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巴西橡胶树SNARE蛋白全长cDNA克隆及其序列特征分析 被引量:2
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作者 邓柳红 罗明武 张春发 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期826-830,共5页
从巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)差减cDNA文库中筛选到一个与SNARE蛋白同源性较高的基因片段,根据其序列信息设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增技术RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)进行差异片段的5′和3′端的扩增,获得了长... 从巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)差减cDNA文库中筛选到一个与SNARE蛋白同源性较高的基因片段,根据其序列信息设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增技术RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)进行差异片段的5′和3′端的扩增,获得了长度为1 070 bp的全长cDNA克隆R295。序列分析表明该基因包含600 bp的开放阅读框,5′-UTR为93 bp,3′-UTR为377 bp,编码199个氨基酸。该基因编码的蛋白具有一个SNARE coiled-coil保守区、一个典型的VAMP基元及一个羧基端的CAAX基元。同源分析表明该蛋白属于一类特殊的longins蛋白。RT-PCR检测表明它在胶乳中特异表达,在叶中没有表达。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 胶乳 snares蛋白 Ykt6
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驱蛔中药的活性成分川楝素的生物效应 被引量:20
2
作者 施玉樑 王文萍 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期397-406,共10页
利用楝属植物皮和种子治疗消化道寄生虫病和防治农业虫害,早在两千年前的中国古代已有记载。川楝素(toosendanin,C30H38O11,FW=574)是我国科学家在上世纪五十年代从川楝皮提取、分离的一个用以代替进口驱蛔药山道年的三萜化合物。研究... 利用楝属植物皮和种子治疗消化道寄生虫病和防治农业虫害,早在两千年前的中国古代已有记载。川楝素(toosendanin,C30H38O11,FW=574)是我国科学家在上世纪五十年代从川楝皮提取、分离的一个用以代替进口驱蛔药山道年的三萜化合物。研究已证明川楝素具多种独特的生物效应和在科学研究、临床医学及农业上的应用价值。第一,川楝素以先易化后抑制的双相作用干扰神经递质释放,阻遏神经肌肉接头和中枢神经突触的突触传递。此作用可能是川楝素改变递质释放装置的Ca2+敏感性和使之最终完全消失的结果。第二,尽管川楝素与肉毒神经毒素阻遏神经肌肉接头传递的作用有许多相似,川楝素在离体和在体实验中均显示出极有效的抗肉毒神经毒素作用:川楝素可治愈致死量肉毒中毒的小鼠和猴;经川楝素孵育的离体神经肌肉标本,或由经一次川楝素注射的动物取出的神经肌肉标本具抵抗肉毒神经毒素作用的能力。已有证据表明抗肉毒神经毒素作用是通过川楝素阻隔肉毒神经毒素与其酶解底物SNARE蛋白的接近而实现的。第三,近年观察到川楝素还引发细胞分化和凋亡,抑制人的多种肿瘤细胞增殖。该作用是Ca2+依赖性的,有线粒体依赖的凋亡通路参与。第四,川楝素抑制多种K+通道,选择性地易化通过L型Ca2+通道的Ca2+流,并由此导致细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)持续升高。川楝素对K+通道的抑制,对L型Ca2+通道的易化和由之引起的[Ca2+]i升高和超载,是川楝素引发细胞分化和凋亡、抑制细胞增殖,以及川楝素产生神经递质双相变化和阻遏突触传递的机制。 展开更多
关键词 川楝素 突触前阻断剂 肉毒中毒 snare蛋白 细胞凋亡 CA^2+ K^+通道
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神经末梢突触囊泡释放神经递质过程的调控蛋白 被引量:4
3
作者 蔡倩 陆佩华 盛祖杭 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期6-10,共5页
神经末梢突触囊泡释放神经递质是一个复杂且受到精细调控的过程 ,涉及多种蛋白质间的相互作用。位于突触囊泡膜上的突触囊泡蛋白 /突触囊泡相关膜蛋白 (synaptobrevin/VAMP) ,与位于突触前膜上的syntaxin和突触小体相关蛋白SNAP 2 5 ,... 神经末梢突触囊泡释放神经递质是一个复杂且受到精细调控的过程 ,涉及多种蛋白质间的相互作用。位于突触囊泡膜上的突触囊泡蛋白 /突触囊泡相关膜蛋白 (synaptobrevin/VAMP) ,与位于突触前膜上的syntaxin和突触小体相关蛋白SNAP 2 5 ,三者聚合形成的可溶性N 甲基马来酰胺敏感因子 (NSF)附着蛋白受体 (SNARE)核心复合物是突触囊泡胞吐过程中的核心成分。本文主要围绕参与突触囊泡胞吐过程 ,以及调节SNARE核心复合物的形成 ,解离及其功能的蛋白质 。 展开更多
关键词 神经递质 胞吐 突触囊泡 snare蛋白 调控蛋白
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稻瘟菌附着胞形成和发育的研究进展 被引量:6
4
作者 彭陈 陈洪亮 +1 位作者 张玉琼 郭士伟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1270-1277,共8页
附着胞是稻瘟菌侵染寄主的关键结构,cAMP、MAPK和Ca2+等信号途径参与其形成和发育,同时受寄主表面识别蛋白基因、黑色素合成基因、甘油合成基因、细胞自噬基因以及SNARE蛋白等因子调控。从以上几个方面综述了稻瘟菌附着胞形成与发育的... 附着胞是稻瘟菌侵染寄主的关键结构,cAMP、MAPK和Ca2+等信号途径参与其形成和发育,同时受寄主表面识别蛋白基因、黑色素合成基因、甘油合成基因、细胞自噬基因以及SNARE蛋白等因子调控。从以上几个方面综述了稻瘟菌附着胞形成与发育的研究进展。 展开更多
关键词 附着胞 自噬基因 P型ATP酶 snare蛋白
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葡萄糖转运子4转位信号转导通路的研究进展 被引量:5
5
作者 李臣鸿 邵义舜 《现代生物医学进展》 CAS 2006年第7期54-56,共3页
葡萄糖是大部分细胞主要能量来源,它进入细胞的过程在生命的维持中无疑成为一个重要的步骤。而葡萄糖进入细胞是依赖于这些细胞上的葡萄糖转运子和相应的对其进行调节的因子。葡萄糖转运子4(GLUT4)在糖进入细胞维持血糖平衡中起了重要... 葡萄糖是大部分细胞主要能量来源,它进入细胞的过程在生命的维持中无疑成为一个重要的步骤。而葡萄糖进入细胞是依赖于这些细胞上的葡萄糖转运子和相应的对其进行调节的因子。葡萄糖转运子4(GLUT4)在糖进入细胞维持血糖平衡中起了重要的作用。近年有关GLUT4的研究文献很多,但却总给人不系统的感觉。本文对GLUT4转位的胰岛素依赖和非胰岛素依赖的信号途径以及其远端过程及机制作一综述,同时分析了GLUT4转位的信号途径的研究中存在的问题和将来研究的方向。 展开更多
关键词 葡萄糖转运子 信号转导 胰岛素 snare蛋白
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尖孢镰刀菌番茄专化型中SNARE蛋白FolSso1的功能分析 被引量:5
6
作者 杨帅 尤海霞 +4 位作者 李圣萱 郭谱胜 李美琴 云英子 王宗华 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期530-538,共9页
SNARE(Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor)蛋白保守存在于丝状真菌中,在膜泡转运的过程中起着关键的作用。番茄枯萎病是由尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici,Fol)引起... SNARE(Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor)蛋白保守存在于丝状真菌中,在膜泡转运的过程中起着关键的作用。番茄枯萎病是由尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici,Fol)引起的,严重威胁着番茄的生产。我们使用反向遗传学的方法来研究番茄枯萎病菌中SNARE蛋白FolSso1的功能,实验结果发现FolSSO1的基因缺失突变体菌丝生长速率降低,且产孢数量减少。另外,FolSSO1基因的缺失导致突变体相较于野生型菌株对细胞壁压力与细胞膜压力更加敏感。然后,在番茄果实和番茄植株的致病性实验中,我们发现FolSSO1的缺失并没有引起Fol致病性显著的变化。综上所述,本研究发现FolSSO1可以调控Fol营养生长,繁殖和对环境压力的响应过程,然而对Fol的致病过程并没有显著的调控作用。 展开更多
关键词 尖孢镰刀菌番茄专化型 snare蛋白 基因敲除 生长繁殖 致病性
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针刺对抑郁症大鼠海马SNARE蛋白介导突触前谷氨酸释放的影响 被引量:4
7
作者 樊凌 赵蒨琦 +6 位作者 吕爱平 许能贵 刘建华 李滋平 吴泰相 欧爱华 符文彬 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第13期3123-3126,共4页
目的探讨针刺对抑郁症的治疗作用及其可能的治疗靶点。方法采用长期不可预见的温和性刺激建立大鼠抑郁症模型。成功造模后,给予利鲁唑和针刺治疗,观察各组大鼠行为学的变化,测定海马组织谷氨酸的含量变化;应用Western印迹和荧光定量PCR... 目的探讨针刺对抑郁症的治疗作用及其可能的治疗靶点。方法采用长期不可预见的温和性刺激建立大鼠抑郁症模型。成功造模后,给予利鲁唑和针刺治疗,观察各组大鼠行为学的变化,测定海马组织谷氨酸的含量变化;应用Western印迹和荧光定量PCR检测突触小体相关蛋白(SNAP)-25、突触小泡膜相关蛋白(VAMP)1、VAMP2、VAMP7和syntaxin1蛋白及相应mRNA表达。结果与空白组相比,应激后大鼠的活动能力、体重和蔗糖消耗量明显下降(P<0.05);海马组织谷氨酸含量显著升高(P<0.01);而经利鲁唑和针刺治疗后,活动能力、体重和蔗糖消耗量升高;海马组织谷氨酸含量下降。Western印迹和RT-PCR结果显示:模型组大鼠的SNAP-25、VAMP1、VAMP2、VAMP7和syntaxin1表达量显著高于空白组(P<0.05);与模型组相比,利鲁唑和针刺组均能降低SNAP-25、VAMP1、VAMP2、VAMP7和syntaxin1表达水平,且利鲁唑组与针刺组对各检测指标的影响均无显著性差异(P>0.05)。结论针刺对谷氨酸释放有明显的调节作用,可溶性NSF附着蛋白受体(SNARE)介导的突触前谷氨酸释放在抑郁症的发病以及针刺抗抑郁过程中有重要作用,可能是针刺抗抑郁的靶点之一。 展开更多
关键词 针刺 抑郁症 海马 snare蛋白 谷氨酸
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肺腺癌患者突触小体相关蛋白家族的表达研究 被引量:4
8
作者 黄兴 陆世民 +4 位作者 王欣 陈辰 王洁 许林 任斌辉 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第6期600-603,共4页
目的大量研究表明,突触小体相关蛋白(synaptosomal-associated protein,SNAP)与多种肿瘤的发生发展密切相关。文中旨在筛选并验证在肺腺癌中特异性表达的突触小体相关蛋白47(synaptosomal-associated protein 47,SNAP47)并分析其与临床... 目的大量研究表明,突触小体相关蛋白(synaptosomal-associated protein,SNAP)与多种肿瘤的发生发展密切相关。文中旨在筛选并验证在肺腺癌中特异性表达的突触小体相关蛋白47(synaptosomal-associated protein 47,SNAP47)并分析其与临床指标间的关系。方法应用表达谱基因芯片和肿瘤基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)公共数据库筛选出特异性高表达于肺癌中的SNAP47,并选取江苏省肿瘤医院有完整临床资料的52例肺腺癌患者,对其癌组织及对应的癌旁肺组织应用实时定量逆转录聚合酶链反应检测SNAP47 mRNA的表达情况,并分析其与临床指标间的关系。结果 52例肺腺癌组织中,41例(78.9%)SNAP47 mRNA表达水平明显高于对应的癌旁肺组织,差异有统计学意义(P<0.05),且Ⅱ、Ⅲ期患者SNAP47 mRNA的表达水平(6.558±4.730)显著高于I期患者(2.718±2.370),N1+N2组患者SNAP47 mRNA的表达水平(6.609±4.942)也明显高于N0组患者(3.360±2.987),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SNAP47 mRNA特异性高表达可能参与了肺腺癌的浸润及淋巴结转移,是潜在的肺癌诊疗靶点。 展开更多
关键词 SNAP47 snare蛋白 肺腺癌 侵袭转移 实时PCR
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神经递质释放过程中的可溶性NSF附着蛋白受体(SNARE)和相关蛋白 被引量:2
9
作者 王堰婷 陆佩华 盛祖杭 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期35-38,共4页
近年来 ,对突触小泡释放神经递质分子机制的研究迅速发展 ,发现了大量位于神经末梢的蛋白质 .它们之间的相互作用与突触小泡释放神经递质相关 ,特别是位于突触小泡膜上的突触小泡蛋白 /突触小泡相关膜蛋白(synaptobrevin/VAMP) ,位于突... 近年来 ,对突触小泡释放神经递质分子机制的研究迅速发展 ,发现了大量位于神经末梢的蛋白质 .它们之间的相互作用与突触小泡释放神经递质相关 ,特别是位于突触小泡膜上的突触小泡蛋白 /突触小泡相关膜蛋白(synaptobrevin/VAMP) ,位于突触前膜上的syntaxin和突触小体相关蛋白 (synaptosome associatedproteinof2 5ku) ,三者聚合形成的可溶性NSF附着蛋白受体 (SNARE)核心复合体在突触小泡的胞裂外排、释放递质过程中有重要作用 .而一些已知及未知的与SNARE蛋白有相互作用的蛋白质 ,可通过调节SNARE核心复合体的形成与解离来影响突触小泡的胞裂外排 ,从而可以调节突触信号传递的效率及强度 ,在突触可塑性的形成中起重要作用 . 展开更多
关键词 snare蛋白 神经递质释放 突触小泡 相关蛋白 可溶性NSF附着蛋白受体
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囊泡转运蛋白SM蛋白家族的研究进展 被引量:2
10
作者 刘毅华 高向东 徐晨 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第28期5595-5600,共6页
真核细胞中含有多种不同功能的转运囊泡。虽然转运途径和携带物质各异,但细胞转运的基本分子机制却呈现出高度相似性和保守性。大多数转运途径都需要一种SNARE(Soluble NSF Attachment Protein Receptor)蛋白质复合体介导转运膜泡与靶... 真核细胞中含有多种不同功能的转运囊泡。虽然转运途径和携带物质各异,但细胞转运的基本分子机制却呈现出高度相似性和保守性。大多数转运途径都需要一种SNARE(Soluble NSF Attachment Protein Receptor)蛋白质复合体介导转运膜泡与靶膜的融合。同时,另一个蛋白家族,Sec1/Munc18蛋白(SM蛋白)也在囊泡运输中发挥重要作用。但是相比于对SNARE蛋白的认识的一致性,在不同的研究中SM蛋白的功能及其与SNARE复合体的相互作用方式却不尽相同。以下综述近年来有关SM蛋白结构和功能的研究进展,并归纳SM蛋白分子的作用机制、功能以及应用。 展开更多
关键词 SM蛋白 snare蛋白 囊泡运输 分泌调节
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逆境诱导基因GsSNARE1的耐逆功能分析 被引量:2
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作者 孙明哲 孙晓丽 +3 位作者 于清悦 纪巍 才华 朱延明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2191-2200,共10页
【目的】分离GsSNARE1,并分析其耐逆功能,为深入研究GsSNARE1功能及分子机制奠定基础。【方法】以耐盐野生大豆G50109为材料,利用酵母双杂交验证GsSNARE1与GsCBRLK的互作关系,通过real-time PCR分析干旱和盐处理后GsSNARE1的表达特性,对... 【目的】分离GsSNARE1,并分析其耐逆功能,为深入研究GsSNARE1功能及分子机制奠定基础。【方法】以耐盐野生大豆G50109为材料,利用酵母双杂交验证GsSNARE1与GsCBRLK的互作关系,通过real-time PCR分析干旱和盐处理后GsSNARE1的表达特性,对GsSNARE1进行原核表达,分析GsSNARE1抗盐旱功能。【结果】获得与GsCBRLK互作的GsSNARE1,同源克隆其全长CDS,并在酵母体内验证了二者的相互作用;Real-time PCR分析表明GsSNARE1受盐、干旱胁迫诱导,经PLACE分析,发现其启动子中含有多个逆境胁迫相关的顺式作用元件;GsSNARE1在植物不同组织中均表达;GsSNARE1的表达降低了重组菌对盐、干旱胁迫的耐性。【结论】验证了GsSNARE1与GsCBRLK的互作关系,GsSNARE1在不同组织中均表达,且受盐、干旱胁迫诱导,GsSNARE1的表达降低了重组菌耐盐、耐旱能力。 展开更多
关键词 野生大豆 snare蛋白 功能分析 盐胁迫 干旱胁迫
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SNARE蛋白在肿瘤发生中作用的研究进展
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作者 王诗 谢凯 +1 位作者 任志健(综述) 任斌辉(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第8期872-876,共5页
SNARE蛋白是一个普遍存在于真核细胞中的蛋白质家族,是介导突触泡融合、递质释放、胞质分裂和蛋白转运等多种细胞过程的关键蛋白。研究表明,许多SNARE蛋白在肿瘤发生发展中发挥重要作用,总结SNARE蛋白在肿瘤发生发展中的最新研究成果,... SNARE蛋白是一个普遍存在于真核细胞中的蛋白质家族,是介导突触泡融合、递质释放、胞质分裂和蛋白转运等多种细胞过程的关键蛋白。研究表明,许多SNARE蛋白在肿瘤发生发展中发挥重要作用,总结SNARE蛋白在肿瘤发生发展中的最新研究成果,对开发新型的特异性抗癌治疗方法具有重要意义。文章主要就近年来SNARE蛋白在肿瘤发生发展中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 snare蛋白 肿瘤 进展
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VAMP-2在鲈鱼组织中的表达分布
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作者 柴迎梅 刘胜浩 +1 位作者 丛柏林 黄晓航 《海洋科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B12期6-10,共5页
VAMP-2是真核生物中的一种膜受体蛋白,该蛋白在真核生物的胞吐、信号传导、胞内运输和分泌等活动中起到重要作用。采用免疫印迹方法和原位杂交技术,研究了VAMP-2在鲈鱼组织中的表达情况,分别对鲈鱼8种组织中的VAMP-2进行了检测。结... VAMP-2是真核生物中的一种膜受体蛋白,该蛋白在真核生物的胞吐、信号传导、胞内运输和分泌等活动中起到重要作用。采用免疫印迹方法和原位杂交技术,研究了VAMP-2在鲈鱼组织中的表达情况,分别对鲈鱼8种组织中的VAMP-2进行了检测。结果表明,除脑组织外,在肠、肝脏、肾脏、皮肤、脾脏、性腺等组织中也检测到VAMP-2的表达,各组织间的表达水平亦存在差异,肌肉组织未检测到表达。研究表明,鲈鱼的组织中表达的VAMP-2蛋白可能广泛参与鲈鱼的各种生理活动,并影响其生长、发育、繁殖和防卫等各项重要的生物学功能。 展开更多
关键词 snare蛋白 免疫印迹 原位杂交
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SNARE及其相关蛋白与生育能力相关性的探讨 被引量:1
14
作者 覃颖 《吉林医学》 CAS 2018年第12期2371-2373,共3页
可溶性NSF附着蛋白受体(Soluble NSF Attachment Protein Receptor,SNARE)蛋白通过介导囊泡的膜融合来调节细胞内的物质运输和调节神经递质的释放。此外,多项研究表明SNARE及其相关蛋白与卵泡发育排卵、卵母细胞的减数分裂、受精和男性... 可溶性NSF附着蛋白受体(Soluble NSF Attachment Protein Receptor,SNARE)蛋白通过介导囊泡的膜融合来调节细胞内的物质运输和调节神经递质的释放。此外,多项研究表明SNARE及其相关蛋白与卵泡发育排卵、卵母细胞的减数分裂、受精和男性生殖器的发育存在一定的关联。 展开更多
关键词 snare蛋白 卵泡发育 受精
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用三十年的探索阐述一段瞬间发生的过程
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作者 陈培华 孙坚原 《科学》 北大核心 2014年第1期14-17,共4页
摘取2013年度的诺贝尔生理学或医学奖桂冠,靠的不是一蹴而就的幸运发现,而是长达三十多年之科学探索。从神经科学探索的角度看,本届的三位获奖者以卓越的远见和判断力、勇气和洞识,探寻了突触囊泡释放相关分子的过程及作用机理,他们的... 摘取2013年度的诺贝尔生理学或医学奖桂冠,靠的不是一蹴而就的幸运发现,而是长达三十多年之科学探索。从神经科学探索的角度看,本届的三位获奖者以卓越的远见和判断力、勇气和洞识,探寻了突触囊泡释放相关分子的过程及作用机理,他们的探索成了一个传奇。人类对神经信息处理的理解,因他们的努力而得以深化。 展开更多
关键词 诺贝尔生理学或医学奖 囊泡 突触 snare蛋白 突触结合蛋白
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花鲈(Lateolabrax japonicus)VAMP-2基因的特征研究
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作者 陈魁 黄晓航 +1 位作者 包振民 Gaisano Herbert 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2006年第4期334-339,共6页
应用反转录PCR和锚定PCR方法克隆了全长715个碱基的花鲈(Lateolabrax japonicus)SPV2基因,证明其编码110个氨基酸的VAMP-2蛋白.运用生物信息学研究工具进行的一级结构分析显示:SPV2蛋白含有SNARE基序及其核心精氨酸残基,其序列N端有一N... 应用反转录PCR和锚定PCR方法克隆了全长715个碱基的花鲈(Lateolabrax japonicus)SPV2基因,证明其编码110个氨基酸的VAMP-2蛋白.运用生物信息学研究工具进行的一级结构分析显示:SPV2蛋白含有SNARE基序及其核心精氨酸残基,其序列N端有一N-糖肽键的糖基化位点,C端有一跨膜结构域.高级结构预测揭示SPV2蛋白的主要空间构象是一个组成SNARE基序的α螺旋卷曲骨架,其主要细节都与X晶体衍射方法得到的大鼠VAMP-2结构相一致.半定量PCR结果表明:在mRNA水平上,VAMP-2基因在鱼体各组织中广泛表达,其中以脑组织最为突出,而肌肉组织则相对最少. 展开更多
关键词 花鲈 VAMP-2蛋白 snare蛋白 生物信息学分析
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菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征模型大鼠突触体SNARE蛋白复合体的影响研究 被引量:6
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作者 冯鹏 孙治前 +6 位作者 罗文珍 史正刚 李玉霞 吴丽萍 尚菁 田文霞 陈静 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期709-719,共11页
目的研究菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征(Tourette syndrome,TS)模型大鼠突触体中SNARE蛋白复合体的调控作用,揭示菖蒲郁金汤治疗TS的药效机制。方法选择3周龄SD大鼠240只,依据随机数字表将SD大鼠分为空白组(60只)和造模组(180只),采用3,3&... 目的研究菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征(Tourette syndrome,TS)模型大鼠突触体中SNARE蛋白复合体的调控作用,揭示菖蒲郁金汤治疗TS的药效机制。方法选择3周龄SD大鼠240只,依据随机数字表将SD大鼠分为空白组(60只)和造模组(180只),采用3,3'-亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法制备TS动物模型。造模成功后,再次随机将造模组大鼠分为模型组、硫必利组及菖蒲郁金汤组,每组60只。从造模完成后次日(即d0)开始灌胃给药,空白组与模型组给予生理盐水,其余各组给予相应药物,每日1次,连续给药4周。各组大鼠分别于第0、7、14、21、28天(即d0,d7,d14,d21,d28),随机抽取12只大鼠,麻醉后取纹状体,采用Percoll密度梯度离心法制备纹状体中的突触体,并在透射电镜下进行形态学鉴定。ELISA法检测纹状体多巴胺(Dopamine,DA)含量,qPCR和Western blot法检测突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a和VAMP-2 mRNA及蛋白的表达,免疫组织化学法检测纹状体上述指标的表达。结果与空白组相比,模型组各观察点纹状体中DA含量降低(P<0.01),突触体/纹状体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量显著降低(P<0.05,P<0.01);与模型组相比较,硫必利组及菖蒲郁金汤组在干预期间的各观察点(d7,d14,d21,d28)纹状体中DA含量以及突触体/纹状体内SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量呈逐渐升高趋势。在治疗结束后(d28),菖蒲郁金汤组突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA,Syntaxin-1a蛋白及纹状体中SNAP-25、VAMP-2蛋白的表达高于硫必利组(P<0.05,P<0.01)。结论菖蒲郁金汤通过调控SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2的表达促进DA的释放,进而发挥其抗抽动的作用。 展开更多
关键词 菖蒲郁金汤 抽动秽语综合征 突触体 snare蛋白复合体
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STX 5对肝细胞癌转移的影响及其机制
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作者 郭婷婷 赵梓吟 +5 位作者 何明阳 吴天松 徐斌 张斌 吴泽华 韩冰 《精准医学杂志》 2024年第3期236-241,246,共7页
目的探讨STX5对肝细胞癌(HCC)转移的影响及其机制。方法收集2015年1—12月我院确诊为HCC的36例患者的临床资料,分析肿瘤组织中STX5表达水平与HCC患者临床病理特征的相关性。将人肝癌细胞MHCC97H分为A、B组,分别转染阴性对照质粒、过表达... 目的探讨STX5对肝细胞癌(HCC)转移的影响及其机制。方法收集2015年1—12月我院确诊为HCC的36例患者的临床资料,分析肿瘤组织中STX5表达水平与HCC患者临床病理特征的相关性。将人肝癌细胞MHCC97H分为A、B组,分别转染阴性对照质粒、过表达STX5质粒,将人肝癌细胞Huh7分为C、D组,分别转染阴性对照慢病毒、STX5敲减慢病毒,采用Western blot实验检测A~D组细胞内STX5蛋白表达水平,采用划痕实验检测A~D组细胞的迁移能力,采用Transwell实验检测A~D组细胞的迁移能力。对A、B组细胞经转录组学测序分析获得的差异基因进行GO功能和KEGG信号通路富集分析,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测A、B组细胞最显著差异表达基因的水平。将MHCC97H细胞分为E~H组,分别转染阴性对照质粒、过表达STX5质粒、阴性对照质粒+Sarilumab、过表达STX5质粒+Sarilumab,采用划痕实验检测E~H组细胞的迁移能力,采用Transwell实验检测E~H组细胞的迁移能力。结果肿瘤组织中STX5表达水平与患者的BMI、有无乙型肝炎病毒感染、肿瘤数量有关(P<0.05)。Western blot检测结果显示,B组与A组、C组与D组比较,细胞中STX5的表达显著增高(t=48.86、31.09,P<0.05)。Transwell实验和划痕实验结果显示,B组与A组、C组与D组比较,细胞迁移能力和划痕愈合百分比显著升高(t=7.95~31.09,P<0.05)。GO和KEGG富集分析显示,A、B组细胞差异基因主要富集在细胞迁移、炎症等相关功能和通路上;RT-qPCR实验结果显示,B组细胞中IL-6 mRNA的表达水平显著高于A组细胞(t=23.69,P<0.05)。Transwell和划痕实验结果显示,G组和E组、H组和F组比较,细胞迁移能力和划痕愈合百分比均显著降低(t=2.94~24.39,P<0.05)。结论STX 5可能通过上调IL-6 mRNA表达来促进肝细胞癌细胞的转移。 展开更多
关键词 Qa-snare蛋白质类 白细胞介素6 肝细胞 基因表达调控 肿瘤 肿瘤浸润 肿瘤转移
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水稻Qb-SNARE蛋白OsNPSN11多克隆抗体制备、鉴定与应用 被引量:4
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作者 鲍永美 刘永惠 +4 位作者 许冬清 黄骥 王州飞 王建飞 张红生 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期961-965,共5页
在真核生物细胞囊泡运输过程中的膜融合主要是由SNARE蛋白介导的,OsNPSN11是从水稻中克隆的Qb-SNARE家族基因,文章将OsNPSN11构建到原核表达载体pET-30a中与6个His标签融合,重组质粒pET-OsNPSN11转化BL21(DE3)0.5mmol/L IPTG诱导4h后获... 在真核生物细胞囊泡运输过程中的膜融合主要是由SNARE蛋白介导的,OsNPSN11是从水稻中克隆的Qb-SNARE家族基因,文章将OsNPSN11构建到原核表达载体pET-30a中与6个His标签融合,重组质粒pET-OsNPSN11转化BL21(DE3)0.5mmol/L IPTG诱导4h后获得了高效表达。用镍离子亲和树脂(Ni2+-NTA His Bind Resin)纯化融合蛋白,以纯化后的蛋白为抗原免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,Western blotting结果显示,该抗体能特异识别在原核系统表达的抗原,以及水稻不同组织质膜组分中的OsNPSN11,可用于转基因水稻中目标蛋白的表达分析。 展开更多
关键词 水稻 Qb-snare蛋白 OsNPSN11 多克隆抗体 转基因表达分析
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Syntaxin8在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 孙金鹏 田涛 +2 位作者 陈玲 刘燕春 孔继昌 《天津医药》 CAS 2017年第7期735-738,共4页
目的检测突触融合蛋白8(Syntaxin 8,STX8)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,分析其表达与NSCLC临床病理特征的关系。方法收集NSCLC癌组织及癌旁组织各70例用于免疫组化染色,并另取NSCLC组织及癌旁组织各10例用于RNA和蛋白提取,采用qRT... 目的检测突触融合蛋白8(Syntaxin 8,STX8)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,分析其表达与NSCLC临床病理特征的关系。方法收集NSCLC癌组织及癌旁组织各70例用于免疫组化染色,并另取NSCLC组织及癌旁组织各10例用于RNA和蛋白提取,采用qRT-PCR检测STX8 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测STX8蛋白表达,分析STX8的表达与NSCLC临床病理特征的关系。结果 NSCLC组织中STX8 mRNA表达水平高于癌旁组织(3.962 5±0.487 3 vs.0.538 2±0.097 5,t=21.797,P<0.01);免疫组化结果显示,STX8蛋白在NSCLC组织中高表达率高于癌旁组织[71.43%(50/70)vs.38.57%(27/70),χ~2=15.267,P<0.01];并且NSCLC组织中STX8蛋白表达水平同样高于癌旁组织(2.496 1±0.362 5 vs.0.340 2±0.119 1,t=17.876,P<0.01);STX8在不同的病理分型NSCLC患者癌组织中高表达率不同(P<0.05),在鳞状细胞癌、腺癌中高表达率高于腺鳞癌,大细胞癌中没有观察到STX8高表达;不同性别、年龄、肿瘤直径、TNM分期、有无淋巴结转移分组的NSCLC患者癌组织中STX8表达差异无统计学意义。结论 STX8在NSCLC中异常高表达,可能与NSCLC的发生发展进程相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺 snare蛋白质类 突触融合蛋白8
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