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缺氧诱导卵巢上皮性癌细胞形成拟态血管的前期研究 被引量:27
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作者 尧良清 丰有吉 +3 位作者 丁景新 徐丛剑 金鸿雁 殷莲华 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期662-665,共4页
目的探讨缺氧在卵巢上皮性癌细胞系SKOV3和ES2细胞拟态血管形成过程中的作用及西罗莫司对其的抑制效应。方法建立人工基底膜基质凝胶Matrigel三维培养系统,分别在常氧(常氧组)、缺氧(缺氧组)、缺氧时加入西罗莫司(缺氧+西罗莫司组)等条... 目的探讨缺氧在卵巢上皮性癌细胞系SKOV3和ES2细胞拟态血管形成过程中的作用及西罗莫司对其的抑制效应。方法建立人工基底膜基质凝胶Matrigel三维培养系统,分别在常氧(常氧组)、缺氧(缺氧组)、缺氧时加入西罗莫司(缺氧+西罗莫司组)等条件下诱导,观察SKOV3和ES2细胞形成拟态血管的能力;应用相差显微镜和扫描电镜观察拟态血管的形态及其立体结构的特点;用RT-PCR技术检测不同条件下缺氧诱导因子(HIF)1αmRNA的相对表达量。结果培养7d后,缺氧组SKOV3和ES2细胞出现变形、伸展,形成腔样、管状、分支和网络状等管道结构;而常氧组及缺氧+西罗莫司组,部分细胞出现伸展但不形成管道结构。缺氧组SKOV3和ES2细胞的HIF-1αmRNA表达量分别为0·801±0·034和0·736±0·059,显著高于缺氧+西罗莫司组(分别为0·025±0·007和0·231±0·035;P<0·01,P<0·05)和常氧组(分别为0·010±0·004和0·011±0·002;P均<0·01)。结论缺氧是卵巢上皮性癌细胞形成拟态血管的重要诱导因素,西罗莫司通过抑制HIF-1αmRNA的表达阻断拟态血管的形成。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 新生血管化 病理性 细胞缺氧 西罗莫司 缺氧诱导因子 卵巢上皮性癌 细胞形成 血管形成 MRNA表达量 skov3
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RNA干扰Survivin基因沉默对卵巢癌SKOV3及SKOV3/ADM细胞凋亡的影响 被引量:18
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作者 邓凯贤 钟玲 +3 位作者 姜梅贤 陈维贤 陈莹 何华 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期945-950,共6页
背景与目的:RNA干扰技术被广泛应用于肿瘤基因治疗、抗病毒感染、基因药物筛选等许多领域。Survivin基因在卵巢癌细胞株SKOV3及其耐药株SKOV3/ADM中高表达,是进行卵巢癌基因治疗理想的靶点。本研究探讨Survivin基因沉默后对卵巢癌细胞SK... 背景与目的:RNA干扰技术被广泛应用于肿瘤基因治疗、抗病毒感染、基因药物筛选等许多领域。Survivin基因在卵巢癌细胞株SKOV3及其耐药株SKOV3/ADM中高表达,是进行卵巢癌基因治疗理想的靶点。本研究探讨Survivin基因沉默后对卵巢癌细胞SKOV3及其耐药株SKOV3/ADM凋亡的影响。方法:将重组质粒pshRNA鄄Survivin以脂质体转染至SKOV3、SKOV3/ADM细胞。分别用半定量RT鄄PCR、Westernblot检测细胞内SurvivinmRNA和蛋白表达的变化,吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)染色法、TUNEL及流式细胞仪检测重组质粒诱导细胞凋亡的情况。结果:转染pshRNA鄄Survivin后,SKOV3、SKOV3/ADM细胞中SurvivinmRNA拷贝数明显减少,抑制率分别为83.79%和91.56%,蛋白质的表达水平显著降低;干扰组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,Survivin沉默后48h,SKOV3、SKOV3/ADM的细胞凋亡率分别为14.05%和21.02%,而在对照组未检测到明显凋亡。结论:重组质粒pshRNA鄄Survivin可明显抑制SKOV3、SKOV3/ADM细胞内SurvivinmRNA和蛋白的表达,介导卵巢癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因 SURVIVIN 细胞株 skov3 卵巢肿瘤 凋亡
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半枝莲黄酮类单体对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响 被引量:25
3
作者 郭丽华 齐聪 +2 位作者 杨红 樊零范 张勤华 《上海中医药杂志》 2013年第1期61-65,共5页
目的探讨半枝莲5个黄酮类单体(汉黄芩素、野黄芩苷、芹菜素、木犀草素和黄芩素)及与卡铂联用对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制的影响。方法应用MTT法检测半枝莲5个黄酮类单体对SKOV3细胞增殖的抑制能力,根据IC50筛选抑制能力最强的单体;光... 目的探讨半枝莲5个黄酮类单体(汉黄芩素、野黄芩苷、芹菜素、木犀草素和黄芩素)及与卡铂联用对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制的影响。方法应用MTT法检测半枝莲5个黄酮类单体对SKOV3细胞增殖的抑制能力,根据IC50筛选抑制能力最强的单体;光学显微镜下观察梯次浓度的筛选单体和卡铂对SKOV3细胞的形态学影响;采用MTT、凋亡试剂检测筛选单体与卡铂联用对SKOV3细胞增殖的抑制和凋亡的影响。结果与阴性对照组比较,半枝莲5个黄酮类单体可明显抑制SKOV3细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05),除芹菜素呈拱形变化趋势外,其余单体抑制作用均呈浓度依赖性,其中汉黄芩素48h的IC50值最低。梯次浓度的汉黄芩素作用48h后细胞形态渐呈松针样改变,而卡铂渐呈圆形或碎片状。汉黄芩素与卡铂联用对SKOV3细胞增殖的抑制作用明显优于卡铂组(P<0.01),呈时间依赖性;且细胞凋亡较卡铂组明显增多。结论半枝莲5个黄酮类单体对SKOV3细胞增殖均具有明显抑制作用,其中汉黄芩素作用最强。汉黄芩素可增强卡铂的细胞毒作用。 展开更多
关键词 半枝莲 汉黄芩素 skov3 卡铂 细胞增殖
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洛铂诱导顺铂耐药卵巢癌SKOV3/DDP细胞的凋亡 被引量:18
4
作者 刘萍萍 张灿珍 王羽丰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期829-832,894,共5页
目的探讨洛铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞凋亡及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度和时间洛铂对SKOV3/DDP细胞的生长抑制作用,并与其亲本细胞SKOV3(敏感株)相比较;进一步通过光镜及透射电镜观察SKOV3/DDP... 目的探讨洛铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药SKOV3/DDP细胞凋亡及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度和时间洛铂对SKOV3/DDP细胞的生长抑制作用,并与其亲本细胞SKOV3(敏感株)相比较;进一步通过光镜及透射电镜观察SKOV3/DDP细胞的形态学改变;并采用流式细胞仪检测细胞周期变化。结果洛铂作用SKOV3/DDP细胞的增殖呈时间剂量依赖模式受到抑制,与SKOV3细胞相比,差异无统计学意义(P>0.05);一定浓度的SKOV3/DDP作用一定时间,可诱导SKOV3/DDP细胞发生凋亡;光镜和透射电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞技术分析发现洛铂作用首先引起细胞周期分布的改变,随用药时间的延长,凋亡率逐渐升高。结论洛铂通过诱导凋亡而抑制体外培养的SKOV3/DDP细胞生长,其机制可能与细胞G0/G1期阻滞有关。 展开更多
关键词 洛铂(乐铂) 卵巢肿瘤 细胞凋亡 skov3 skov3/DDP
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二氧化碳气腹对人卵巢癌细胞株SKOV_3VEG F和MMP9表达的影响 被引量:13
5
作者 唐均英 黄金 姚珍薇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第15期1601-1603,共3页
目的探讨腹腔镜二氧化碳(CO2)气腹对恶性卵巢肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法体外培养人卵巢浆液性乳头状腺癌SKOV3细胞株,以CO2处理2 h,应用细胞爬片免疫组织化学法和半定量RT-PCR方法检测不同时相中血管内皮生长因子VEGF和MMP9表达水平... 目的探讨腹腔镜二氧化碳(CO2)气腹对恶性卵巢肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法体外培养人卵巢浆液性乳头状腺癌SKOV3细胞株,以CO2处理2 h,应用细胞爬片免疫组织化学法和半定量RT-PCR方法检测不同时相中血管内皮生长因子VEGF和MMP9表达水平。结果CO2处理后12 h SKOV3细胞VEGF和MMP9蛋白和mRNA表达显著增加,VEGF在CO2处理后24 h表达达到高峰,MMP9在48 h达到高峰。结论CO2可以增强卵巢癌细胞SKOV3的侵袭能力。 展开更多
关键词 二氧化碳 skov3 VEGF MMP9
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卵巢上皮性癌组织中缺氧诱导因子1α的表达及其与血管内皮生长因子的相关性 被引量:11
6
作者 蒋红元 丰有吉 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期767-770,i005,共5页
目的 探讨卵巢上皮性癌组织中缺氧诱导因子 (HIF) 1α与血管内皮生长因子 (VEGF)及微血管密度 (MVD)的相关性。方法 用卵巢癌细胞株SKOV3种植于裸鼠背部皮下形成移植瘤。对移植瘤组织给予生理盐水 2 0 0 μl为对照组 ;给予HIF 1α抑制... 目的 探讨卵巢上皮性癌组织中缺氧诱导因子 (HIF) 1α与血管内皮生长因子 (VEGF)及微血管密度 (MVD)的相关性。方法 用卵巢癌细胞株SKOV3种植于裸鼠背部皮下形成移植瘤。对移植瘤组织给予生理盐水 2 0 0 μl为对照组 ;给予HIF 1α抑制剂 (西罗莫司 ) 4mg/kg ,为西罗莫司组 ;给予VEGF抑制剂 (舒林酸 ) 10 0mg ,为舒林酸组。用免疫组化及RT PCR的方法 ,检测 3组肿瘤组织中HIF 1α、VEGF的表达以及MVD。结果 对照组HIF 1α及VEGF蛋白的表达为中、强阳性 ;西罗莫司组HIF 1α和VEGFmRNA表达均显著下降 ,为无表达或弱表达 ,两组比较 ,差异有显著性(P <0 0 5 )。经统计学检验 ,对照组与西罗莫司组HIF 1α和VEGFmRNA表达密切相关 (相关系数为 0 82 6 4 ,P <0 0 1) ;对照组HIF 1α靶基因 (肿瘤组织葡萄糖转运蛋白 1)的mRNA值为 0 8333,MVD为 31± 8,西罗莫司组HIF 1α肿瘤组织葡萄糖转运蛋白 1的mRNA值为 0 4 6 6 7,MVD为 13±5 ,两组具有相关性 (相关系数为 0 4 84 2 ,P <0 0 5 )。舒林酸组HIF 1α蛋白表达无改变 ,MVD表达为2 2± 6。结论 当HIF 1α的表达受到抑制时 ,VEGF的表达随之下降 ;HIF 1α对VEGF蛋白及mRNA的表达具有调节作用 ,从而使MVD降低。 展开更多
关键词 HIF-1α 表达 西罗莫司 MVD VEGF 对照组 血管内皮生长因子 RNA RT—PCR skov3
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半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响 被引量:14
7
作者 李冀 张睿苏 +3 位作者 高彦宇 张铁林 马育轩 芦冲 《中医药信息》 2016年第3期1-4,共4页
目的:探讨半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其机制。方法:体外常规培养人卵巢癌SKOV3细胞,倒置显微镜下观察半枝莲含药血清作用后SKOV3细胞形态的改变,MTT法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结... 目的:探讨半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其机制。方法:体外常规培养人卵巢癌SKOV3细胞,倒置显微镜下观察半枝莲含药血清作用后SKOV3细胞形态的改变,MTT法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结果:与空白对照组比较,给药后细胞状态变差,形态和贴壁情况等发生改变。半枝莲含药血清可有效抑制SKOV3细胞生长,低、中、高剂量组抑制率呈递增趋势,同剂量组24 h、48 h、72 h抑制率递增。流式细胞仪检测结果显示,与空白对照组比较,半枝莲含药血清组G0/G1期细胞所占比例增多,空白对照组、半枝莲含药血清低、中、高剂量组48 h细胞凋亡率分别为7.94%、8.36%、17.82%、21.12%。结论:半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖有抑制作用,其机制与影响细胞周期和诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 半枝莲 含药血清 skov3 MTT 细胞凋亡
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人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立及生物学性状的鉴定 被引量:9
8
作者 高国兰 邹春芳 +1 位作者 邹学森 陈文学 《实用癌症杂志》 2004年第5期454-457,共4页
目的 建立人卵巢上皮性癌裸鼠皮下移植瘤模型 ,为人卵巢癌的诊断及治疗诸方面提供理想的在体研究工具。方法体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV 3 ,采用皮下注射方式接种至裸小鼠 ,待肿瘤直径达 0 .8cm~ 1.0cm时 ,将其切下剪成直径为1mm... 目的 建立人卵巢上皮性癌裸鼠皮下移植瘤模型 ,为人卵巢癌的诊断及治疗诸方面提供理想的在体研究工具。方法体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV 3 ,采用皮下注射方式接种至裸小鼠 ,待肿瘤直径达 0 .8cm~ 1.0cm时 ,将其切下剪成直径为1mm~ 2mm小块 ,再接种至另一裸鼠皮下进行传代。病理组织学检查或透射电镜观察肿瘤 ,并观察染色体特征 ,检测裸鼠血清和肿瘤组织中肿瘤标志物CA12 5、CEA、AFP的浓度。结果 成功地建立了人卵巢上皮性癌细胞株SKOV 3裸小鼠皮下移植瘤模型 ,并传至第二代 ,原代接种成功率为 69.2 % (2 7/ 3 9) ,鼠间传代移植成功率为 10 0 .0 % ,具备人肿瘤生物学特点 ,但未观察到转移行为。裸鼠血清CA 12 5浓度低 ,但在肿瘤冻融产物中较高。结论 建立的人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型具有人卵巢癌特征 ,可用于研究卵巢癌的生物学特性 ,为卵巢癌临床诊断及治疗研究提供有用工具。 展开更多
关键词 卵巢癌 细胞株 skov3 动物模型 异种移植 小鼠
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卵巢癌细胞株冻融抗原负载的树突状细胞诱导CTL抗卵巢癌免疫应答的体外研究 被引量:9
9
作者 叶枫 陈怀增 +1 位作者 谢幸 叶大风 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期964-967,共4页
目的研究卵巢癌冻融抗原负载的树突状细胞(dendriticcells,DC)诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外杀伤卵巢癌细胞的细胞毒性效应。方法利用免疫磁珠分离法(MACS)分离纯化脐血CD34+细胞并在体外诱导分化为DC,用反复冻融法从卵巢癌细胞系SKOV... 目的研究卵巢癌冻融抗原负载的树突状细胞(dendriticcells,DC)诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)体外杀伤卵巢癌细胞的细胞毒性效应。方法利用免疫磁珠分离法(MACS)分离纯化脐血CD34+细胞并在体外诱导分化为DC,用反复冻融法从卵巢癌细胞系SKOV3中提取的可溶性相关抗原负载DC。流式细胞学检测负载抗原后DC表面各种分化相关抗原的表达,ELISA法检测DC上清中IL12的表达,混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC体外刺激T细胞增殖的能力,MTT法检测抗原负载DC激活的抗原特异性CTL对卵巢癌细胞的杀伤作用。结果与未经抗原负载的DC相比,经卵巢癌抗原负载的DC不仅能更高地表达各种DC分化相关抗原CD1α(73.35%±2.94%vs34.1%±2.35%)、CD83(73.9%±8.46%vs54.68%±3.26%)、CD80(91.95%±2.48%vs52.53%±3.18%)、HLADR(70.05%±2.35%vs48.7%±2.07%)以及CD54(88.9%±5.52%vs71.45%±2.29%),同时具有更强的刺激同种异体T淋巴细胞增殖和IL12分泌的能力(P均<0.05)。此外,卵巢癌细胞SKOV3冻融抗原负载DC激活的CTL在体外对SKOV3的杀伤率为77.35%,显著高于未经抗原负载的DC(P=0.0001)。结论经卵巢癌细胞冻融抗原负载DC激活的CTL在体外具有更强的增殖能力和杀伤卵巢癌细胞的作用。 展开更多
关键词 DC CTL 冻融抗原 卵巢癌细胞 相关抗原 树突状细胞 表达 skov3 分化 分离纯化
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三氧化二砷对人卵巢癌细胞VEGF基因表达的作用 被引量:8
10
作者 何凯 张桂荣 +3 位作者 杨淑丽 张辉 杜绍敏 张雪芹 《中国实验诊断学》 2008年第4期452-453,共2页
目的研究三氧化二砷在体外杀伤人卵巢癌细胞SKOV3的机理。方法运用ELISA法检测SKOV3细胞中,VEGF基因的表达情况。结果经三氧化二砷处理后人卵巢癌细胞SKOV3中,VEGF基因表达减弱。结论三氧化二砷可能是通过下调VEGF基因的表达,来抑制SKOV... 目的研究三氧化二砷在体外杀伤人卵巢癌细胞SKOV3的机理。方法运用ELISA法检测SKOV3细胞中,VEGF基因的表达情况。结果经三氧化二砷处理后人卵巢癌细胞SKOV3中,VEGF基因表达减弱。结论三氧化二砷可能是通过下调VEGF基因的表达,来抑制SKOV3肿瘤细胞的增殖和转移。 展开更多
关键词 三氧化二砷 skov3 血管内皮生长因子
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三氧化二砷对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞增殖抑制的影响 被引量:4
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作者 曾玉华 唐良萏 阳志宁 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期287-289,324,共4页
目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法,测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用,并绘制浓度抑制率量效曲线;用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化... 目的观察As2O3对人卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响。方法采用MTT比色法,测定不同浓度As2O3对SKOV3细胞生长的抑制作用,并绘制浓度抑制率量效曲线;用倒置显微镜及透射电镜观察药物作用后SKOV3细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞周期变化。结果As2O3对SKOV3有明显抑制作用,且具有浓度和时间依赖性。72h时As2O3的IC50为4.67μM。As2O31.0~4.0μM作用于SKOV3细胞在24~72h后均出现G2/M期阻滞,以48h最明显。As2O32.0μM作用24h、48h后流式细胞仪检测SKOV3细胞的凋亡率分别为3.68%、6.66%。倒置显微镜和透射电镜均观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征。结论As2O3对卵巢癌SKOV3细胞的生长有明显的抑制作用,并可诱导SKOV3细胞周期阻滞及细胞凋亡。 展开更多
关键词 三氧化二砷 卵巢肿瘤 skov3
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中药复方理冲生髓饮对Casp-8和CXCL2基因在人卵巢癌细胞株SKOV3中表达的影响 被引量:8
12
作者 怀其娟 韩凤娟 +2 位作者 王秀霞 邱丽楠 吴效科 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2010年第12期1689-1692,共4页
目的:采用基因芯片技术研究理冲生髓饮对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分组,灌胃给药,采血制备含药血清。提取对照组及理冲生髓饮组肿瘤细胞mRNA,制备DNA探针并分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,... 目的:采用基因芯片技术研究理冲生髓饮对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3的作用机制。方法:Wistar大鼠随机分组,灌胃给药,采血制备含药血清。提取对照组及理冲生髓饮组肿瘤细胞mRNA,制备DNA探针并分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,与基因表达谱芯片进行杂交,经扫描、分析,得出药物作用后表达有差异的基因。结果:共筛选出显著表达差异基因136种,其中16种基因表达水平下调,120种基因表达上调。结论:理冲生髓饮对卵巢癌细胞株SKOV3的生长有抑制作用,促进肿瘤细胞凋亡和抑制血管生成可能是其作用机制。 展开更多
关键词 理冲生髓饮 卵巢癌 基因芯片 skov3
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丹皮酚通过内质网应激和线粒体损伤途径促进卵巢癌细胞凋亡 被引量:9
13
作者 牛琴 钮红丽 +3 位作者 翟俊英 王韵一 马志宾 王莉 《广州中医药大学学报》 CAS 2020年第10期1991-1998,共8页
【目的】探讨丹皮酚对卵巢癌细胞凋亡的影响及其机制。【方法】用不同剂量(0、1、2、3、4、5、6、7、8 mmol/L)丹皮酚处理人正常卵巢表面上皮细胞HOSEpiC和人类卵巢癌细胞SKOV3。应用细胞计数试剂盒8(CCK8)测定丹皮酚对HOSEpiC和SKOV3... 【目的】探讨丹皮酚对卵巢癌细胞凋亡的影响及其机制。【方法】用不同剂量(0、1、2、3、4、5、6、7、8 mmol/L)丹皮酚处理人正常卵巢表面上皮细胞HOSEpiC和人类卵巢癌细胞SKOV3。应用细胞计数试剂盒8(CCK8)测定丹皮酚对HOSEpiC和SKOV3细胞的毒副作用,选择低剂量丹皮酚(1、2、5 mmol/L)进行后续实验。用丹皮酚(1、2、5 mmol/L)处理SKOV3细胞,溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)染色法观察SKOV3细胞的增殖能力,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测SKOV3细胞Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、Bax、葡萄糖调控蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源(CHOP)、cleaved Caspase-12、cleaved Caspase-3、细胞色素c(Cyto-c)、细胞凋亡诱导因子(AIF)、细胞色素c氧化酶4(COX IV)、cleaved Caspase-9的表达,流式细胞术检测细胞SKOV3凋亡和Ca2+水平。【结果】丹皮酚(2、5 mmol/L)对正常细胞无害,可剂量依赖性地降低SKOV3细胞存活率。丹皮酚(2、5 mmol/L)抑制SKOV3细胞增殖,促进SKOV3细胞凋亡。与空白对照组比较,丹皮酚(2、5 mmol/L)均升高内质网应激相关的凋亡通路蛋白GRP78、CHOP、cleaved Caspase-12、cleaved Caspase-3表达水平及Ca2+含量(均P<0.05)。与空白对照组比较,丹皮酚2、5 mmol/L均降低线粒体损伤相关的凋亡通路Cyto-c、AIF(线粒体内)水平,升高Cyto-c、AIF(胞质)的表达水平,升高cleaved Caspase-9表达水平,下调Bcl-2及上调Bax表达水平(均P<0.05),且呈剂量依赖性。【结论】丹皮酚剂量依赖性地调控SKOV3细胞中内质网应激和线粒体损伤相关的凋亡通路蛋白,可促进卵巢癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 丹皮酚 卵巢癌 内质网应激 线粒体损伤 细胞凋亡 skov3
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乳源免疫调节肽体外抑制人卵巢癌细胞侵袭和转移 被引量:10
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作者 魏彩 秦宜德 +3 位作者 郑欣 何晓光 张文晓 杨浩然 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期42-48,共7页
目的探讨乳源免疫调节肽(PGPIPN)对人卵巢癌细胞株(SKOV3)侵袭和转移的影响。方法 Transwell小室测定其侵袭力和迁移力,细胞划痕实验测定细胞运动能力,细胞克隆形成实验观察SKOV3的克隆形成能力,用MTT法比较PGPIPN对SKOV3、人正常肝细胞... 目的探讨乳源免疫调节肽(PGPIPN)对人卵巢癌细胞株(SKOV3)侵袭和转移的影响。方法 Transwell小室测定其侵袭力和迁移力,细胞划痕实验测定细胞运动能力,细胞克隆形成实验观察SKOV3的克隆形成能力,用MTT法比较PGPIPN对SKOV3、人正常肝细胞株LO2和小鼠永生化成纤维细胞株(MEFS)的生长抑制情况,检测PGPIPN的细胞毒性。结果 Transwell试验中,与空白对照组相比,浓度为1 mg.L-1和10 mg.L-1的PGPIPN明显抑制了SKOV3的侵袭和转移(P<0.01),抑制率分别为20.20%和23.78%;划痕实验显示对细胞的运动能力得到了明显的抑制;平板法的克隆形成实验结果较明显,与空白对照组相比,1 mg.L-1和10 mg.L-1的PGPIPN抑制率分别为32.50%和38.11%;PGPIPN抑制SKOV3细胞生长,对正常细胞无明显影响。结论乳源免疫调节肽能够抑制人卵巢癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 乳源免疫调节肽 顺铂 卵巢癌细胞 抑制 侵袭
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miR-124在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌细胞生物学行为的影响 被引量:8
15
作者 舒锦 袁犁 +2 位作者 刘兴明 李少林 周琦 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期430-436,共7页
目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-124在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法 :应用实时荧光定量PCR法检测35例卵巢癌组织及其邻近癌旁组织中miR-124的表达水平。将miR-124模拟物片段(has-miR-124 mimic)转... 目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-124在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法 :应用实时荧光定量PCR法检测35例卵巢癌组织及其邻近癌旁组织中miR-124的表达水平。将miR-124模拟物片段(has-miR-124 mimic)转染入卵巢癌SKOV3细胞中,应用CCK-8(cell counting kit-8)法和FCM法检测miR-124对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,Transwell小室法检测其对SKOV3细胞迁移和侵袭能力的影响,蛋白质印迹法检测SKOV3细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α(phosphatidylinositol-3 kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)、AKT和磷酸化AKT(phospho-AKT,p-AKT)蛋白表达水平的变化。结果:卵巢癌组织中miR-124的表达水平明显低于邻近的癌旁组织(P<0.05)。has-miR-124 mimic转染组SKOV3细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显低于空白对照组(只转染lipofectamine)和阴性对照组[转染miR-124模拟物对照片段(has-miR-124 mimic control)](P<0.05),早期凋亡细胞所占比例明显增加(P<0.01),PIK3CA和p-AKT蛋白的表达水平明显下降(P<0.01),总AKT蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:卵巢癌组织中miR-124的表达水平下降。卵巢癌SKOV3细胞中miR-124过表达可明显抑制细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡,这一作用可能与抑制卵巢癌细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K)/AKT信号通路的活性有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 微RNAS 细胞增殖 细胞凋亡 miR-124 细胞 skov3
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巴西苏木素通过激活Wnt/β-catenin通路调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的研究 被引量:4
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作者 贾晓晴 佟晓哲 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1237-1241,共5页
目的探讨巴西苏木素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,随机分为空白组及低、中、高剂量实验组和联合组。低、中、高剂量实验组分别用20、30和40μmol·L-1巴西苏木素... 目的探讨巴西苏木素对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,随机分为空白组及低、中、高剂量实验组和联合组。低、中、高剂量实验组分别用20、30和40μmol·L-1巴西苏木素处理细胞,联合组用40μmol·L-1巴西苏木素和10 ng·mL-1DKK1共同处理细胞,空白组给予常规培养。用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用细胞划痕、Transwell小室实验分别检测细胞的迁移、侵袭能力,用蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达水平。结果中、高剂量实验组和空白组的凋亡率分别为(15.24±1.20)%、(25.13±1.46)%和(3.26±0.78)%,划痕愈合率分别为(20.55±3.16)%、(9.58±1.92)%和(45.76±2.24)%,侵袭细胞数分别为(100.00±4.00)、(44.66±10.44)和(207.66±15.11)个,Bax蛋白相对表达水平分别为0.78±0.03、1.32±0.09和0.25±0.11,Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.76±0.05、0.48±0.02和1.02±0.01,E-carderin蛋白相对表达水平分别为0.80±0.05、1.19±0.02和0.30±0.03。中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论巴西苏木素能够抑制SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 巴西苏木素 skov3 凋亡 上皮间质转化 WNT/Β-CATENIN
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乳源免疫调节肽对人卵巢癌SKOV3细胞生长及凋亡的影响 被引量:5
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作者 李素萍 郭晓婕 +3 位作者 贾晓益 顾芳 刘忠 秦宜德 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期527-531,共5页
目的:探讨乳源免疫调节肽对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌SKOV3细胞生长和凋亡的影响。方法:不同浓度乳源免疫调节肽对体外培养的SKOV3细胞作用24、48、72及96 h后,应用MTT法检测细胞的生长抑制情况,采用HE染色、透射电子显微镜观察及FCM分... 目的:探讨乳源免疫调节肽对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌SKOV3细胞生长和凋亡的影响。方法:不同浓度乳源免疫调节肽对体外培养的SKOV3细胞作用24、48、72及96 h后,应用MTT法检测细胞的生长抑制情况,采用HE染色、透射电子显微镜观察及FCM分析细胞周期及细胞凋亡情况。结果:乳源免疫调节肽对SKOV3细胞有增殖抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且增殖抑制作用具有时间和浓度依赖性。HE染色和电子显微镜下均观察到用药后出现凋亡细胞的形态学特征。FCM检测发现,乳源免疫调节肽作用后细胞的凋亡率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),其中3×10-4g/L PGPIPN(Pro-Gly-Pro-Zle-Pro-Asn)组的细胞凋亡率最高,达29.4%。结论:乳源免疫调节肽可以抑制体外培养的人卵巢浆液性乳头状囊腺癌SKOV3细胞的增殖,并可诱导其凋亡。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 细胞培养技术 细胞凋亡 PGPIPN 细胞 skov3
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奈达铂体外诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞凋亡的机制 被引量:4
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作者 王莉 刘汉锋 +2 位作者 蔡正文 蓝东 覃海园 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1216-1220,共5页
目的探讨研究奈达铂(NDP)体外对人卵巢癌顺铂原发耐药细胞株SKOV3和继发耐药株SK-OV3/DDP的抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的NDP对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)... 目的探讨研究奈达铂(NDP)体外对人卵巢癌顺铂原发耐药细胞株SKOV3和继发耐药株SK-OV3/DDP的抑制作用及其机制。方法采用MTT法检测体外不同时间不同浓度的NDP对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的杀伤作用,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)测定给药前后细胞凋亡率及周期分布变化;半定量PCR分析凋亡基因Bcl-2,Bax,caspase-3,caspase-9及反应肿瘤细胞侵袭力的基因MMP-2的表达变化。结果 NDP能明显抑制SKOV3及SKOV3/DDP生长,呈时间-剂量依赖性;流式结果显示随时间、浓度增加,SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡明显增加,S期细胞的比例增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,Bcl-2、MMP-2表达减少,Bax,caspase-3,caspase-9表达增加。结论 NDP可抑制SKOV3和SKOV3/DDP细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡,细胞S期阻滞,下调Bcl-2及上调Bax,caspase-3,caspase-9的表达有关;同时可下调MMP-2的表达,有利于降低卵巢癌细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 奈达铂 skov3 skov3/DDP 细胞凋亡 顺铂耐药
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体外模拟二氧化碳气腹环境对卵巢癌细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 蒋宇林 冷金花 郎景和 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期634-635,共2页
关键词 体外模拟 二氧化碳气腹 妇科恶性肿瘤 细胞凋亡 腹腔镜手术 卵巢癌细胞 CO2气腹 skov3 生长
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蛋白酶体抑制剂诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡中伴随caspase依赖的BAG3剪切 被引量:6
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作者 穆庆 李百鸥 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第5期991-994,共4页
目的:探讨Bcl-2相关抗凋亡基因3(Bcl-2-associated athanogene 2,BAG3)在蛋白酶体抑制剂诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡中的作用。方法:选取人卵巢癌细胞系SKOV3,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组和MG132+Z-VAD联合处理... 目的:探讨Bcl-2相关抗凋亡基因3(Bcl-2-associated athanogene 2,BAG3)在蛋白酶体抑制剂诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡中的作用。方法:选取人卵巢癌细胞系SKOV3,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组和MG132+Z-VAD联合处理组,按不同时段处理细胞。实时定量RT-PCR法检测各组细胞BAG3 mRNA表达及MG132诱导其表达时效性,Western blot蛋白印迹法检测各组细胞BAG3蛋白表达,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡。结果:与空白对照组相比,在MG132诱导作用下,SKOV3细胞中BAG3 mRNA表达增加(P<0.01),并随作用时间呈现时效性。发现40kDa BAG3分裂产物,其细胞凋亡率亦随之增加。结论:蛋白酶体抑制剂可诱导上调卵巢癌细胞中BAG3基因表达,BAG3蛋白裂解导致细胞凋亡增加,这一效应可能依赖caspase介导完成。 展开更多
关键词 Bcl-2相关抗凋亡基因3 BCL-2 蛋白酶体抑制剂 caspase 卵巢癌 skov3
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