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反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达 被引量：7
1
作者 刘朝晖 杨宇 +3 位作者 庄鹏辉 许杰华 马延兵 胡海涛 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期10-13,共4页
目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH... 目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率。结果成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL。在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达。在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到30%以上。结论SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率。 展开更多
关键词 sk—n—sh神经母细胞瘤细胞 增强型绿色荧光蛋白 反转录病毒载体
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人参皂苷Rg_1对LPS诱导的SK-N-SH细胞株脑啡肽酶表达的影响 被引量：7
2
作者 吕俊华 黄丰 +4 位作者 刘月丽 胡海燕 张荣华 蔡宇 杨丽 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期117-119,共3页
目的:探讨人参皂苷Rg1 对LPS诱导的SK- N -SH细胞株脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法:应用MTT比色法检测一定剂量LPS(50mg/L)和不同浓度人参皂苷Rg1 (5、10、20μmol/L)对SK -N- SH细胞存活率的影响,应用RT PCR观察细胞中NEP表达的变化... 目的:探讨人参皂苷Rg1 对LPS诱导的SK- N -SH细胞株脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法:应用MTT比色法检测一定剂量LPS(50mg/L)和不同浓度人参皂苷Rg1 (5、10、20μmol/L)对SK -N- SH细胞存活率的影响,应用RT PCR观察细胞中NEP表达的变化。结果: 50mg/L的LPS能使SK- N -SH细胞存活率降低,细胞内NEP的表达下降。人参皂苷Rg1 能提高LPS处理的SK- N -SH细胞的存活率,使NEP的表达增高。结论:人参皂苷Rg1 对LPS造成的细胞毒性具有一定的保护作用,并可对抗LPS对细胞内NEP表达的降低。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 sh sk LPS诱导 表达 脑啡肽 细胞株 肽酶 细胞内 RT-PCR
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