背景与目的:细胞因子信号抑制因子(suppressor of cytokine signaling1,SOCS1)在肿瘤免疫负反馈调节中起重要作用,下调其表达可以有效增强机体的抗肿瘤免疫反应。本研究应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术下调SOCS1基因表达联合OK-...背景与目的:细胞因子信号抑制因子(suppressor of cytokine signaling1,SOCS1)在肿瘤免疫负反馈调节中起重要作用,下调其表达可以有效增强机体的抗肿瘤免疫反应。本研究应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术下调SOCS1基因表达联合OK-432刺激成熟的树突细胞(dendritic cell,DC)体外诱导特异性抗肿瘤作用,初步探讨其作用机制。方法:利用特异性小干扰RNA(siRNA)下调DC中SOCS1的表达,同时用肝癌HepG2细胞裂解物负载DC,OK-432刺激DC成熟,观察DC的形态特征,流式细胞仪检测刺激前后DC的表型变化,奥马蓝(AlamarBlue)法检测成熟DC对自身淋巴细胞的激活和增殖作用,LDH法检测其对HepG2、EC109细胞和K562细胞的杀伤作用。结果:DC体外诱导培养成功,设计的siRNA片段能有效下调iDC中SOCS1的表达,OK-432刺激DC成熟,CD80、CD83、CD86、HLA-DR等DC表面抗原明显表达上调,而负载肝癌抗原对DC表型无明显影响;SOCS1的下调可以促进DC成熟,负载肝癌抗原的DC能有效刺激自体淋巴细胞增殖,T细胞增殖率为(110.7±22.2)%,同时产生针对HepG2细胞的特异性杀伤作用,特异性细胞毒T淋巴细胞活性为(54.0±13.2)%。而针对EC109细胞和K562细胞的杀伤率仅为(10.0±30.7)%和(14.5±15.5)%。结论:RNAi下调SOCS1表达,OK432刺激负载肝癌全细胞抗原的成熟DC可以产生高效而特异性的抗肝癌的免疫应答。展开更多
