肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在NSCLC中的表达及临床意义 被引量：11

1

作者 梁洪享 钟竑 +3 位作者 罗勇 黄燕 丁昭珩 丁罡 《实用癌症杂志》 2013年第5期472-475,共4页

目的探讨肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法,检测70例NSCLC组织中CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1蛋白的表达情况。结果 CD133、CD44、SOX2、O... 目的探讨肿瘤干细胞标记物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法,检测70例NSCLC组织中CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1蛋白的表达情况。结果 CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在70例NSCLC组织中阳性表达率分别为88.57%、98.57%、100.00%、100.00%、100.00%,强阳性表达率分别为48.57%、67.14%、67.14%、31.43%、50.00%;NSCLC组织中CD44与SOX2共表达分析存在统计学意义(P=0.028);70例NSCLC中CD44++SOX2++组合占38.57%(27/70),CD44++ALDH1++组合占34.29%(24/70),SOX2++ALDH1++组合占34.29%(24/70),CD133++SOX2++组合占31.43%(22/70),双强阳性NSCLC组织与非双强阳性NSCLC组织比较,病理分化程度方面均有差别,双强阳性NSCLC组织多为中、低分化,而非双强阳性NSCLC组织倾向高分化。上述4种双强阳性组织与非双强阳性组织在病理分化程度上比较,均有统计学意义(P值分别为0.0022、0.0463、0.0463、0.003)。结论 NSCLC组织中OCT4、CD44、SOX2、CD133、ALDH1表达阳性率高;CD44与SOX2存在共表达关系;双强阳性组合CD44++SOX2++、CD44++ALDH1++、SOX2++ALDH1++、CD133++SOX2++,有可能对研究NSCLC干细胞标记物有一定的帮助。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 CD133蛋白 CD44蛋白 sox2蛋白 OCT4蛋白 ALDH1蛋白 非小细胞肺癌 免疫组织化 学方法

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SOX2蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量：10

2

作者 陈尚忠 周自华 +2 位作者 邹媚 袁志华 蔡昭 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2011年第11期991-994,共4页

目的研究SOX2蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义。方法收集80例结直肠癌手术标本及20例正常的肠黏膜标本,采用免疫组化法检测SOX2蛋白在标本中的表达情况。结果 SOX2蛋白在正常肠黏膜中不表达,在结直肠癌中高表达,表达率为41.3%。SOX2... 目的研究SOX2蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义。方法收集80例结直肠癌手术标本及20例正常的肠黏膜标本,采用免疫组化法检测SOX2蛋白在标本中的表达情况。结果 SOX2蛋白在正常肠黏膜中不表达,在结直肠癌中高表达,表达率为41.3%。SOX2表达水平与TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、组织学分化程度、Ki-67和p53基因表达水平均相关(P<0.05)。SOX2高表达组患者术后的5年生存率和无瘤生存率分别为39.4%和21.2%,低表达组患者分别为95.7%和83.0%,差异有统计学意义(P=0.000)。结论 SOX2蛋白在正常结直肠黏膜组织中不表达,在结直肠癌组织中表达率高,并可作为预测结直肠癌转移和预后的生物学指标。 展开更多

关键词 结直肠癌 sox2蛋白 预后

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SOX2、SOX7蛋白在喉癌及癌旁组织中的表达及其临床意义 被引量：3

3

作者 孟欣雨 崔颖 +1 位作者 穆兰 刘瑶 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期282-286,共5页

目的检测SOX2蛋白、SOX7蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)及细胞周期素(CyclinD1)蛋白在喉癌及癌旁正常上皮组织中的表达,并初步探讨其在喉癌发生中的临床意义。方法将收集到的65例喉癌组织和其中40例对应癌旁正常上皮组织的石蜡切片进行... 目的检测SOX2蛋白、SOX7蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)及细胞周期素(CyclinD1)蛋白在喉癌及癌旁正常上皮组织中的表达,并初步探讨其在喉癌发生中的临床意义。方法将收集到的65例喉癌组织和其中40例对应癌旁正常上皮组织的石蜡切片进行免疫组化染色,检测SOX2、SOX7、β-catenin及CyclinD1蛋白的表达。结果SOX2、β-catenin及CyclinD1蛋白在喉癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常上皮组织(P<0.05),SOX7蛋白在喉癌组织中的阳性表达率低于癌旁正常上皮组织(P<0.05);喉癌组织中SOX2、SOX7、β-catenin及CyclinD1蛋白的阳性表达率与淋巴结转移及T分期相关(P<0.05),与吸烟、饮酒、年龄、性别、分化程度、临床分型等均无相关性(P>0.05);在喉癌组织中β-catenin和cyclinD1与SOX2蛋白的表达呈正相关(φ=0.732,P<0.001;φ=0.844,P<0.001),与SOX7蛋白的表达呈负相关(φ_(SOX7与β-catenin)=-0.213,P<0.001;φ_(SOX7与cyclinD1)=-0.455,P<0.001),且β-catenin与cyclinD1的表达呈正相关(φ=0.661,P<0.001),SOX2与SOX7的表达呈负相关(φ=-0.388,P=0.002)。结论SOX2、β-catenin及CyclinD1蛋白在喉癌组织中高表达,SOX7蛋白在喉癌组织中低表达,推测SOX2、SOX7蛋白可能对喉癌的进展有一定影响。 展开更多

关键词 喉癌 sox2蛋白 sox7蛋白 Β-CATENIN蛋白 CYCLIND1蛋白

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山羊SOX2多克隆抗体制备 被引量：5

4

作者 刘平 张昀 +7 位作者 郑喜邦 李恭贺 岑小妹 岳磊磊 宗自杰 卢晟盛 卢克焕 张明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期178-183,共6页

【目的】构建山羊Sox2原核表达载体—pRSET-Sox2,并将诱导表达、纯化的His-Sox2融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备Sox2多克隆抗体。【方法】从pMD18T-Sox2载体上以Bam H I和Xho I双酶切截取Sox2片段,然后将其亚克隆到pRSET-A表达载体上,获... 【目的】构建山羊Sox2原核表达载体—pRSET-Sox2,并将诱导表达、纯化的His-Sox2融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备Sox2多克隆抗体。【方法】从pMD18T-Sox2载体上以Bam H I和Xho I双酶切截取Sox2片段,然后将其亚克隆到pRSET-A表达载体上,获得pRSET-Sox2重组质粒。转化了pRSET-Sox2的大肠杆菌BL21(DE3),1 mmol.L-1 IPTG 37℃诱导4 h,SDS-PAGE电泳及Western blotting检测融合蛋白表达。相同条件下大量增菌诱导,用Ni-NTA argrose介质分离纯化His-Sox2重组蛋白。将体外复性的融合蛋白皮下注射新西兰大白兔,间隔2—3周注射一次,共4次。最后一次注射后7 d,采血分离血清,用Western blotting检测抗体特异性。【结果】(1)原核表达载体pRSET-Sox2在大肠杆菌BL21(DE3)得到了高效表达;(2)纯化的His-Sox2融合蛋白能够满足多克隆抗体制备的要求;(3)经Western blotting检测,Sox2多克隆抗体能与His-Sox2融合蛋白特异性结合。【结论】制备了高特异性山羊Sox2多克隆抗体,为深入探讨山羊Sox2基因的生物学功能奠定了基础,也为山羊(iPS)细胞检测创造了良好条件。 展开更多

关键词 sox2 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 山羊

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山羊Sox2基因克隆、原核表达和GST融合蛋白纯化 被引量：4

5

作者 郑喜邦 杨照海 +4 位作者 刘平 赵华 卢晟盛 卢克焕 毕方方 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1454-1459,共6页

本研究旨在克隆山羊Sox2基因,构建pGEX-Sox2原核表达重组质粒,从大肠杆菌中获得纯化的GST-Sox2融合蛋白。应用RT-PCR方法从6周龄胎山羊生殖嵴扩增Sox2基因编码全序列,将其克隆到pMD18-T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体。重组质粒pGE... 本研究旨在克隆山羊Sox2基因,构建pGEX-Sox2原核表达重组质粒,从大肠杆菌中获得纯化的GST-Sox2融合蛋白。应用RT-PCR方法从6周龄胎山羊生殖嵴扩增Sox2基因编码全序列,将其克隆到pMD18-T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体。重组质粒pGEX-Sox2转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,用SDS-PAGE电泳及Western blotting检测GST-Sox2融合蛋白表达,用谷胱甘肽Sepharose 4B介质分离纯化该融合蛋白。结果表明,山羊Sox2基因编码序列全长为960 bp;在优化的表达条件(1 mmol.L-1IPTG,22℃诱导16h)下,重组质粒(pGEX-Sox2)在大肠杆菌得到了高效表达;谷胱甘肽Sepharose 4B颗粒纯化蛋白得到预期大小的融合蛋白(约60 ku)。结论,本研究克隆了山羊Sox2基因,获得了纯化的GST-Sox2融合蛋白,为制备其多克隆抗体奠定了基础,为进一步研究山羊iPS细胞(Induced pluripotent stem cells)创造了条件。 展开更多

关键词 sox2基因 原核表达 蛋白纯化 山羊

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MRI纹理联合Cripto-1与SOX2蛋白对甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的诊断价值 被引量：2

6

作者 姚锡虎 周青云 +1 位作者 张志诚 周建英 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2022年第2期224-228,共5页

目的:分析磁共振成像(MRI)T_(2)加权成像(T_(2)WI)纹理联合Cripto-1与SOX2蛋白在甲状腺乳头状癌(PTC)颈部淋巴结转移(LNM)中的诊断价值。方法:选择82例PTC患者,并留取患者根治术标本进行后期免疫组化研究。根据入选患者病理诊断结果,将4... 目的:分析磁共振成像(MRI)T_(2)加权成像(T_(2)WI)纹理联合Cripto-1与SOX2蛋白在甲状腺乳头状癌(PTC)颈部淋巴结转移(LNM)中的诊断价值。方法:选择82例PTC患者,并留取患者根治术标本进行后期免疫组化研究。根据入选患者病理诊断结果,将42例LNM阳性者分为观察组,40例LNM阴性者分为对照组。分析MRI纹理参数联合Cripto-1与SOX2蛋白诊断PTC伴LNM的敏感度、特异度及符合率的临床价值。结果:Cripto-1蛋白在伴LNM的PTC中的阳性表达显著强于未伴LNM的PTC中的阳性表达(P<0.05)。Cripto-1蛋白免疫组化染色阳性表达多位于肿瘤周围组织,表现为棕黄色颗粒,主要位于细胞膜上,且Cripto-1蛋白在伴LNM的PTC中染色强度显著强于未伴LNM的PTC。SOX2蛋白在伴LNM的PTC中的阳性表达显著强于未伴LNM的PTC中的阳性表达(P<0.05)。SOX2蛋白免疫组化染色阳性表达多位于肿瘤周围组织,表现为棕黄色颗粒,主要位于细胞核上,且SOX2蛋白在伴LNM的PTC中染色强度显著强于未伴LNM的PTC。两组T_(2)WI图像纹理分析的熵、角二阶矩以及相关间具有统计学意义(P<0.05),而逆差矩、偏度、对比、峰度以及均值间均无统计学意义(P>0.05)。预测PTC伴LNM的熵、角二阶矩以及相关对应AUC分别为0.884、0.783、0.718,敏感度分别为97.13%、79.42%、44.14%,特异度分别为70.00%、60.00%、90.00%。MRI纹理参数对PTC伴LNM的诊断价值稍优于Cripto-1蛋白,差异无统计学意义(P>0.05);而MRI纹理参数联合Cripto-1与SOX2蛋白诊断在敏感度、特异度及符合率方面均显著优于单独诊断(P<0.05)。结论:MRI纹理联合Cripto-1与SOX2蛋白诊断PTC伴LNM的敏感度、特异度及符合率均高于单独MRI纹理参数或Cripto-1蛋白的检查。此外,其有望为PTC患者预后及其治疗决策提供更可靠、准确的依据。 展开更多

关键词 甲状腺乳头状癌 颈部淋巴结转移 磁共振成像 T_(2)WI纹理 Cripto-1蛋白 sox2蛋白

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SOX2蛋白及趋化相关基因CCR1、CCR2、MCP-1影响骨髓瘤细胞生物学特性的机制 被引量：1

7

作者 柯金勇 汪玉芳 +2 位作者 陆亚岚 张欣 柯善栋 《海南医学》 CAS 2018年第17期2377-2380,共4页

目的揭示SOX2蛋白及趋化相关基因CCR1、CCR2和MCP-1影响骨髓瘤细胞生物学特性的机制。方法本研究以骨髓瘤细胞株H929为研究对象,采用随机数表法将细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组。空白对照组为不进行任何处理的骨髓瘤细胞株H9... 目的揭示SOX2蛋白及趋化相关基因CCR1、CCR2和MCP-1影响骨髓瘤细胞生物学特性的机制。方法本研究以骨髓瘤细胞株H929为研究对象,采用随机数表法将细胞分为空白对照组、阴性对照组和实验组。空白对照组为不进行任何处理的骨髓瘤细胞株H929,阴性对照组为转染慢病毒r LV-ZPP的稳转株H929-ZPP,实验组为转染慢病毒r LV-hsox2-Zs Green-Puro的稳转株H929-hsox2。采用Western blot检测各组细胞中SOX2蛋白表达,采用实时荧光定量PCR反应(RT-PCR)测定各组细胞中CCR1、CCR2和MCP-1基因表达,相应基因的相对表达水平用2-ΔΔCT代表。采用酶标仪测定细胞在450 nm处的吸光度值,计算细胞生存率。采用流式细胞仪计算各组细胞的凋亡率。结果实验组的SOX2蛋白表达为(1.38±0.07),高于空白对照组的(1.04±0.06)和阴性对照组的(0.72±0.07),差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的CCR1、CCR2和MCP-1基因表达水平分别为(4.37±0.33)、(4.45±0.38)、(10.72±1.14),高于空白对照组的(2.14±0.15)、(2.21±0.17)和(5.17±0.35)和阴性对照组的(1.22±0.10)、(1.16±0.09)和(1.59±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的细胞生存率为(40.53±2.21)%,低于空白对照组的(86.85±5.17)%和阴性对照组的(95.07±7.08)%,差异均有统计学意义(P<0.05);实验组的细胞凋亡率为(58.56±3.25)%,高于空白对照组的(12.15±1.14)%和阴性对照组的(4.93±2.12)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SOX2基因在细胞周期中特定时期的高表达会导致骨髓瘤细胞的凋亡。CCR1、CCR2和MCP-1基因参与了骨髓瘤细胞恶性增殖,其在细胞中的异常表达为骨髓瘤细胞提供合适的环境,导致疾病复发和抗凋亡的发生。 展开更多

关键词 骨髓瘤 sox2蛋白 转录因子 趋化因子 趋化因子受体 生物学特性

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同源域蛋白Nanog与胚胎干细胞的自我更新研究进展 被引量：1

8

作者 钱斓兰 徐海伟 《生命科学》 CSCD 2007年第3期311-315,共5页

胚胎干细胞作为一种具有自我更新能力的细胞,可以在体外无限对称性分裂,同时保持未分化状态,具有向各种类型细胞分化的潜能。基于这一特性,胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)有着极其广阔的应用前景。维持ES细胞自我更新的机制至... 胚胎干细胞作为一种具有自我更新能力的细胞,可以在体外无限对称性分裂,同时保持未分化状态,具有向各种类型细胞分化的潜能。基于这一特性,胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)有着极其广阔的应用前景。维持ES细胞自我更新的机制至今尚未阐明,推测ES细胞的自我更新机制是一个包括细胞外刺激、细胞内多种因子共同参与的复杂的网络调节系统。近年来发现同源域蛋白Nanog在这个网络调节系统中处于中心地位,对ES细胞自我更新的维持起着关键作用。本文就近年来关于Nanog在ES细胞自我更新维持中的作用,以及它与其他信号通路之间的对话,阐明ES细胞自我更新的维持机制。 展开更多

关键词 Nanog蛋白 ES细胞 LIF OCT4 sox2 自我更新 全能性

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Tat融合蛋白表达载体TAT-SOX2的克隆化及蛋白表达研究

9

作者 王建军 万志红 +3 位作者 赵平 靳雪源 谢国明 辛绍杰 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期352-354,共3页

目的 构建重组表达载体TAT-SOX2,在E.coli BL21中高效表达并纯化融合蛋白.方法 经PCR获得编码人SOX2的全基因序列,连接到原核表达载体PET-28b-TAT-V2上,得到重组表达载体TAT-SOX2,转化大肠埃希菌,IPTG诱导TAT-SOX2融合蛋白的表达.表达... 目的 构建重组表达载体TAT-SOX2,在E.coli BL21中高效表达并纯化融合蛋白.方法 经PCR获得编码人SOX2的全基因序列,连接到原核表达载体PET-28b-TAT-V2上,得到重组表达载体TAT-SOX2,转化大肠埃希菌,IPTG诱导TAT-SOX2融合蛋白的表达.表达产物用SDS-PAGE鉴定,亲和层析柱纯化融合蛋白,并应用Western Blot检测蛋白的特异性,应用免疫荧光检测融合蛋白转导HSF细胞的效果.结果 成功构建了TAT-SOX2融合蛋白的原核表达载体,在诱导下获得了高效表达并纯化了融合蛋白,Western Blot鉴定正确.免疫荧光提示融合蛋白可快速转导入HSF细胞内.结论 为进一步的通过蛋白转导方式诱导多能干细胞提供了物质基础. 展开更多

关键词 蛋白质 sox2 干细胞 蛋白质转运

原文传递

Sox2-R_9-EGFP融合蛋白的表达及穿膜能力鉴定

10

作者 殷慧群 张运海 +3 位作者 刘亚 曹鸿国 孙雪萍 章孝荣 《生物医学工程研究》 2011年第3期143-149,共7页

构建、表达、纯化、鉴定Sox2-R9-EGFP融合蛋白,验证其在体外培养的成纤维细胞中的转导活性。以胎猪原始生殖嵴为材料提取总RNA,反转录成cDNA第一链,设计带9聚精氨酸(R9)的特定引物,从cDNA中扩增出猪Sox2基因,克隆到pET-28a-EGFP载体中,... 构建、表达、纯化、鉴定Sox2-R9-EGFP融合蛋白,验证其在体外培养的成纤维细胞中的转导活性。以胎猪原始生殖嵴为材料提取总RNA,反转录成cDNA第一链,设计带9聚精氨酸(R9)的特定引物,从cDNA中扩增出猪Sox2基因,克隆到pET-28a-EGFP载体中,经酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,Ni2+柱亲和层析纯化和SDS-PAGE检测表达产物后,将Sox2-R9-EGFP蛋白作用于体外培养的猪胎儿成纤维细胞中以观察其转导活性。成功构建Sox2-R9-EGFP融合蛋白原核表达载体,纯化后蛋白经SDS-PAGE检测证实融合蛋白片段大小正确,加到培养的猪胎儿成纤维细胞中可观察到Sox2-R9-EGFP融合蛋白能进入细胞,且部分可定位于细胞核。获得了Sox2-R9-EGFP原核蛋白表达载体,R9能介导Sox2蛋白进入细胞,为进一步利用重组蛋白建立诱导性多潜能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPS细胞)的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 sox2基因 原核表达 细胞穿膜肽 融合蛋白

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可溶性Sox2-11R重组蛋白的制备与鉴定

11

作者 李侠 姜少帅 +2 位作者 韩菲 张鹏飞 张运海 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期798-804,共7页

旨在通过原核表达制备可溶性Sox2-11R重组蛋白,并验证其穿膜能力。首先,采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)与蛋白转导域11聚精氨酸(11 arginine,11R)的融合表达和与成纤维细胞的共孵育验证11R的穿膜能... 旨在通过原核表达制备可溶性Sox2-11R重组蛋白,并验证其穿膜能力。首先,采用增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)与蛋白转导域11聚精氨酸(11 arginine,11R)的融合表达和与成纤维细胞的共孵育验证11R的穿膜能力。其次,将目的基因Sox2-11R在原核表达载体pET30a中表达,通过优化表达条件获取可溶性Sox2-11R重组蛋白。最后,利用Ni柱纯化重组蛋白,SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定;并用免疫荧光染色验证重组蛋白是否具有进入细胞核的能力。结果表明,成功构建了pET30a-Sox2-11R原核表达载体,纯化的Sox2-11R重组蛋白具有穿膜能力,且在细胞培养基中具有较高溶解度,这为制备其他重编程因子的重组蛋白提供了参考,也为外源蛋白诱导iPSCs奠定了基础。 展开更多

关键词 sox2 重组蛋白 可溶性 制备

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Sox2蛋白在结直肠管状腺瘤及腺癌中的表达及临床意义

12

作者 黄慧艳 梅金红 王志勇 《中国医学创新》 CAS 2018年第4期4-7,共4页

目的:观察和检测Sox2蛋白在结直肠管状腺瘤及腺癌中的表达情况及临床意义。方法:选取本院收治的结直肠管状腺瘤50例及腺癌50例为研究对象。根据不典型增生程度将结直肠管状腺瘤分为低级别管状腺瘤组(n=30)和高级别管状腺瘤组(n=20);根... 目的:观察和检测Sox2蛋白在结直肠管状腺瘤及腺癌中的表达情况及临床意义。方法:选取本院收治的结直肠管状腺瘤50例及腺癌50例为研究对象。根据不典型增生程度将结直肠管状腺瘤分为低级别管状腺瘤组(n=30)和高级别管状腺瘤组(n=20);根据分化程度将腺癌分为高分化腺癌组(n=8)、中分化腺癌组(n=26)、低分化腺癌组(n=16)。采用免疫组化的方法,探讨Sox2蛋白在结直肠管状腺瘤及腺癌中的不同表达情况及临床意义。结果:低级别管状腺瘤组Sox2的表达阳性率为10.00%(3/30),低于高级别管状腺瘤组的40.00%(8/20),比较差异有统计学意义(P<0.05);不同分化程度腺癌中Sox2的表达阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=22.563,P=0.010)。结论:Sox2蛋白表达水平在结直肠管状腺瘤不典型增生的不同程度及腺癌的不同分化程度中均有不同程度的表达,检测Sox2蛋白对了解结直肠管状腺瘤及结直肠癌的生物学行为和评估预后具有一定的临床价值。 展开更多

关键词 sox2蛋白 结直肠管状腺瘤 腺癌

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肺癌组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白水平检测及其临床价值探讨 被引量：7

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作者 邹淳缘 许晓峰 +1 位作者 卢仁泉 郭林 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期36-44,共9页

背景与目的:肺癌发病机制具有多样性,但一经确认,往往已错过最佳治疗时机,本文通过探讨肺癌组织和外周血中抑癌基因(p53)、蛋白基因产物(PGP9.5)、转录因子(SOX2)、肿瘤相关基因编码蛋白(GAGE7)、解旋酶(GBU4-5)和黑色素瘤抗原(MAGE A1... 背景与目的:肺癌发病机制具有多样性,但一经确认,往往已错过最佳治疗时机,本文通过探讨肺癌组织和外周血中抑癌基因(p53)、蛋白基因产物(PGP9.5)、转录因子(SOX2)、肿瘤相关基因编码蛋白(GAGE7)、解旋酶(GBU4-5)和黑色素瘤抗原(MAGE A1)蛋白水平的相关性,同时分析其在肺癌诊疗中的应用价值。方法:回顾并分析2018年5月—2020年5月在复旦大学附属肿瘤医院确诊的100例肺癌患者的病历资料,临床TNM分期Ⅰ期25例,Ⅱ期45例,Ⅲa期30例;非小细胞肺癌80例,小细胞肺癌20例;取手术切除的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测上述6种蛋白的水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)法检测其基因表达,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测外周血中6种蛋白的抗体阳性情况。结果:肿瘤组织中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05);将其与肿瘤的临床病理学特征进行相关分析发现,肿瘤组织和外周血中的p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平与肿瘤TNM分期和分化级别有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤直径、病理学类型无关(P>0.05)。肿瘤组织中6种蛋白的表达水平与外周血清表达具有较好的一致性(P>0.05)。结论:肺癌肿瘤组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白表达阳性与肿瘤TNM分期及分化级别密切相关。 展开更多

关键词 肺癌 抑癌基因p53 蛋白基因产物(PGP9.5) 转录因子(sox2) 肿瘤相关基因编码蛋白(GAGE7) 解旋酶(GBU4-5) 黑色素瘤抗原(MAGE A1)

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猪转录因子SOX2下游调控蛋白筛选及调控网络建立

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作者 吕嘉伟 尹智 +4 位作者 李妍 王加强 赵剑超 伟人悦 刘忠华 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期44-57,共14页

SOX2是早期胚胎发育与干细胞多能性维持相关的重要转录因子。从猪孤雌囊胚中克隆获得猪SOX2基因并构建对应过表达体系。通过猪pEF细胞系与PK15细胞系中过表达SOX2基因及qPCR技术,检测89个下游调控候选基因表达情况,建立猪SOX2下游调控... SOX2是早期胚胎发育与干细胞多能性维持相关的重要转录因子。从猪孤雌囊胚中克隆获得猪SOX2基因并构建对应过表达体系。通过猪pEF细胞系与PK15细胞系中过表达SOX2基因及qPCR技术,检测89个下游调控候选基因表达情况,建立猪SOX2下游调控网络。结果发现,GATA4、MSC、GSC、FGF4、STELLA、ACACA、FN1、KLF4以及MEK基因在pEF细胞系与PK15细胞系间呈差异性调控表达。BMP4、FGFR2、ACAA2、ACSL3、β-CATENIN、c-MYC、MYST3、GSK3β、ALDH3A2、STAT3、SMAD2、KDM6A、ACADL、PI3K与WDR3基因在两种细胞系中呈同趋势性调控表达;经JASPAR数据库预测发现,WDR3、β-CATENIN、ACAA2、KDM6A、STAT3、ACADL、GSK3β与ALDH3A2基因启动子区域存在高相关性的SOX2蛋白结合位点,推测这些基因受SOX2蛋白直接调控;同时构建针对猪SOX2基因的高效敲除体系。研究结果为建立物种特异性的猪SOX2调控网络提供数据基础。 展开更多

关键词 猪sox2基因 转录因子 下游调控蛋白 调控网络 基因敲除

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CARM1维持羊水干细胞干性的机制

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作者 吴静 赵利华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第36期5412-5418,共7页

背景:研究表明,CARM1催化的组蛋白H3R17/R26的甲基化修饰对于胚胎干细胞干性的维持起着非常重要的作用,但其在羊水干细胞干性维持中的作用及机制目前尚不明确。目的:初步探讨CARM1在维持羊水干细胞干性中的作用及其分子机制。方法:分离... 背景:研究表明,CARM1催化的组蛋白H3R17/R26的甲基化修饰对于胚胎干细胞干性的维持起着非常重要的作用,但其在羊水干细胞干性维持中的作用及机制目前尚不明确。目的:初步探讨CARM1在维持羊水干细胞干性中的作用及其分子机制。方法:分离、培养人妊娠晚期羊水干细胞,RT-PCR鉴定干细胞标志物及CARM1基因的表达。利用CARM1的两条shR NA慢病毒表达载体,沉默羊水干细胞中CARM1基因的表达。RT-qP CR检测CARM1基因的表达沉默效率,Western blot检测组蛋白H3R17的甲基化水平。RT-qP CR检测干细胞标志物OCT4,SOX2和NANOG基因的表达水平。结果与结论:(1)人妊娠晚期羊水干细胞能够表达干细胞标志物,包括OCT4、SOX2、Nanog和KLF4,并表达CARM1基因;(2)CARM1的两条shR NA均能够有效沉默CARM1基因的表达;(3)CARM1表达沉默后,羊水干细胞中组蛋白H3R17的甲基化水平降低,OCT4和SOX2的表达也降低,而NANOG的表达没有发生变化;(4)结果表明,CARM1可能通过调控OCT4和SOX2基因的表达,进而起到维持羊水干细胞干性的作用。 展开更多

关键词 干细胞 羊水 妊娠末期 蛋白质精氨酸N-甲基转移酶 慢病毒感染 甲基化 组织工程 分化 羊水干细胞 妊娠晚期 CARM1 慢病毒 sh RNA 表达沉默 OCT4 sox2 H3R17甲基化 干性 国家自然科学基金

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蛋白质Sumo化修饰原核表达系统的构建

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作者 唐波 杜娟 +4 位作者 杨力侠 王小海 吴海波 吴勇延 郭泽坤 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第10期199-206,共8页

【目的】构建一种可获得Sumo修饰蛋白的原核表达系统,为Sumo化修饰蛋白的批量制备奠定基础。【方法】用Trizol裂解法提取小鼠畸胎瘤细胞F9的总RNA,反转录成cDNA后PCR扩增获得Sumo1、Ubc9、Sae2和Sae1基因。将上述基因及相应载体酶切、... 【目的】构建一种可获得Sumo修饰蛋白的原核表达系统,为Sumo化修饰蛋白的批量制备奠定基础。【方法】用Trizol裂解法提取小鼠畸胎瘤细胞F9的总RNA,反转录成cDNA后PCR扩增获得Sumo1、Ubc9、Sae2和Sae1基因。将上述基因及相应载体酶切、连接后构建出重组质粒pACYC-Ubc9-Sumo1、pCDF-Sae2-Sae1。采用质粒转化-制备阳性克隆感受态细胞-质粒转化的方法获得pACYC-Ubc9-Sumo1和pCDF-Sae2-Sae1共表达的Su-mo化修饰的原核表达系统。以pGEX-GST-Sox2和pGEX-GST-Sox2K247R重组质粒为例,采用Western Blot检测蛋白质Sumo化修饰原核表达系统的有效性。用另一Sumo修饰底物Oct4及其Sumo修饰位点突变的突变体Oct4K118R转化原核Sumo修饰系统,并连续传代,检测蛋白质Sumo化修饰系统的实用性及遗传稳定性。【结果】构建的蛋白质Sumo化修饰原核表达系统可特异修饰Sumo1的底物Sox2和Oct4;含有Oct4原核表达载体的蛋白质Sumo化修饰系统可稳定传至15代,系统的稳定性较好。【结论】获得了成本较低、特异性强、重复性好、稳定性强的可用于制备Sumo化蛋白的原核表达系统。 展开更多

关键词 SUMO 蛋白质体外修饰 原核表达 OCT4 sox2

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穿膜肽引导的体外表达转录因子蛋白Sox2进入红鳍东方鲀精巢细胞系

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作者 杨秀霞 侯雪宁 +3 位作者 徐彬 郝萧 姜国建 樊廷俊 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1165-1171,共7页

为了探索适用于体外培养的鱼细胞外源基因转入方法,本研究通过构建红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)转录因子Sox2的重组表达载体p ET32a(+)-Sox2-11R-6His,诱导表达并纯化得到了C末端连接多聚精氨酸(11R)的重组蛋白Sox2-11R-6His,以其与... 为了探索适用于体外培养的鱼细胞外源基因转入方法,本研究通过构建红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)转录因子Sox2的重组表达载体p ET32a(+)-Sox2-11R-6His,诱导表达并纯化得到了C末端连接多聚精氨酸(11R)的重组蛋白Sox2-11R-6His,以其与红鳍东方鲀精巢细胞系细胞共孵育12 h后,光镜观察结合Western Blot检测发现重组蛋白进入细胞的效率与浓度呈剂量依赖关系且最佳孵育浓度为8μg/m L,当重组蛋白质量浓度达到10μg/m L时,表现出明显的细胞毒性。对外源蛋白进行免疫荧光标记定位,发现重组蛋白分布于细胞质,部分进入到细胞核中。证明了穿膜肽11R可以有效运载转录因子重组蛋白至红鳍东方鲀的细胞系细胞中。本研究旨在将广泛应用于哺乳动物的细胞基因递送载体穿膜肽应用于鱼类细胞系细胞。 展开更多

关键词 红鳍东方鲀 sox2 穿膜肽 重组蛋白 精巢细胞系

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Sox-2蛋白表达与宫颈癌病理组织分级及淋巴结转移相关性分析 被引量：2

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作者 徐文彬 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第11期1766-1768,共3页

目的:分析探讨Sox-2蛋白表达与宫颈癌病理组织分级及淋巴结转移的相关性。方法:随机选取56例宫颈癌患者的宫颈病理组织(宫颈癌组),同时随机选取56例非宫颈癌患者的宫颈病理组织(非宫颈癌组),对比两组病理组织中Sox-2蛋白表达荧光指数(FI... 目的:分析探讨Sox-2蛋白表达与宫颈癌病理组织分级及淋巴结转移的相关性。方法:随机选取56例宫颈癌患者的宫颈病理组织(宫颈癌组),同时随机选取56例非宫颈癌患者的宫颈病理组织(非宫颈癌组),对比两组病理组织中Sox-2蛋白表达荧光指数(FI)及Sox-2 mRNA相对表达量的情况,同时对宫颈癌组患者Sox-2蛋白表达水平及Sox-2 mRNA相对表达量与宫颈癌病理组织分级及淋巴结转移数量的相关性进行分析。结果:宫颈癌组患者的FI值及mRNA相对表达量明显高于非宫颈癌组患者,且宫颈癌患者FI表达水平及mRNA相对表达量与宫颈癌病理组织分级及淋巴结转移数量均呈显著的正向相关性。结论:宫颈癌患者病理组织中Sox-2蛋白表达水平明显高于非宫颈癌组,且随着病情的加重,其表达水平逐步升高。 展开更多

关键词 sox-2蛋白表达 宫颈癌病理组织 淋巴结转移

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