1蛋白阳性表达率显著升高并且与肿瘤的进展密切相关。 展开更多

关键词 卵巢癌 埃兹蛋白 转录因子sp1蛋白

下载PDF 职称材料

人SP-B蛋白转基因小鼠及细菌性肺炎模型的构建 被引量：1

13

作者 葛林 刘新宇 WANG Guirong 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期65-71,共7页

目的:构建携带人SP-B蛋白+1580 SNP不同等位基因的转基因小鼠并进行细菌性肺炎模型的造模。方法:利用受精卵原核注射技术将hSP-B基因整合至小鼠染色体上获得F0代小鼠,将其与mSP-B基因敲除鼠进行交配,逐步去除转基因小鼠体内m SP-B基因... 目的:构建携带人SP-B蛋白+1580 SNP不同等位基因的转基因小鼠并进行细菌性肺炎模型的造模。方法:利用受精卵原核注射技术将hSP-B基因整合至小鼠染色体上获得F0代小鼠,将其与mSP-B基因敲除鼠进行交配,逐步去除转基因小鼠体内m SP-B基因。利用PCR技术鉴定小鼠基因型,通过测序确定+1580位点的等位基因。将铜绿假单胞菌经支气管灌注接种至小鼠肺内进行细菌性肺炎造模,对照组注射等量灭菌生理盐水。结果:F2代小鼠只表达人SP-B蛋白而不表达鼠SP-B蛋白,蛋白表达量与人肺内含量相近,即为构建成功的转基因小鼠。3个小鼠家系+1580位点等位基因为T,1个家系为C。细菌接种(1×10~6CFU/mouse)后24小时,小鼠肺泡内炎症渗出明显,大量中性粒细胞浸润,SP-B蛋白含量明显降低,但不同等位基因间在此条件下无明显差异。结果:成功构建只表达人SP-B蛋白的转基因小鼠模型,细菌性肺炎模型造模成功,为今后进一步研究人SP-B蛋白的生理功能及+1580基因多态性与肺疾病的关系提供了有力的工具。 展开更多

关键词 sp-B蛋白 SNP 转基因小鼠 细菌性肺炎

原文传递

旋毛虫Ts-Sp-7蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备 被引量：1

14

作者 张胜兰 刘琰 +6 位作者 李岩松 刘晓雷 白雪 唐斌 王学林 刘明远 周玉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1368-1373,共6页

为给旋毛虫病的诊断及疫苗研制提供备选抗原,对本实验室获得的旋毛虫Ts-Sp-7基因(GenBank登录号EU263332.1)进行PCR扩增,构建原核表达载体,进行表达纯化,Western-blot分析。制备多克隆抗体进行间接免疫荧光分析。通过PCR扩增出1372 bp的... 为给旋毛虫病的诊断及疫苗研制提供备选抗原,对本实验室获得的旋毛虫Ts-Sp-7基因(GenBank登录号EU263332.1)进行PCR扩增,构建原核表达载体,进行表达纯化,Western-blot分析。制备多克隆抗体进行间接免疫荧光分析。通过PCR扩增出1372 bp的Ts-Sp-7基因。SDS-PAGE结果显示,该蛋白大小为46 ku左右,与理论分子质量一致。Western-blot结果显示,该目的蛋白与10000条/头感染剂量不同感染时间的猪阳性血清均呈现特异性条带。制备的多克隆抗体效价为1∶350000。Ts-Sp-7多克隆抗体的间接免疫荧光鉴定结果显示,Ts-Sp-7蛋白在旋毛虫肌幼虫期存在于虫体表面。 展开更多

关键词 旋毛虫 Ts-sp-7蛋白 原核表达 间接免疫荧光

原文传递

Sp1蛋白锌指结构域及其模拟物的合成及与寡聚核苷酸结合能力的研究 被引量：1

15

作者 王锐 胡晓愚 +6 位作者 马亚平 杨顶建 董守良 倪京满 杨晓武 李向群 潘鑫复 《中国科学（C辑）》 CSCD 1997年第6期487-491,共5页

用固相多肽合成方法首次合成转录因子Sp1的第2个锌指Sp1-ZF2及其突变体Sp1-ZF2/HT(E^(20)→H,R^(23)→T),模拟物ZF20和ZF15.CD谱及Co(Ⅱ)UV-可见光谱研究表明:当缺少足够的疏水氨基酸以及Cys与His距离改变时,锌指结构的形成将受到影响.... 用固相多肽合成方法首次合成转录因子Sp1的第2个锌指Sp1-ZF2及其突变体Sp1-ZF2/HT(E^(20)→H,R^(23)→T),模拟物ZF20和ZF15.CD谱及Co(Ⅱ)UV-可见光谱研究表明:当缺少足够的疏水氨基酸以及Cys与His距离改变时,锌指结构的形成将受到影响.凝胶阻滞电泳研究表明:突变的两位置显著影响特异识别.单个锌指肽可以与特异性寡聚核苷酸序列结合. 展开更多

关键词 sp1蛋白 锌指结构域 寡聚核苷酸

原文传递

肺炎链球菌SP0306蛋白的表达纯化及结晶研究

16

作者 黄健 黄美容 +2 位作者 朱杰华 骆诗露 闵迅 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期21-25,共5页

SP0306蛋白是肺炎链球菌TIGR4菌株中的一种假想的转录因子,但其蛋白三维结构及生物学功能尚未明了,生物信息学分析提示其可能调控碳水化合物代谢相关基因的表达。成功构建了SP0306蛋白的全长表达载体PET28a-sp0306,利用大肠杆菌BL21(DE3... SP0306蛋白是肺炎链球菌TIGR4菌株中的一种假想的转录因子,但其蛋白三维结构及生物学功能尚未明了,生物信息学分析提示其可能调控碳水化合物代谢相关基因的表达。成功构建了SP0306蛋白的全长表达载体PET28a-sp0306,利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行原核表达,获得了以可溶形式表达的目的蛋白。经Ni-NTA柱亲和层析及DEAE阴性离子交换层析纯化后,获得了高纯度的目的蛋白。采用悬滴气相扩散法获得了质量较好的SP0306蛋白晶体,并初步进行了晶体X射线衍射,为其最终的三维结构解析及生物学功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 sp0306蛋白 原核表达 晶体生长

原文传递

肺炎链球菌SP2108蛋白的原核表达及免疫原性分析

17

作者 骆诗露 黄健 +3 位作者 韩道宾 陈泽慧 朱杰华 闵迅 《遵义医学院学报》 2016年第4期382-386,共5页

目的制备纯化的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)SP2108蛋白,分析其在常见S.pn菌株中的保守性,并评价其作为S.pn候选疫苗的可行性。方法利用PCR法扩增全长SP2108基因,将其克隆至原核表达载体p Cold TF中,转化E.coli BL21(DE3)... 目的制备纯化的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)SP2108蛋白,分析其在常见S.pn菌株中的保守性,并评价其作为S.pn候选疫苗的可行性。方法利用PCR法扩增全长SP2108基因,将其克隆至原核表达载体p Cold TF中,转化E.coli BL21(DE3)后IPTG诱导蛋白表达,经Ni-NTA树脂纯化获得高纯度的目的蛋白;将纯化蛋白免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA检测效价,Western blot鉴定该蛋白在6种常见S.pn菌株的保守性。从Genebank中找出不同S.pn菌株的SP2108蛋白质氨基酸序列,并用Clustal X 2.1软件分析其序列保守性。结果获得了可溶性形式的SP2108蛋白,该重组蛋白免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体;Western blot验证了SP2108蛋白在6株常见S.pn菌株中均有表达;SP2108蛋白在不同型别S.pn中氨基酸序列保守性为100%。结论原核表达并纯化了SP2108蛋白,该蛋白保守性高,免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体,可能是一种较好的S.pn候选蛋白疫苗。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 sp2108蛋白 原核表达 保守性 C57BL/6小鼠

下载PDF 职称材料